UFMG - MONOGRAFIA PAD
Comportamento Suicida em Bipolares
Laboratório de Farmacologia e Biologia Molecular
Instituto de Ciências Biológicas
Comportamento Suicida em Bipolares
Mikelle Alexandra Ferreira
Orientador: Prof.Humberto Correa
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Comportamento Suicida em Bipolares
Suicídio
• O suicídio é um assunto de saúde pública
• Figura entre as 10 principais causas de mortes e representa 1,8% de todas
as mortes, sendo a segunda ou terceira causa de morte entre jovens de 15 25 anos.
• Estima-se que em 2020, 1,5 milhão de mortes ocorrerão por suicídio (2,4%
de todas as mortes).
• As tentativas de suicídio são 10 - 20 vezes mais frequentes do que os
suicídio completos e é o principal preditor de futuras tentativas e suicídio
completo.
• As tentativas graves e o suicídio completo ocorrem em quase 100% dos
casos em pessoas com doença psiquiátrica.
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Suicídio e disfunção serotoninérgica
• O sistema serotoninérgico é
complexo e envolve enzimas,
transportadores e receptores.
• Vários estudos mostraram que
suicídio estava intimamente
relacionado com baixa função
serotoninérgica (Asberg e cols.,
1976)
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Suicídio e disfunção serotoninérgica
•
Para o gene da triptofano hidroxilase os polimorfismos a serem
estudados são duas variações no íntron 7 (A218C e A779C).
• Para a proteína do receptor 5-HT2A o polimorfismo mais
estudado é uma mutação silenciosa no aminoácido 102
(T102C).
• Na proteína do receptor 5-HT2C estuda-se um polimorfismo
que consiste de uma substituição Cys23-Ser23 na primeira
região hidrofóbica.
• Para a proteína do receptor 5-HT1A estuda-se uma substituição
de glicina por serina no aminoácido 22 e de uma isoleucina por
valina no aminoácido 28 (Nakhai e col., 1995).
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Suicídio e disfunção serotoninérgica
•
Para o gene da enzima MAO-A estuda-se um polimorfismo
que consiste de uma repetição variável na região promotora da
MAO-A, com possíveis diferenças funcionais entre os alelos
(Sabol e col., 1998)
• Para o gene do transportador de serotonina estuda-se um
polimorfismo na região promotora, próximo ao início da
transcrição com duas variantes alélicas, uma longa e uma curta.
• Localizado no cromosomo 17q11.1-q12 (Ramamoorthy
ecols.,1993)
• Possível papel funcional deste polimorfismo em que o alelo
curto recaptaria menos serotonina do que o longo (Lesh e
col., 1996, Du e col., 1999)
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522 pb
Suicídio e disfunção serotoninérgica
CCGCTCTGAATGCCAGCACCTAACCCCTAATGTCCCTACTGCAGC
CTCCCAGCATCCCCCCTGCAACCTCCCAGCAACTCCCTGTACCCC
TCCTAGGATCGCTCCTGCATCCCCCATTATCCCCCCCTTCACCCCT
CGCGGCATCCCCCCTGCACCCCCAGCATCCCCCCTGCAGCCCCC
CCAGCATCTCCCCTGCACCCCCAGCATCCCCCCTGCAGCCCTTCC
AGCATCCCCCTGCACCTCTCCCAGGATCTCCCCTGCAACCCCC
ATTATCCCCCCTGCACCCCTCGCAGTATCCCCCCTGCACCCCCC
AGCATCCCCCCATGCACCCCCGGCATCCCCCCTGCACCCCTCC
AGCATTCTCCTTGCACCCTACCAGTATTCCCCCGCATCCCGGCCTC
CAAGCCTCCCGCCCACCTTGCGGTCCCCGCCCTGGCGTCTAGGTG
GCACCAGAATCCCGCGCGGACTCCACCCGCTGGGAGCTGCCCTCG
CTTGCCCGTGGTTGTCCAGCTCAGTCCCTCT
478 pb
CCGCTCTGAATGCCAGCACCTAACCCCTAATGTCCCTACTGCAGC
CTCCCAGCATCCCCCCTGCAACCTCCCAGCAACTCCCTGTACCCC
TCCTAGGATCGCTCCTGCATCCCCCATTATCCCCCCCTTCACCCCT
CGCGGCATCCCCCCTGCACCCCAGCATCCCCCCTGCAGCCCTTCC
AGCATCCCCCTGCACCTCTCCCAGGATCTCCCCTGCAACCCCC
ATTATCCCCCCTGCACCCCTCGCAGTATCCCCCCTGCACCCCCC
AGCATCCCCCCATGCACCCCCGGCATCCCCCCTGCACCCCTCC
AGCATTCTCCTTGCACCCTACCAGTATTCCCCCGCATCCCGGCCTC
CAAGCCTCCCGCCCACCTTGCGGTCCCCGCCCTGGCGTCTAGGTG
GCACCAGAATCCCGCGCGGACTCCACCCGCTGGGAGCTGCCCTCG
CTTGCCCGTGGTTGTCCAGCTCAGTCCCTCT
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Suicídio e disfunção serotoninérgica
Gens relacionados à função serotoninérgica são candidatos
naturais ao estudo do suicídio
Variações funcionais
secundárias a variações
genéticas
Variações na expressão
do fenótipo
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Transtorno Bipolar e Suicídio
• O Transtorno
– Tipos
– Fases
– Principais teorias etiológicas
• Dentre todos os pacientes psiquiátricos é o grupo que apresenta as
maiores taxas de suicídio e que utiliza métodos mais letais
(Baldessarini e Tondo, 2003)
• 20% da mortalidade neste grupo é devida ao suicídio e 25-50%
fazem pelo menos 1 tentativa ao longo da vida (Goodwin e Jamoson,
1990)
• Terceira principal causa de morte entre bipolares (Sharma e
cols.,1994), porém a que apresenta maior risco relativo.
