UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCO
DEPARTAMENTO DE MEDICINA VETERINÁRIA
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIA VETERINÁRIA
PERDA DO CONCEPTO DE ÉGUAS DA RAÇA MANGALARGA
MARCHADOR EM DIFERENTES STATUS REPRODUTIVOS APÓS A
INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL E TRANSFERÊNCIA DE EMBRIÕES
Marcelo Cavalcanti Rabelo
TESE DE DOUTORADO
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIA VETERINÁRIA
Recife-PE
2009
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ii
UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCO
Marcelo Cavalcanti Rabelo
PERDA DO CONCEPTO DE ÉGUAS DA RAÇA MANGALARGA
MARCHADOR EM DIFERENTES STATUS REPRODUTIVOS APÓS A
INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL E TRANSFERÊNCIA DE EMBRIÕES
TESE DE DOUTORADO
Tese apresentada ao Programa de PósGraduação em Ciência Veterinária da
Universidade Federal Rural de
Pernambuco, como requisito parcial
para obtenção do grau de DOUTOR
em Ciência Veterinária.
UFRPE
Recife-PE, Brasil
2009
Ficha catalográfica
R114p
Rabelo, Marcelo Cavalcanti
Perda do concepto de éguas da raça mangalarga
marchador em diferentes status reprodutivos após a
inseminação artificial e transferência de embriões /
Marcelo Cavalcanti Rabelo. -- 2009.
60 f. : il.
Orientador:Marcos Antônio Lemos de Oliveira.
Tese (Doutorado em Ciência Veterinária) –
Universidade Federal Rural de Pernambuco. Departamento
de Medicina Veterinária, Recife, 2009.
Referências.
CDD 636.08926
Eqüinos
Período gestacional
Status reprodutivos
Faixa etária
Transferência de embriões
Gestação
Marcos Antônio Lemos de Oliveira,
orientador
II. Título
1.
2.
3.
4.
5.
6.
I.
iii
UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCO
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIA VETERINÁRIA
PERDA DO CONCEPTO DE ÉGUAS DA RAÇA MANGALARGA
MARCHADOR EM DIFERENTES STATUS REPRODUTIVOS APÓS A
INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL E TRANSFERÊNCIA DE EMBRIÕES
Tese de Doutorado elaborada por
MARCELO CAVALCANTI RABELO
Aprovada pela
COMISSÃO EXAMINADORA:
Marcos Antonio Lemos de Oliveira
- Professor Orientador -
Jairo Pereira Neves
- Examinador -
Maico Henrique Barbosa dos Santos
- Examinador –
Paulo Fernandes de Lima
- Examinador -
Karen Mascaro Gonçalves da Silva
- Examinadora -
Adriana Wanderley Taveiros
- Examinadora -
Recife – 2009
iv
“Embora ninguém possa voltar atrás e fazer um novo começo,
Qualquer um pode começar agora e fazer um novo fim.”
(Francisco Cândido Xavier)
“O Senhor é meu pastor, nada me faltará.
Ainda que eu atravesse o vale escuro,
nada temerei, pois estais comigo.”
(Salmo 22/23)
v
AGRADECIMENTOS
Primeiramente a Deus, por tudo que tem proporcionado em minha vida, seja material e
espiritual, estando ao meu lado em todas as situações, iluminando o meu caminho.
Aos meus pais, Albérico Rabelo e Maria Cavalcanti (in memorian) pela oportunidade
de obter uma formação profissional e pelo amor com que me educaram.
À minha esposa Lúcia e as minhas filhas Marcelle, Maríllia e Marluce pelo amor e
carinho imprescindíveis que me dedicam, pela compreensão, apoio e motivação para que eu
alcance sempre o melhor.
Ao professor Marcos Antônio Lemos de Oliveira, pela orientação, respeito, paciência
e confiança depositada.
Ao professor Paulo Fernandes de Lima, pelos conselhos, orientações e exemplo de
pessoa e profissional.
À Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE) pela oportunidade de
participação e conclusão deste curso.
