BOLETIMTÉCNICO
CD4 Analyser - Pima • Novembro de 2012
Utilidade Clínica
Alere CD4 Test
A concentração de Linfócitos T helper (CD4) no
sangue é comumente referida como contagem
absoluta de linfócitos T-CD4+ e medida em
células/µL.
A contagem basal de CD4 varia de pessoa para
pessoa e depende do estado imune. Algumas
condições influenciam no número de células
CD4 como: idade (crianças jovens tem valores
significativamente mais altos que adultos aproximadamente 3000 céls/µL), o estilo de vida
(ex: fumantes tendem a ter uma contagem de CD4
maior que não fumantes) dentre outros fatores.
A contagem absoluta de
linfócitos T-CD4+ é o
marcador de escolha para
avaliação da integridade do
Sistema Imunológico.
Não existe um valor de linfócitos T-CD4+
“normal” definido para indivíduos saudáveis, mas
em geral se espera que este esteja entre 500 e
1500 céls/ µL.
Em indivíduos infectados pelo HIV, a contagem
absoluta de linfócitos T-CD4+ se mostra como
um marcador de escolha para avaliação da
integridade do Sistema Imunológico.
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• BOLETIM TÉCNICO CD4 Analyser
Profissionais da saúde procuram monitorar a
contagem absoluta de linfócitos T-CD4+ de
pacientes positivos para HIV a fim de acompanhar
o progresso da doença e mensurar quando a
Terapia Anti-retroviral (TARV) deve ser iniciada.
Mudanças na contagem absoluta de CD4 nos
pacientes em uso de TARV é, juntamente com a
quantificação da carga viral, os mais importantes
marcadores da resposta aos medicamentos e da
efetividade do tratamento.
Abordagem inicial
infectado pelo HIV
do
adulto
As recomendações do Departamento Nacional
de DST/AIDS e Hepatites Virais, do Ministério
da Saúde (MS), para auxiliar o clínico no
atendimento inicial de pessoas com diagnóstico
recente de HIV, estão compiladas no Manual de
Recomendações para Terapia Anti–retroviral em
Adultos Infectados pelo HIV, 2008 e nos novos
consensos publicados em 2012.
Segundo as orientações, a abordagem laboratorial
no início do acompanhamento clínico de
pacientes assintomáticos precede e auxilia a
avaliação do beneficio de iniciar a TARV, permitindo
complementar a avaliação da condição geral da
saúde, bem como pesquisar a presença de comorbidades.
A contagem de linfócitos T-CD4+ estabelece o
risco de progressão para AIDS e morte; portanto,
é o indicador laboratorial mais importante em
pacientes assintomáticos, para definir o momento
de iniciar o tratamento. O valor de 500 céls/µL, é
hoje o ponto de corte recomendado para início
da TARV na ausência de co-morbidades.
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Alere CD4 Test
Apresentação geral
O Alere CD4 Test compreende o cartucho Alere
CD4 Cartridge e o Alere CD4 Analyser para
processar as amostras contidas nos cartuchos.
Este Citômetro Point-of-Care requer um pequeno
volume de amostra (aproximadamente 25µL)
para executar a contagem de linfócitos T-CD4+
por imunofluorescência, medido diretamente
de sangue total obtido por punção capilar, bem
como sangue total com EDTA obtido por punção
venosa.
A dosagem de linfócitos
T-CD4+ será axecutada
em apenas 20 minutos
O Alere CD4 Cartridge contém todos os reagentes
secos necessários para a análise e nenhuma
preparação da amostra é previamente requerida.
Todos os componentes necessários para o
desempenho do Alere CD4 Test (incluindo os
controles de qualidade) não requerem refrigeração
e são estáveis à temperatura ambiente, podendo
o exame ser processado no local de tratamento/
atendimento do paciente.
1) Tela
2) Teclado
3) Porta de inserção do cartucho de teste
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4) Botão liga/desliga
5) Entradas USB para backup e instalação da
impressora (acompanha o equipamento)
6) Porta do conector de energia bivolt
Alere CD4 Cartridge
Tampa
Capilar + janela de controle
de volume
BOLETIM
TÉCNICO CD4 Analyser
CARDIOTIPS
Código de barras
Tampa transparente
do canal
Coletor de amostra
(suporte + pré-capilar com EDTA
e lisante
de células vermelhas)
Em conexão com o capilar interno
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Base do cartucho
Etiqueta de identificação
Princípio do teste
Um
pequeno
volume
de
amostra
(aproximadamente 25µL) de sangue total capilar
ou sangue venoso com EDTA é inserido no
cartucho de teste, que depois de tampado é
colocado no Alere CD4 Analyser.
Filtro Vermelho (CD3)
Filtro Verde (CD4)
O reagente do cartucho de teste consiste
de anticorpos monoclonais marcados com
fluorômetros, um contra o CD3 (fluorescência
vermelha) e outro contra o CD4 (fluorescência
verde), que emitem luz em dois comprimentos de
onda distintos.
O Alere CD4 Analyser é equipado com uma câmera
capaz de captar e gerar imagens fluorescentes.
Os linfócitos T-CD4+ transportam os antígenos
de superfície CD3 e CD4, e portanto, emitem
luz em comprimento de onda, específico para
os dois conjugados de anticorpos-fluorômetros
(fluorescência amarela = verde + vermelho).
As células marcadas por fluorescências isoladas
(verde ou vermelho) não serão quantificadas.
