Vera Andrade
http://histologiavvargas.wordpress.com/
Microscópio
 O microscópio é um instrumento que
permite observar objetos não visíveis a olho
nu
 Isto só é possível por meio de um sistema
óptico composto por lentes de cristal que
aumentam a imagem do objeto
Microscopia de Luz
Evolução do microscópio de luz
 Os primeiros óculos, ano 1280,
Itália
 Galileu Galilei inventou o
telescópio no século XVI (duas
lentes num tubo)
 Zacharias Jansen (holandês)
inventou o primeiro
microscópio, em 1595 Século
XVI, formado por três tubos
encaixados
Microscopia de Luz
Evolução do microscópio de luz
Microscópio de Leeuwenhoek
Microscopia de Luz
Evolução do microscópio de luz
Robert Hooke, 1670
Microscopia de Luz
Evolução do microscópio de luz
Microscopia de Luz
Evolução do microscópio de luz
Microscopia de Luz
Evolução do microscópio de luz
Microscópio óptico, Microscópio composto ou
Microscópio de Campo claro
Constituído de parte mecânica e parte óptica
Parte Mecânica
Tubo ou cabeçote
Coluna ou braço
Revólver
Parafuso do
Condensador
Platina ou mesa
Parafuso
Macrométrico
Luz
Parafuso
Micrométrico
Base ou pé
Botão de liga
e desliga
Botão aumenta a intensidade de luz
Parte Mecânica
Base ou pé  suporte
Coluna ou braço  apoio paras as estruturas
Tubo  peça de ligação entre a ocular e o revólver
Revólver  peça giratória que contém as lentes objetivas
Platina  suporta a preparação
Parafuso Macrométrico, de passo largo, é para movimento
de grande amplitude
Parafuso Micrométrico, de pequeno passo, é destinado a
focar o material
Parte Óptica
Lentes
oculares
Lentes
objetivas
Condensador
(lente)
Diafragma
Parte Óptica
Condensador, concentra os raios luminosos  objeto


possui um diafragma de diâmetro modificável, proporciona
uma maior ou menor intensidade luminosa

Lentes objetivas, próximas do objeto, projetam a
imagem ampliada do objeto em direção a ocular

Lente ocular, funciona como uma lupa, amplia a
imagem fornecida pela objetiva
Parte Óptica
CONDENSADOR – geralmente negligenciado não interfere no aumento da imagem, mas
ele influencia em sua nitidez e riqueza de
detalhes
Age no LIMITE DA RESOLUÇÃO do sistema
óptico, embora esta propriedade dependa
principalmente das lentes objetivas
LIMITE DE RESOLUÇÃO
LR de um microscópio é a
capacidade de:
Separar detalhes
Produzir imagens separadas de
partículas muito próximas
É a menor distância que deve existir
entre dois pontos para que eles
apareçam separado
Limite de Resolução
LR = K . 
AN
 K é uma constante 0,612
 é o comprimento de onda luz branca (verdeamarelo) = 0,55 m
 AN é a abertura numérica da lente objetiva
 O limite e resolução é diretamente proporcional ao comprimento de
onda e inversamente proporcional a abertura numérica (vem gravada
na lente)
 As objetivas trazem outras informações
 160 ou 170, indica em milímetro o comprimento do tubo do
microscópio, onde devem ser usadas as objetivas para que dêem
melhores resultados.
 0,17, distância de trabalho, que significa o tamanho da lamínula,
para a qual as aberrações são corrigidas.
Códigos de cores das lentes objetivas
Aumento
Cores
4X ou 5X
10X
40 ou 50X
100X
Imersão – óleo
Vermelho
Amarelo
Azul claro
Branco
Imagem real ampliada e invertida
"Microscope compound diagram" por Fountains of Bryn Mawr - Obra do próprio (Based on this and this work and distributed under the same
license).. Licenciado sob CC BY-SA 3.0, via Wikimedia Commons http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Microscope_compound_diagram.png#mediaviewer/File:Microscope_compound_diagram.png
Outros tipos de microscópios
Microscópios Ópticos – MO
Microscópio de Contraste de Fase
Microscópio de Campo Escuro
Microscópio de Fluorescência
Microscópio de Polarização
Microscópio Eletrônico – ME
Microscópio de contraste de fase – células vivas
 Usa as propriedades da
refração da luz
 Refração é a passagem da luz de
um meio para outro
 Microscópio de contraste de
fase transforma diferentes fases
luminosas, para as quais o olho
não é sensível, em diferentes
intensidade luminosa
perceptíveis
Microscopia de luz convencional
Microscopia de contraste de fase
Microscópio de campo escuro
Objetiva
LUZ
 Condensador é substituído
por um condensador de
fundo escuro
 A preparação é iluminada
por raios oblíquos
 A célula fica com
aparência brilhante e o
fundo escuro
CONDENSADOR
Microscopia de campo escuro - células de sangue.
Microscópio de Polarização
2 raios de luz = Raios polarizados
 Quando um raio de luz atravessa
certas substâncias do nosso corpo
que são birrefringentes 
acontece uma dupla refração
 Substâncias como dentes, ossos,
fibras de colágeno e outras
possuem um estado cristalino,
arranjo molecular interno
 Possui dois prismas  um prisma
utiliza as propriedades de um único
raio eliminando o outro
Microscópio de luz polarizada:
da dentina (dente).
Microscópio de luz polarizada:
Fibras de colágeno exibem
birrefringência (brilhantes ou
amarelas).
Microscópio de Fluorescência
Emite uma luz
ultravioleta
Espelho
Vários filtros
Permite detectar proteínas ou estruturas marcadas com compostos fluorescentes
Similar ao MO, exceto pela luz empregada  Luz ultravioleta e pelos 2 conjuntos de filtros que
desviam os raios do olho do observador.
Cultivo de astrócitos. Imunofluorescência verde contra GFAP
(proteína de filamentos intermediários) e azul (união com DNA)
Alberts et al. Biología Molecular de la célula. (1996) p. 856.
Microscopia Eletrônica
 Ernest Ruska e Max Knoll,
na Alemanha, em 1932
 Utiliza feixe de elétrons,
comprimento de onda
muito pequeno, limite de
resolução 1.000X menor
que microscópio de luz
Microscopia Eletrônica
Microscopia eletrônica, músculo estriado cardíaco.
Medidas
Medidas
Unidade de medida
Símbolo
Valor
Micrômetro
m
0,001 mm
Nanômetro
nm
0,000001 mm (10-6 mm) ou 10-3 m