À coordenação da Pós-Graduação em Ciência Veterinária e a todos os professores e
funcionários que a compõe pela atenção, paciência e contribuição ao longo deste estudo.
Ao grupo da Pós-Graduação, Ricardo Chaves, Cristiano Rocha, José Monteiro,
Edivaldo Rosas, Leopoldo Mayer e Filipe Bezerra, pelo apoio incondicional, companheirismo
e amizade, sem eles nada seria concretizado.
À Adriana Taveiros e Paula Melo, pela organização dos dados, aprendizado, incentivo
e experiências compartilhadas que resultou neste trabalho.
À Adriana Trindade, Érica, Maico e Melânia, agradeço a amizade, o apoio e incentivo.
vi
Aos amigos da Secretaria de Agricultura e Reforma Agrária (SARA), Ângelo Rafael,
Gutemberg Maciel, Francisco Torres e Francisco Oliveira, pela amizade, companheirismos,
profissionalismo, compreensão e apoio que contribuíram para conclusão deste curso.
Aos funcionários da UFRPE, Dona Sônia, Alcir, Joana, Guiomar e Ana Katarina
(Biblioteca) pela ajuda, paciência e ao apoio durante todo o Doutorado.
Aos meus amigos e a todos que de alguma forma colaboraram.
Aos animais, que ajudaram de forma inconsciente e significativa para a realização
deste estudo.
vii
SUMÁRIO
Páginas
AGRADECIMENTOS................................................................................................
v
SUMÁRIO..................................................................................................................
vii
LISTA DE TABELAS...............................................................................................
viii
RESUMO...................................................................................................................
ix
ABSTRACT...............................................................................................................
xi
1
INTRODUÇÃO................................................................................................
13
2
REVISÃO DE LITERATURA..........................................................................
14
2.1
Aspectos da fisiologia reprodutiva da égua.......................................................
14
2.2
Generalidades sobre inseminação artificial em equinos....................................
15
2.3
Considerações sobre transferência de embriões em equinos.............................
18
2.4
Uso da ultra-sonografia na reprodução equina..................................................
22
2.5
Aspectos relacionados à perda do concepto.......................................................
24
3
REFERÊNCIAS.................................................................................................
26
4
CAPÍTULO I......................................................................................................
33
5
CAPÍTULO II....................................................................................................
46
viii
LISTA DE TABELAS
CAPÍTULO I
Páginas
Tabela 1
Perda do concepto em éguas da raça Mangalarga Machador em função
da faixa etária no período de 15 a 45 dias de gestação.
38
Tabela 2
Perda do concepto em éguas da raça Mangalarga Machador conforme o
status reprodutivo no período de 15 a 45 dias de gestação.
39
Tabela 3
Perda do concepto em éguas da raça Mangalarga Machador de acordo
com os diferentes períodos de gestação.
39
Tabela 4
Índices de perda do concepto em éguas da raça Mangalarga Machador
de acordo com a classificação do cio.
40
CAPÍTULO II
Tabela 1
Taxas de prenhez diagnosticada no sétimo dia após a TE e de perda
embrionária até o 30o dia de gestação em receptoras Mangalarga
Marchador, de acordo com o status reprodutivo.
54
Tabela 2
Taxas de prenhez diagnosticada no sétimo dia após a TE e de perdas
embrionárias até o 30o dia de gestação em receptoras Mangalarga
Marchador função da faixa etária.
56
Tabela 3
Perdas embrionárias em receptoras da raça Mangalarga Marchador em
diferentes períodos de gestação.
