ESTUDO DA RELAÇÃO DE SCOLYTIDAE COM
Ceratocystis cacaofunesta
Ana Carolina Firmino 1, Dilze Maria Argôlo Magalhães2, Stela Dalva Vieira Midlej Silva3, Carlos Frederico
Wilcken4, Francisco André Ossamu Tanaka5, Edson L. Furtado6.
1
Pós Doutora - Departamento de Produção Vegetal/Defesa Fitossanitária, UNESP/FCA, CEP 18610-307, Botucatu, SP, Brasil. E-mail: [email protected].
2 Professora , 3 Fiscal Federal Agropecuário - Ceplac/Cepec/Seção de Fitopatologia, Cx. Postal 07, CEP 45600-970, Itabuna, BA.
4, 6 Professor - UNESP/FCA/Departamento de Produção Vegetal/Defesa Fitossanitária, CEP 18610-307, Botucatu, SP,.
5 Professor - UNESP/FCA/Departamento de Entomologia e Nematologia, Universidade de São Paulo/ESALQ, Piracicaba, SP.
INTRODUÇÃO
Espécies do gênero Ceratocystis podem causar a seca e morte em diversas culturas de importância econômica. No Brasil, o fungo Ceratocystis cacaofunesta causa a doença murcha-deceratocystis no cacaueiro. Esse fungo exala substâncias voláteis com odor de fruta madura que são importantes na epidemiologia da doença, pois atraem o inseto vetor. Por isso o presente trabalho
objetivou identificar espécies de Scolytidae em cacaueiros com sintomas da doença e detectar a presença do fungo nesses insetos.
MATERIAL e MÉTODOS
RESULTADOS E DISCUSSÃO
 Os Scolytidae foram coletados em troncos de cacaueiro infectado com C. cacaofunesta em
Ilhéus, Bahia, Brasil. Estes insetos foram identificados e divididos em amostras que foram
destinadas para isolamento do fungo em isca de cenoura, análise em Microscópio Eletrônico
de Varredura (MEV) e realização de cortes finos para visualizarão do fungo no interior do
inseto.
 Para análise em MEV os insetos foram pré-fixados em solução de “Karnovsky”. Em
seguida, foram fixados com vapor de OsO4 a 2% durante 12 horas e desidratados por 2 horas
em sílica gel. As amostras foram cobertas com ouro e visualizadas em MEV (Esquema 1).
 Para a realização dos cortes finos os insetos foram pré-fixados em solução de “Karnovsky”,
desidratado em série alcoólica, embebido e incluído em historesina. Os cortes histológicos
com 6-8µm de espessura foram recolhidos em lâminas e corados com azul de toluidina
(Esquema 2).
 Nos troncos de cacaueiro analisados foram encontrados somente o inseto: Xyleborus
affinis. O fato de ter encontrado somente esta espécie de inseto relacionado com material
infectado com Ceratocystis pode indicar que haja uma interação deste fungo somente
com alguns insetos, provando a teoria de que nem todos os besouros de casca são
obrigatoriamente dependentes do fungo.
Nas análises realizadas em MEV foi observado aleuroconídeos C. cacaofunesta
aderidos somente na parte inferior do abdômen e nas patas do inseto (Figura 1),
indicando que esta pode ser também uma das formas de disseminação do fungo no
campo.
 No interior do inseto não foram observados esporos típicos de Ceratocystis, porém foi
notada a presença de possíveis esporos de Lasiodiplodia.
As tentativas de isolar Ceratocystis em iscas de cenoura a partir dos insetos coletados
não tiveram êxitos.
ESQUEMA 1
Figura 2: Insetos pré- fixados
em solução de “Karnovsky
Figura 1: A. Galeria realizada pelo inseto. B. Inseto coletado nos troncos
infectados com C. cacaofunesta.
Figura 3: Metodologia empregada para fixação
dos insetos em vapor de OsO4.. Para isso uma
gota do reagente é colocada em um um pequeno
compartimento (a direita) dentro de uma placa de
Petri com as amostras (a esquerda).
Figura 1: Adultos de X. affinis coletado em troncos de cacau infectados com Ceratocystis .
Figura 7: Análise das amostras ao
microscópio eletrônico de varredura
LEO435-VP.
Figura 6: Amostras
metalizadas com ouro.
Figura 5: Metalização das
amostras com ouro.
Figura 4: Secagem das amostras
em dessecador com sílica gel.
Figura 2: Esporos de Lasidiodiplodia na região do mesentério de Xyleborus affinis
ESQUEMA 2
CONCLUSÕES
Desidratação
30%, 50%, 70%, 90%,100%
Série crescente de Etanol
Figura 1: Inseto coletado nos troncos infectados
com C. cacaofunesta.
Figura 2: Insetos pré- fixados
em solução de “Karnovsky
Figura 4: Amostra
infiltrada e incluída em
historesina
Figura 8: Análise das amostras
microscópio eletrônico de Luz.
ao
Figura 6: Corte das
amostras em micrótomo
Figura 5: Secagem das amostras
em dessecador com sílica gel.
 O inseto Xyleborus affinis predominou nas amostras de tronco de cacaueiros
infectados pela doença murcha-de-ceratocystis
 Somente aleuroconídios de Ceratocystis cacaofunesta foram encontrados aderidos
aos corpos desses Scolytidae.
 Nenhum esporo característico de Ceratocystis cacaofunesta foi visualisado no interior
do inseto.
Apoio e Agradecimento
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Estudo da relação de Scolytidae com Ceratocystis