• Comorbidades são bastante comuns
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Transtorno Bipolar e Suicídio
Causa
Mortes observadas - A (%)
Mortes esperadas - B (%)
A/B
Suicídio
15,7
0,67
23,4
Cardiovascular
42,1
14,0
3,0
Respiratória
33,3
10,8
3,1
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Transtorno Bipolar e Suicídio
•
Fatores de risco:
–
–
–
–
–
–
–
História familiar de suicídio
Sexo masculino
História de abuso sexual infantil
Abuso de substância
Maior ocorrência de episódios mistos e depressivos
Maior grau de impulsividade
Diagnóstico de transtorno bipolar II ( comorbidades
psiquiátricas e abuso de drogas/dificuldade no diagnóstico)
• Dependência de drogas ou álcool é 7,9 vezes mais
freqüente em bipolares do que na população em geral
• Ainda se faz necessário mais estudos
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Objetivos do Trabalho
•
•
•
•
•
Avaliar entre os pacientes admitidos com diagnóstico de
Transtorno bipolar (DSM-IV ) para tratamento psiquiátrico no
Hospital Governador Israel Pinheiro a freqüência de história de
tentativa de suicídio, assim como suau características como
letalidade, gravidade e tipo.
Investigar nos pacientes com história de tentativa de suicídio
cuja letalidade tenha sido igual ou superior a 3 a freqüência dos
alelos dos genes relacionados ao sistema serotoninérgico.
Comparar a freqüência dos polimorfismos estudados entre os
pacientes citados com a freqüência desses mesmos alelos em
um grupo controle.
Correlacionar os polimorfismos dos genes em estudo com
sintomas psicopatológicos e traços de personalidade obtidos
através de escalas e questionários específicos.
Quantificar a magnitude e importância relativa decada
componente biológico, social e psicológico em relação ao
comportamento suicida.
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Materiais e Métodos
• DNA genômico extraído a partir do sangue periférico dos
pacientes (5 mL para cada participante), coletado através do
sistema à vácuo em tubos heparinizados. Extração feita pela
sílica ou pelo Kit.
• Após a extração é feita a reação em cadeia da polimerase
(PCR).
• Então é feita eletroforese em gel de poliacrilamida
• Revelação do gel em solução de prata
• Protocolos:
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Materiais e métodos
PCR- 1 tubo
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Materiais e Métodos
Programa do
termociclador:
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Materiais e Métodos
Eletroforese em Gel de Poliacrilamida (PAGE)
•
→ 1,5 L do padrão de peso molecular de 100 pb (12 L de 100 pb DNA Ladder –
Invitrogen; 58 L de Tampão de Amostra e 130 L de H2O destilada)
•
→ 5 L do produto da PCR + 1 L de Gel Loading Buffer (0,255% Azul de Bromofenol;
0,25% Xileno Cianol; 30% Glicerol)
•
→ Gel de poliacrilamida (6,5%): a partir de uma solução de acrilamida 30% (10 g bis-
acrilamida, 20 g acrilamida, 1000 ml H2O qsp), TBE 10x (60,50 g Tris Base; 30,85 g
Ácido Bórico; 3,72 g EDTA dissódico bihidratado; 1000 mL H2O qsp) e H2O destilada.
•
Polimerização realizada com APS (10 g Perssulfato de Amônio; 100 mL H2O qsp) e
TEMED (BioRad)
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Materiais e Métodos
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Materiais e Métodos
• → Placas submetidas a 90 mV e tamponadas em TBE 1x (10 mL TBE 10x; 1000 mL
H2O qsp)
•
•
→ Coloração pela prata:
•
- Fixação em ácido acético 10% (10 min)
•
- Lavagem em H2O (3 min)
•
- Incubação em solução de prata (5 mL de nitrato de prata 10x: 10,2 g de nitrato de
prata em 500 mL de H2O; 75L de Formaldeído 37% e 50 mL de H2O qsp) (10 min)
•
- 2 lavagens em H2O
•
- Adição de solução reveladora (1,5 g de Carbonato de Sódio; 75 L de
Formaldeído 37%; 20 L de Tiossulfato de Sódio: 50 g de tiossulfato em 2 mL de H2O
qsp)
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Resultados Preliminares
• Até o momento fez-se a PCR de
32 amostras de pacientes para o
polimorfismo do 5HTTLPR.
Destas, 25 amplificaram, com
os seguintes genótipos:
• 01- Homozigoto longo
• 05- Heterozigoto
• 06- Homozigoto longo
• 08- Homozigoto longo
• 09- Homozigoto longo
• 10- Homozigoto curto
• 11- Homozigoto longo
• 12- Homozigoto curto
• 14- Homozigoto curto
• 15- Homozigoto curto
• 16- Homozigoto curto
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
17- Homozigoto curto
18- Heterozigoto
19- Homozigoto longo
20- Homozigoto longo
21- Homozigoto longo
22- Homozigoto curto
23- Homozigoto curto
24- Homozigoto curto
25- Homozigoto curto
26- Homozigoto curto
27- Homozigoto curto
28- Homozigoto curto
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Resultados preliminares
• 31- Homozigoto curto
• 32- Homozigoto curto
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Agradecimentos
• Laboratório de Farmacologia e Biologia Molecular do ICB,
principalmente à profa. Wolfanga
• Prof. e orientador Humberto Correa
• Coordenação do PAD - Cleida
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Obrigada a
todos