57
ix
Título: Perda do concepto de éguas da raça Mangalarga Marchador em diferentes status
reprodutivos após a inseminação artificial e transferência de embriões
Autor: Marcelo Cavalcanti Rabelo
Orientador: Marcos Antonio Lemos de Oliveira
Resumo
Foram realizados dois estudos para avaliar em éguas da raça Mangalarga Marchador, os
fatores que influenciam a perda do concepto após a inseminação artificial (IA), considerando
a faixa etária, o status reprodutivo e o período de gestação, bem como, as taxas de prenhez e
perda embrionária de éguas em diferentes status reprodutivos utilizadas como receptoras em
programas de transferência de embriões (TE). No primeiro estudo, foram monitoradas 320
gestações entre os anos de 2003 e 2006 compreendendo fêmeas nulíparas (n = 52), pluríparas
não lactantes (n = 112) e pluríparas lactantes (n = 156). Os animais possuíam idade entre 4 e
16 anos. O diagnóstico de gestação por ultra-sonografia foi realizado no 15o dia pós-ovulação,
repetindo os exames no 20o, 30o e 45o dia de prenhez. O índice total de perda do concepto foi
de 9,06% (29/320). Com relação à faixa etária, as perdas de 8,06% (5/62), 6,58% (10/152) e
13,21% (14/106) para fêmeas com menos de 5 anos, de 5 a 10 anos e de 11 a 16 anos,
respectivamente, não evidenciaram diferenças significativas (P > 0,05). Quanto ao status
reprodutivo, perdas de 5,77% (3/52), 9,82% (11/112) e 9,61% (15/156) para fêmeas nulíparas,
pluríparas não lactantes e pluríparas lactantes, respectivamente, também não mostraram
diferenças significativas (P > 0,05). No que se refere ao período gestacional, o índice de perda
do concepto foi mais significativo (P < 0,05) no período de 15 a 20 dias de gestação. Não foi
evidenciada diferença significativa (P > 0,05) entre os índices de perdas do concepto das
éguas inseminadas no cio do potro 8,97% (7/78) e daqueles inseminadas no cio subseqüente
10,26% (8/78). Com base nos dados deste estudo foi possível concluir que o status
reprodutivo e a faixa etária não influenciam as taxas de perdas do concepto, porém, no
período entre a 2ª e 3ª semana de gestação, as éguas estão mais susceptíveis a essas perdas.
No segundo estudo, entre os anos de 2004 e 2005, foram utilizadas 10 éguas pluríparas como
doadoras de embriões e como receptoras, 21 fêmeas nulíparas, 20 pluríparas lactantes e 20
pluríparas não lactantes. As colheitas embrionárias foram realizadas no 8o dia após a ovulação
das doadoras e os embriões imediatamente transferidos para as receptoras. Os diagnósticos de
gestação por ultra-sonografia foram realizados no 7o dia após as TE, repetindo os exames nos
x
dias 20, 25 e 30 da gestação. O total de prenhez diagnosticada no 7o dia após a TE e de perda
embrionária no 30o dia de gestação foram 67,21% (41/61) e 39,02% (16/41), respectivamente.
Com relação ao status reprodutivo, as taxas de prenhez e de perda embrionária, não
evidenciaram diferenças significativas (P > 0,05). Quanto à faixa etária, as fêmeas com mais
de 11 anos exibiram taxa de prenhez menor (P < 0,05) do que às de faixas entre 6 e 8 anos e
entre 9 e 11 anos e apresentaram perda embrionária significativamente maior (P < 0,05) do
que as de faixa inferior. Com relação aos períodos gestacionais em que ocorreram a perdas
embrionárias, não foram constatadas diferenças significativas (P > 0,05). Os dados obtidos
neste estudo permitem concluir que éguas da raça Mangalarga Marchador independente do
status reprodutivo podem ser utilizadas com êxito como receptoras em programas de TE,
porém, não é recomendável, que fêmeas com idade acima de 11 anos sejam utilizadas para
essa função.
UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCO
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIA VETERINÁRIA
Tese de Doutorado em Ciência Veterinária
Recife, 26 de fevereiro de 2009.
xi
Title: The conceptus loss in Mangalarga Marchador mares of different reproductive status
after artificial insemination and embryo transfer
Author: Marcelo Cavalcanti Rabelo
Advisor: Marcos Antonio Lemos de Oliveira
Abstract
Two studies were performed to evaluate in Mangalarga Marchador mares, the factors that
influence the concepts loss after artificial insemination (AI), considering the group age, the
reproductive status and the gestational period and the rates of pregnancy and embryonic loss
of mares in different reproductive condition used as recipients in programs for embryo
transfer (ET). In the first study, was performed between the years 2003 and 2006 were
monitored the pregnancies of 320 mares, including nulliparous female (n = 52), not lactating
pluriparous (n = 112) and pluriparous in lactation (n = 156) aged between 4 and 16 years. The
diagnosis of pregnancy by ultrasound was conducted by the 15th day after ovulation, repeating
the tests on the 20th, 30th and 45th day of pregnancy. The total of conceptus loss was 9.06%
(29/320). Concerning the age group, losses of 8.06% (5/62), 6.58% (10/152) and 13.21%
(14/106) for females under the age of 5, 5 to 10 years and 11 to 16 years respectively showed
no significant differences (P > 0.05). Concerning the reproductive status, loss of 5.77%
(3/52), 9.82% (11/112) and 9.61% (15/156) for females nulliparous, pluriparous non lactants
and pluriparous in lactation, respectively, also showed no significant differences (P > 0.05).
Considering the gestational period, the concept loss was more significant (P < 0.05) in the
period from 15 to 20 days of gestation. Were not observed significant differences (P > 0.05)
between the pregnancy rates loss of the mares inseminated in the foal heat 8.97% (7/78) and
those inseminated in subsequent estrus 10.25% (8/78). Based on data from this study were
unable to conclude that the reproductive status and age group did not influence the rates of the
concept loss, but, in the period between 2nd and 3rd week of gestation, the mares are more
susceptible to these losses. In the second study, between the years 2004 and 2005 have been
used pluriparous 10 mares as donors of embryos and recipients, 21 nulliparous females, 20
pluriparous in lactation and 20 not lactating pluriparous. On The 8th day after ovulation were
performed the embryos recovered of the donors and immediate transfer to the recipients. The
diagnosis of pregnancy by ultrasound was conducted by the 7th day after the ET, repeating the
tests on days 20, 25 and 30 of pregnancy. The total pregnancy diagnosed in the 7th day after
xii
ET and embryo loss in the 30th day of gestation was 67.21% (41/61) and 39.02% (16/41),
respectively. With regard to the reproductive status, the rates of pregnancy and embryonic
loss, did not show significant differences (P > 0.05). As for the age group, females with more
than 11 years showed lower pregnancy rate (P < 0.05) than on the groups between 6 and 8
years and between 9 and 11 years old and embryo loss had significantly higher (P < 0.05) than
those in the lower range. With regard to gestational periods in which the embryonic losses
occurred were not found significant differences (P > 0.05). Data obtained in this study
suggests that Mangalarga Marchador mares regardless of reproductive status can be used
successfully as recipients in programs for ET, but, is not recommended that females aged over
11 years are used for this function.
UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCO
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIA VETERINÁRIA
Doctor’s Thesis Veterinary Science
Recife, February 26th, 2009
13
1. INTRODUÇÃO
A equideocultura brasileira apresenta indicadores que, apesar de pouco conhecidos,
são bastante representativos sob o ponto de vista econômico e social. Com um efetivo de 5,8
milhões de equinos, o Brasil possui o maior rebanho da América do Sul e o terceiro maior do
mundo, ficando abaixo apenas do México e da China. Movimenta cerca de 7,5 bilhões de
reais anuais, gerando 3,2 milhões de empregos diretos e indiretos (VILELA e ARAÚJO,
2006).
Embora não se tenha a cultura de consumir carne e derivados de equinos, o Brasil
destaca-se como o oitavo país exportador de carne dessa espécie tendo abatido 205 mil
animais em 2004, com um faturamento de 34 milhões de dólares. Sendo a Bélgica, Holanda,
Itália, Japão e a França os principais países importadores de carne de cavalo brasileira
(VILELA e ARAÚJO, 2006).
