Análise da regulação da expressão
dos genes nifR3ntrBCYX de
Rhizobium sp. NGR234.
Caroline de Moraes de Siqueira
Bolsa Permanência
A.C. Bonatto / R.Wassem / D. Messias
Introdução/Objetivos
Rhizobium sp. NGR234 é
uma α-proteobacteria capaz
de estabelecer simbiose com
leguminosas, fixando N2
através de nódulos nas
raízes. O sistema NTR é
responsável por controlar o
metabolismo de nitrogênio e
induzir a fixação do mesmo.
Este sistema contém dois
pares
de
proteínas
regulatórias da família de
dois componentes, NtrBNtrC e NtrY-NtrX. Estes
genes estão presentes em
uma única região gênica,
sugerindo que formam dois
operons, nifR3ntrBC e ntrYX.
O objetivo deste trabalho é
caracterizar
a
região
promotora dos dois operons
e analisar sua expressão em
diferentes
fontes
de
nitrogênio e concentrações
de oxigênio.
Método
As
regiões
promotoras
foram
amplificadas
e
clonadas no vetor pPROBEGT, a montante do gene gfp.
Os plasmídeos
foram,
transferidos para a estirpe
selvagem e sua expressão
foi testada.
Resultados/Discussão
Os resultados mostram
que os dois promotores
apresentam algum tipo de
regulação em relação a
disponibilidade
de
nitrogênio. O promotor a
montante
de
nifR3,
denominado pBC, tem
sua
expressão
aumentada na presença
de NaNO3, parecendo ser
esta a condição que
melhor induz a expressão
desse
operon.
O
promotor a montante de
ntrY, pYX, tem sua
expressão aumentada na
presença de glutamato de
sódio.
A presença de
oxigênio
aumenta
a
expressão de ambos os
promotores.
Conclusões
Os
promotores
são
regulados pela fonte de
nitrogênio.
pBC
por
NaNO3 e pYX por
glutamato
de
sódio.
Também são regulados
pelo oxigênio. pBC e pYX
exibem níveis elevados
de
expressão
na
presença de O2, mas
pYX é menos evidente.