PROTEÍNAS
01. Para que direção, isto é para o anodo (A), para o catodo (C) ou permenência na
origem (O), migrarão num campo elétrico as seguintes proteínas, nos pHs indicados?
O ponto isoelétrico de uma proteína é aquele no qual a mesma se encontra
neutra. Abaixo dele a mesma se encontra com carga residual positiva e acima
com carga negativa.
a) Albumina do ovo (pI = 4,6) em pH 5,0 (pH > pI) proteína com carga negativa
migraria para o pólo positivo.
b) β-Lactoglobulina (pI = 5,2) nos pHs 5,0 e 7,0 migraria para o pólo negativo
(pH 5,0) e para o pólo positivo (pH 7,0).
c) Quimiotripsinogênio (pI = 9,5) nos pHs 5,0 pólo negativo 9,5 permanência
na origem e 11,0 pólo positivo
02. Em que pH será a eletroforese mais eficiente na separação das seguintes misturas de
proteínas?
O pH que realizará a melhor separação será um pH intermediário, onde a
proteína de menor pI esteja carregada negativamente e migre para o pólo positivo e
a de maior pI esteja carregada positivamente e migre para o pólo negativo ptt:
a) Albumina sérica e hemoglobina; pIs = 4,9 e 6,8, respectivamente
Em um pH intermediário (por exemplo a média entre os pIs= 5,9
b) Mioglobina e quimiotripsinogênio; pIs = 7,0 e 9,5, respectivamente
Mesmo raciocínio = pH 8,3
c) Albumina do ovo, albumina sérica e urease, pIs = 4,6,
4,9 e 5,0,
respectivamente
Nesse caso como os pIs são bem próximos o ideal é fazer a eletroforese no pH
correspondente ao pI intermediário, para que a albumina sérica fique no
ponto de origem e a proteína de menor pI esteja carregada negativamente
migrando para o pólo positivo (albumina) e a de maior pI esteja carregada
positivamente e migre para o pólo negativo (urease).
03. Abaixo está representada a mobilidade eletroforética em pH 8,6 da hemoglobina
normal e de uma série de hemoglobinas anormais (que possuem um aminoácido
substituído):
(-)______________________________________________________(+)
A HbN
B HbJ
Normal
C hBS
D hBC
Indique a que posição A, B, C ou D corresponde cada hemoglobina anormal:
HbS - Val em lugar de Glu, Aa não polar substitui um polar negativo
HbJ - Asp em lugar de Gly, Aa polar negativo substitui um não polar
HbN - Glu em lugar de Lys Aa polar negativo substitui um polar positivo
HbC - Lys em lugar de ácido Glu. Aa polar positivo substitui um polar negativo
pH abaixo do PI
pI
pH acima do PI
COOH
NH3+
COONH3+
COONH2
CARÁTER
NEUTRO
CARÁTER
POSITIVO
NEGATIVO
04. Indique se as seguintes afirmações são falsas ou verdadeiras. Justifique as que forem
falsas:
a) Pontes de hidrogênio ocorrem entre átomos de Hidrogênio na superfície das moléculas
de proteína em solução. Falso- As pontes de hidrogênio na superfície ocorrem
entre grupos polares e moléculas de água.
b) A conformação termodinamicamente mais estável de uma proteína corresponde a
estrutura de energia livre mais baixa.Verdadeiro.
c) A formação de pontes de hidrogênio internas corresponde à principal interação que
direciona o dobramento da molécula de proteína. False–As interações hidrofóbicas
são a principal interação que direciona o dobramento da molécula de proteína.
d) Solventes orgânicos desnaturam proteínas, principalmente por dificultar interações
iônicas. Falso- Solventes orgânicos desnaturam proteínas abaixando a energia
livre dos resíduos hidrofóbicos expostos ao solvente estabilizando, desta forma, o
estado desenovelado.
e) O dobramento de uma molécula de proteína hidrofóbica é acompanhado por um
aumento na entropia do polipeptídeo. Falso- A entropia do polipeptídeo diminui
com o enovelamento fica com uma conformação mais organizada. Entretanto a
entropia do meio (solvente) aumenta.
f) O termo estrutura quaternária refere-se a conformação da proteína em quarta
dimensão, isto é, como uma função do tempo. Falso- A estrutura quaternária diz
respeito à interação de duas ou mais cadeias de polipeptídeos.
g) Pontes dissulfeto ligam covalentemente resíduos de cisteína cujas proximidades são
determinadas por interações prévias não covalentes.Verdadeiro.
h) Numa alfa-hélice, os Hidrogênios amídicos de todas as ligações peptídicas estão
formando pontes de Hidrogênio. Verdadeiro.
i) A partir da estrutura primária completa de uma proteína, é possível predizer sua
conformação tridimensional. Falso- É possível prever através de programas de
bioinformática como essa estrutura se dobraria e até encontrar sequências
consenso de interação com grupos prostéticos e outras proteínas, mas a estrutura
final de uma proteína só pode ser elucidada por completo através da
cristalografia ou RMN.
05. a) As conformações das proteínas correspondentes ao mínimo de energia livre muitas
vezes são favorecidas por ligações cruzadas covalentes entre resíduos de cisteína.
b) As interações hidrofóbicas levam a um(a) diminuição de energia livre quando as
cadeias laterais dos resíduos de aminoácidos não polares são removidos da fase
aquosa.
c) O posicionamento de cadeias laterais hidrofóbicas no interior de uma proteína
aumenta a entropia do ambiente aquoso.
d) Solventes orgânicos estabilizam (diminuem a energia livre) de grupos apolares em
meio aquoso.
e) Na α-hélice, as pontes de hidrogênio entre os grupos C=O e N-H são bastante estáveis
porque os três átomos envolvidos são coplanares (arranjados linearmente).