No Brasil, os principais propósitos da criação de eqüinos são a labuta diária nas
atividades agropecuárias (principalmente no manejo de bovinos), uso militar, competições
hípicas, esportes equestres (enduro, vaquejada, rodeio, adestramento etc.) e competições
turfísticas (corridas de cavalo). Nesse contexto, diferente do que acontece na criação de outras
espécies, o equino é selecionado, principalmente, pelo desempenho e conformação física e
não com base em eficiências produtiva e reprodutiva (HAFEZ, 1995; VILELA e ARAÚJO,
2006).
Entretanto, a viabilização da equideocultura moderna requer avanços tecnológicos que
incrementem a produtividade do rebanho, tornando-o mais competitivo tanto no cenário
nacional quanto no internacional. Nesse sentido, o emprego de novas biotecnologias que
propiciem a aceleração do melhoramento genético e aumento da produtividade como o uso da
ultra-sonografia, inseminação artificial (IA), transferência de embriões (TE) entre outras, têm
sido crescentemente utilizadas nessas duas últimas décadas (SQUIRES et al., 2003;
LOSINNO e ALVARENGA, 2006).
Contudo, a perda precoce do concepto tem-se mostrado como maior fator de subfertilidade e de redução da eficiência reprodutiva em éguas, ocasionando grandes perdas
econômicas para o criador (BALL, 1993; ROCHA et al., 2007).
Ball (1993) relata que a ocorrência de morte do concepto entre a fertilização e o 14o
dia é de 9% para éguas jovens e férteis e de 62 a 73% para éguas idosas e subférteis.
Carnevale et al. (2000) ressaltam que a perda do concepto aumenta com a idade da égua.
Em éguas receptoras de embriões, Carnevale et al. (2000), Rocha et al. (2007) e
Taveiros et al. (2008) observaram uma variação de 4,8 a 62% nas taxas de perdas do concepto
14
no período de 12 a 50 dias de gestação, sendo que a maior incidência ocorre entre a 2a e a 3a
semana (CARNEVALE et al., 2000).
Diante do exposto, objetivou-se com este estudo avaliar em éguas da raça Mangalarga
Marchador, fatores que influenciam a perda do concepto após a IA, considerando a faixa
etária, o status reprodutivo e o período de gestação, bem como, as taxas de prenhez e perda
embrionária de éguas em diferentes status reprodutivos utilizadas como receptoras em
programas de TE.
2. REVISÃO DE LITERATURA
2.1. Aspectos da fisiologia reprodutiva da égua
As éguas atingem a puberdade, em média, aos 18 meses de idade (SQUIRES, 1993b;
HAFEZ, 1995; TAVEIROS, 2000), recebendo influências de fatores como ambiente,
nutrição, época de nascimento, raça, manejo, sazonalidade e fotoperíodo (SQUIRES, 1993b;
HAFEZ, 1995). São considerados animais poliéstricos estacionais por apresentarem atividade
sexual durante o final da primavera, no verão e início do outono, entretanto, nas regiões
equatoriais podem apresentar atividade sexual contínua (DAELS e HUGHES, 1993; HAFEZ,
1995). Sabe-se ainda que há uma variação sazonal do ciclo estral em éguas e que nem todas
entram em anestro estacional no inverno (DAELS e HUGHES, 1993; DOWSETT et al.,
1993).
A atividade sexual das éguas, além da nutrição e do clima é regulada principalmente
pelo fotoperíodo (DAELS e HUGHES, 1993), onde a melatonina, produzida em maior
quantidade durante o período de baixa luminosidade, inibe a produção dos hormônios
hipotalâmicos-hipofisários para desencadear o anestro estacional (SHARP e CLEAVER,
1993).
O ciclo estral na espécie equina tem a duração média de 21 dias, sendo dividido em
fase folicular (estro), variável de 4 a 7 dias e fase lútea (diestro) com duração de 14 a 15 dias
(DAELS e HUGHES, 1993), ocorrendo a ovulação um a dois dias antes do fim do estro
(DAELS e HUGHES, 1993; HAFEZ, 1995).
