José Ronaldo Matos Carneiro
“Análise semiquantitativa da expressão do RNA
mensageiro dascitocinas IL-2, IL-5, TNF-alfa e INF-y em
epiderme de pacientes com lúpus eritematoso sistêmico
em atividade.”
Resumo:
Objetivos: Analisar semiquantitativamente a expressão dos genes das interleucinas (IL) IL-2, IL-5,
TNF-a e IFN-y em amostras de epiderme de lesões cutâneas agudas e discóides e de pele
aparentemente não comprometida de pacientes com Lúpus Eritematoso Sisêmico (LES) em
atividade. Pacientes e métodos: Foram estudados doze controles normais e vinte e um pacientes com
LES (segundo critérios do Colégio Americano de Reumatologia) em atividade, sendo onze com lesão
cutânea aguda e dez com lesão discóide. A media de idade dos pacientes com LES com lesão aguda
(32,18 ± 9,17 anos) não diferiu em relação aos controles normais (36,8 ± 7,97 anos), mas foi
significativamente menor que a dos pacientes com lesão discóide (44,20 ± 4,24 anos). Os pacientes
com LES foram submetidos a duas biópsias de pele tipo "punch", uma em local com lesão (face) e
outra em local aparentemente sem lesão (antebraço). 0 substrato dos controles sadios foi proveniente
de sobras de pele oriunda da região facial após reparos cirúrgicos. A análise da expressão gênica das
interleucinas IL-2, IL-5, TNF-α e IFN-γ foi realizada através do método da RT-PCR semiquantitativa
em tempo real. Após as reações, foi feito 0 cálculo do nível de expressão gênica de cada citocina
utilizando-se 0 método da quantificação relativa. Resultados: Entre as 42 amostras com LES
estudadas, 19 (45,2%) apresentaram indução (valor de R>1) de pelo menos uma citocina. Destas, 10
espécimes de epiderme pertenciam a pacientes com LES com lesão aguda e 9 amostras eram
procedentes de doentes com lesão discóide Três amostras apresentaram indução concomitante de
duas interleunas. A IL-5 e 0 IFN-y foram as citocinas que estiveram induzidas em maior numero de
amostras, sendo observadas' oito vezes cada uma, enquanto a IL-2 e 0 TNF-α estiveram induzidas em
apenas duas e três amostras respectivamente. Das oito amostras induzidas para a IFN-y, sete eram
oriundas de pele lesada e uma de pele aparentemente sã, tendo sido esta diferença marginalmente
significante (p=0,07). Pelo menos uma citocina esteve induzida em treze das vinte e uma amostras de
pele lesada e em cinco das vinte e uma amostras de pele aparentemente sa. A dose media de
prednisona entre os pacientes com amostras de IFN-y reprimido (17mg/dia) foi maior que aquela das
amostras (12,5mg/dia) induzidas. Tal diferença não foi identificada para as demais citocinas
estudadas. Não foi observado relação entre a escore do SLEDAI e 0 comportamento da expressão
gênica nas citocinas pesquisadas. Conclusões: 0 perfil de expressão gênica de queratinócitos da
epiderme de pacientes com LES foi consideravelmente heterogêneo e com grande amplitude na
expressão relativa de todas as citocinas tanto em pele envolvida como aparentemente sã. Um maior
número de amostras de pele lesada mostrou indução de genes de citocinas em relação às amostras de
pele aparentemente sã. A expressiva heterogeneidade no perfil de expressão gênica e compatível com
a complexidade dos componentes participantes da fisiopatologia do envolvimento da pele nesta
doença e com a possível influência da terapêutica. O papel de cada um desses fatores deverá ser
elucidado por estudos futuros..