Everton dos Santos
E6446 - componente orgânico aromático
Conhecido antagonista TLR (3, 7,8,9)
Indivíduos Assimtomáticos
2008
Fontes de
Infecção
Indivíduos Assimtomáticos
2002
Fontes de
Infecção
Populações Ribeirinhas
Áreas:
Portuchuelo (Rio Madeira)
6 comunidades (Rio Machado ou Ji-Paraná)
Região endêmica
Existe uma maior prevalência de indivíduos assintomáticos nas regiões endemicas
Indivíduos Assimtomáticos
2011
According to Brazilian legislation no test is mandatory for blood donors from
non-endemic areas. However if they have traveled to malaria transmission
regions they are deferred for six months before they can donate
Doador : Juquia / RO
Suscetibilidade Genética
Índia
2011
Sistema ABO
O grupo O deve proteger o indivíduo de desenvolver malária grave
Pressão Gênica Seletiva
Alta mortalidade associada a Malária
Seleção natural
Hemoglobina
Malária
AA
normal
Podem apresentar
qualquer tipo de
malária
AS
Traço Falciforme
não apresentam
malária grave
SS
Anemia Falciforme
Não apresentam
malária
Pressão Gênica Seletiva protege
contra a malária grave
Pressão Gênica Seletiva
Eduardo Crosara Roncolato
Artrite
Lupus
Alelo FcγRII - perda função
+++++
++
Mulheres portadores deste alelo
desenvolvem 6-8 X mais Lupus
quando estão fora de areas
endemicas
X
Controle da
produção de
anticorpos
2 X mais TLR7
FcγRIIB -/-. yaa
Aumenta a produção de
anticorpos anti-nuclear
Eduardo Crosara Roncolato
Apresentam doença similar ao LUPUS
-Altos níveis de Acs anti-nucleares
- Glomerulonefrite
Composto sintético (E6446) pode inibir a ativação do receptor Toll-like e
também prevenir malaria cerebral?
O composto E6446 pode modular receptores Toll-like?
TLR
24h
NF-kB
NF-kB
HEK293T
Atividade da luciferase (luminometro)
LPS, R848 ou CpG ODN
E6446
Zangani et al, 2009
NF-kB ativado = emissão de luz
 LPS – TLR4
 R848 – TLR7
 CpG ODN – TLR9
O composto E6446 inibe a atividade dos receptores TLR, e em baixas concentrações existe a
inibição específica do TLR9 nas células tHEK293.
E6446 - via oral
(60mg/kg)
O composto E6446 pode inibir TLR-9 in vivo?
CpG ODN
60, 180, 360µg
90 minutos
2 horas
Quantificação de IL-6 do soro (ELISA)
Células do baço
72 horas
CpG ODN/R848
Quantificação de IL-6 do sobrenadante (ELISA)
E6446
E6446 em baixa concentração pode inibir especificamente TLR9 in vivo.
Qual o efeito in vivo do composto E6446 na presença de diferentes agonistas de
TLR?
Ligantes de TLR
E6446 - via oral (20mg/Kg)
1
2
3
4
5
2 horas
Baço extraído
Células do baço
48h
Quantificação citocinas do
sobrenadante (ELISA)
O E6446 inibe a produção de citocinas,
especificamente via TLR9.
Qual o efeito do E6446 na hiperresponsividade de TLR em animais que
desenvolvem malaria?
E6446 (60mg/Kg) - via
oral
1
2
3
4
5
6
Baço extraído
7
Cultura (48h) das
células do baço
Coleta de sangue
+
Medium
LPS – TLR4
Pam2Cys – TLR2
Poly:IC – TLR3
CL075 – TLR7
Cpg ODN – TLR9
P.c extract
ELISA
do sobrenadante
ELISA do soro
iRBC (P. chabaudi)
Soro
TLR4
Baço
TLR2
TLR3
TLR7
O composto E6446 diminuiu a responsividade de TLR (2, 7 e 9) durante a malaria aguda.
O E6446 protege animais infectados com malaria de choque séptico?
E6446 (120mg/Kg) via oral
1
2
3
4
5
6
LPS (10µg) – i.v
7
Monitoramento da sobrevivência
(12-48 horas)
iRBC (P. chabaudi)
E6446 mostrou efeito protetor nos camundongos submetidos a choque séptico.