UPCII M Microbiologia
Teórica 6-7
2º Ano
2012/2013
Sumário
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Capítulo V. Diagnóstico Microbiológico
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Produtos biológicos para análise
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Colheita e transporte de amostras
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Identificação do agente infeccioso:
2
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Métodos Fenotípicos
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Métodos Genotípicos
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Métodos Imunológicos
T6-7 MJC
10-11-2012
Diagnóstico Microbiológico
Paciente
Pedido de Exame
Diagnóstico e Terapia
Colheita
Interpretação
Transporte
Resultado
Laboratório
3
T6-7 MJC
10-11-2012
Colheitas a partir de:
Excreções
Secreções
Tecidos
Órgãos
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4
T6-7 MJC
10-11-2012
Colheita e Transporte das amostras
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Anaeróbios / Fastidiosos / Vírus
Psicrófilos / Mesófilos
Colheitas de locais com MI
Contaminação do ambiente (Espectoração e saliva)
Meio de recolha  Eficácia
Meio de transporte
Antibioterapia precedente
Tempo da colheita /Rota de infecção e ciclo de infecção
Tempo de espera para processamento
10-11-2012
T6-7 MJC
Métodos de diagnóstico
Fenotípicos
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Morfológicos
Fisiológicos/Bioquímicos
Químicos
Genotípicos
Imunológicos

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Baseados em cultura
Podem ser
independentes de
cultura
Resultados preliminares e definitivos
6
T6-7 MJC
10-11-2012
Métodos fenotípicos - Observação directa - MO
Ovos de helmintas
Espiroquetas
Cryptococcus neoformans
Preparação Tzanck (infecção por vírus
herpes simplex ou varicella-zoster)
10-11-2012
T6-7 MJC
Métodos fenotípicos - Observação directa
- Colorações
A= Não acid fast
Fluido CerebroEspinal
Bacillus antracis
8
B=Acid Fast
T6-7 MJC
10-11-2012
Métodos fenotípicos - Observação directa - ME
9
T6-7 MJC
10-11-2012
Métodos fenotípicos - Observação directa Imunocitoquímica
10
T6-7 MJC
10-11-2012
Métodos fenotípicos - Bioquímicos
• Fermentação de vários hc
• Hidrólise de gelatina, amido e outros
• Catalase, oxidase, coagulase
• metabolitos
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10-11-2012
Métodos fenotípicos - Outros
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

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Serotipagem
Biotipagem
Tipagem de fagos
Tipagem de bacteriocinas
12
T6-7 MJC
Cultura
Meios de Cultura: Função?
Meios de transporte: Função?
Incubação: (Temperatura e oxigénio)
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T6-7 MJC
10-11-2012
Cultura
Reacções com o meio de cultura
Streptococcus beta hemolítico
14
T6-7 MJC
10-11-2012
Cultura-tipagem fenotípica e bioquímica

Após cultura segue-se identificação:
15
T6-7 MJC
10-11-2012
Cultura-tipagem fenotípica e bioquímica

Após cultura segue-se identificação:
16
T6-7 MJC
10-11-2012
Cultura – Permite antibiograma
17
T6-7 MJC
10-11-2012
Métodos genotípicos – sondas moleculares
18
T6-7 MJC
Métodos genotípicos

19
PCR – gene 16sRNA
T6-7 MJC
10-11-2012
Métodos genotípicos
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PCR
Visualização
Utilização noutras técnicas
20
T6-7 MJC
10-11-2012
Métodos genotípicos
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Detecção de ácidos nucleicos
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


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RT-PCR (Real Time)
RT-PCR (Reverse Transcription)
Multiplex PCR
Nested PCR
T6-7 MJC
10-11-2012
Métodos Imunológicos
10-11-2012
T6-7 MJC
Métodos Imunológicos
10-11-2012
T6-7 MJC
Métodos Imunológicos - Aglutinação
24
T6-7 MJC
Métodos Imunológicos - Precipitação
25
T6-7 MJC
Métodos Imunológicos – Western Blotting
26
T6-7 MJC
Métodos Imunológicos
27
T6-7 MJC
Métodos Imunológicos – Teste do Complemento
28
T6-7 MJC
Métodos Imunológicos – Anticorpos flourescentes

Diretos
29
T6-7 MJC
Métodos Imunológicos – Anticorpos flourescentes

Indiretos
30
T6-7 MJC
Métodos Imunológicos - Elisa
31
T6-7 MJC
Métodos Imunológicos - Elisa
32
T6-7 MJC
Métodos Imunológicos – Elisa sandwich
33
T6-7 MJC
Sensibilidade e Especificidade
Presença do
Microrganismo
Ausência do
Microrganismo
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+
-
Verdadeiro
(V+)
Falso
(F-)
Verdadeiro
(V-)
Falso
(F+)
T6-7 MJC
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T6-7 MJC
Bibliografia
Capítulo 6
Capítulo 17
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10-11-2012