Linfócitos T-CD4+
Fluorescência Amarela
As imagens são analisadas com o uso de
algoritmos de propriedade do software e o
resultado é liberado em 20 minutos.
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• BOLETIM TÉCNICO CD4 Analyser
CARDIOTIPS
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Informações
Tempo de Reação: Apenas 20 minutos.
Apresentação dos testes: 25 e 100
testes embalados individualmente prontos para
uso.
Tipo de amostra: Sangue total obtido por
punção capilar ou sangue total com EDTA obtido
por punção venosa.
Estabilidade da Amostra:
1) Obtida por punção capilar: deverá ser inserida
no equipamento para análise imediatamente
após o fechamento do cartucho de teste, não
podendo ultrapassar 5 minutos após a coleta.
2) Obtida por punção venosa: conservar a amostra
de sangue total com EDTA em temperatura
ambiente (18 a 28°C). A amostra deve ser
analisada em um período máximo de 36 horas
após a coleta e idealmente logo após a coleta.
Após inserir a amostra no cartucho de teste a
inserção no equipamento não pode ultrapassar
5 minutos.
Estabilidade do cartucho de reação:
Estável de 2 a 30°C dentro do período de validade
exposto na embalagem externa de alumínio.
Linearidade: 3 - 2168 céls/ µL.
2) Controles de qualidade de cada cartucho:
dentro de cada cartucho de teste existem 5
controles de qualidades que são analisados a
cada corrida de amostra. Em todas as análises
deve aparecer na impressão do resultado o status
PASS. Se algo aparecer como FAIL o resultado
não será liberado e o código de erro deve ser
analisado. São eles:
I. Barcode: lido pelo equipamento no código
de barras do cartucho para obtenção das
informações de lote e fator de correção de
volume. Pode ser inserido manualmente em
caso de falha na leitura.
II. Expirate Date: informação contida no
Barcode. Caso o cartucho esteja expirado o
equipamento recusará o mesmo.
III. Volume: o equipamento irá visualizar a Janela
de Controle de Volume do cartucho e caso o
mesmo não esteja corretamente preenchido
(aproximadamente 25µL) ou esteja com bolhas,
o equipamento recusará o cartucho e por
segurança, o exame não será realizado.
IV. Device: dentro de cada cartucho de teste está
impregnado esferas (beads) com fluorescência
padronizada para análise da câmera. Caso
a câmera não consiga quantificar os beads
impregnados, o equipamento, por segurança,
recusará cartucho.
Controle de qualidade: O equipamento
Alere CD4 Analyser possui dois tipos diferentes
de controle de qualidade:
1) Alere CD4
QC Beads: dispositivo que
acompanha o equipamento e possui 2 níveis,
normal e baixo. Deve ser avaliado diariamente e os
dados podem posteriormente serem analisados
por um programa de controle de qualidade.
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BOLETIM TÉCNICO CD4 Analyser
V. Reagent: em cada cartucho de teste existe
uma quantidade fixa de células T helper
liofilizadas que serão marcadas pelo excesso de
anticorpo monoclonal localizado no cartucho.
A câmera do equipamento deverá ser capaz de
quantificar a quantidade exata destas células T
helper. Caso isso não aconteça o equipamento,
por segurança, irá recusar o cartucho.
Vantagens da quantificação do CD4 em Point of Care
• Quantificar o CD4 do paciente logo após o
diagnóstico positivo de HIV, no local de atenção
primária à saúde.
• CD4 imediato em ambulatórios de atendimento
e acompanhamento de pacientes portadores e
laboratórios de análises clínicas.
• Evitar que o paciente tenha que retornar ao
centro de saúde para coleta de amostra para CD4
e posteriormente para a consulta com o médico.
• CD4 imediato no dia da consulta médica.
• Com o rápido valor de CD4 o paciente pode
ser iniciado mais precocemente no uso da TARV,
seguindo as novas recomendações do DST/AIDS
e Hepatites Virais, melhorando a relação custo/
benefício e a qualidade de vida do paciente
vivendo com HIV.
• Por ser portátil e funcionar à bateria pode ser
deslocado até o paciente com dificuldade de
acesso a um centro de saúde e em programas de
saúde com foco em populações mais vulneráveis.
• Pode ser utilizado em locais de difícil acesso e/
ou com infraestrutura laboratorial deficiente ou
precária.
• Laboratório Virtual : por possuir um Software
de Conectividade, o CD4 Wellness Solution, é
possível acessar remotamente e em tempo real
tudo que é processado no Alere CD4 - Pima sem
perder o controle de qualidade e gerenciamento
da máquina.
Referência Bibliográfica: Manuais de Alere CD4 Analyser, Alere CD4 Cartridge, Alere CD4 QC Beads. / Manual de Recomendações para Terapia Anti–retroviral
em Adultos Infectados pelo HIV, 2008. Novos consensos de início datarv (DST/Aids) 2012.
BOLETIMTÉCNICO
CD4 Analyser • Novembro de 2012
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Textos:
Tatiana Rocha
Infectious Disease SBU
[email protected]
BOLETIM TÉCNICO CD4 Analyser
Editoração:
Amanda Franco e Cristiano Quintão
Comunicação & Mkt.
[email protected]
[email protected]
R. dos Pinheiros, 498
7º andar - Pinheiros - SP
Tel: 11 2131-5100
alerebrasil.com.br
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