As gonadotrofinas adenohipofisárias, mesmo que, isoladamente, não exerçam
influência sobre o crescimento dos folículos, são os seus reguladores primários (PIERSON,
1993). O crescimento folicular na égua é caracterizado pela ocorrência de dois tipos de ondas
foliculares durante o ciclo estral, as ondas maiores ou ovulatórias, caracterizadas pela
presença de folículos dominantes e subordinados e ondas menores, nas quais os folículos não
15
atingem o diâmetro do folículo dominante e regridem (BERGFELT e GINTHER, 1993;
GINTHER, 2000).
As maiores ondas primárias emergem na metade do ciclo estral, resultando em estro
acompanhado de ovulação, no entanto, as maiores ondas secundárias surgem no final do estro
ou no início do diestro, podendo ocorrer ovulação ou regressão do folículo dominante.
Embora a égua apresentando os dois tipos de ondas foliculares no mesmo ciclo estral, o que
predomina é a ocorrência de uma maior onda primária (BERGFELT e GINTHER, 1993).
O aparecimento de ondas foliculares maiores e menores nas éguas está associado ao
aumento das concentrações do hormônio folículo estimulante (FSH) que atinge seu pico
quando o folículo maior alcança o diâmetro de 13 mm e diminuem dando início ao fenômeno
de divergência folicular da onda ovulatória, que é caracterizado pelo crescimento contínuo do
folículo maior da onda para se tornar folículo dominante e a redução ou cessão do
crescimento dos demais folículos, denominados de subordinados (GASTAL et al., 1997;
GINTHER, 2000).
O FSH é essencial ao desenvolvimento folicular (GINHTER, 2000). O declínio das
concentrações de FSH é causado pelo aumento das concentrações de inibina e estradiol,
produzidas pelos folículos em crescimento, dando início à fase de divergência folicular e,
conseqüentemente, da dominância. Após a dominância, a inibina passa a ser produzida
somente pelo folículo dominante (GINHTER et al., 2002).
Por outro lado, as concentrações circulatórias de hormônio luteinizante (LH)
aumentam gradualmente durante o estro (McCUE, 1996). O LH é necessário para a
continuação do crescimento, maturação e ovulação do folículo ovulatório na égua. No futuro
folículo dominante, a quantidade de receptores de LH é maior do que nos outros folículos
antes do início da divergência folicular (GINHTER et al., 2002).
2.2. Generalidades sobre inseminação artificial em equinos
A inseminação artificial é a biotécnica da reprodução mais utilizada e mais importante
para o melhoramento genético das espécies, devido aos poucos machos selecionados
produzirem espermatozóides para a inseminação de centenas de fêmeas por ano. Em
contraste, poucos produtos podem ser obtidos de cada fêmea por ano, mesmo com o advento
de novas biotécnicas, como a transferência de embriões e fertilização in vitro (HAFEZ, 1995;
AX et al., 2000).
Dentre as diferentes biotecnologias da reprodução atualmente empregadas, a IA é a
que demonstra a maior viabilidade econômica e facilidade na implantação, nas diferentes
16
espécies domésticas aonde seu uso já se tornou consagrado. Nas raças da espécie equina que
permitem seu uso, esta vem sendo empregada com bons índices de fertilidade, além de
proporcionar um menor desgaste do garanhão e possibilitar o progresso genético do plantel
existente (WEISS et al., 2003).
Segundo Mies Filho (1987), o uso da IA acelera o melhoramento genético, viabiliza a
obtenção de produtos de reprodutores alojados em outros países ou até mesmo dos que já
morreram, evita a transmissão de doenças venéreas, facilita a realização de testes de progênie
além de possibilitar que reprodutores subférteis produzam crias. Entretanto, para que se
obtenha sucesso em programas de IA, são necessários alguns cuidados como a utilização de
garanhões de boa qualidade, um bom controle sanitário e mão de obra especializada.
A inseminação convencional em éguas é realizada por via vaginal, na qual a mão
enluvada do inseminador guia uma pipeta até a passagem da cérvix e o sêmen é depositado no
corpo do útero ou na junção útero-tubárica do corno uterino ipsis lateral ao ovário com o
folículo ovulatório, devendo esta ser realizada o mais próximo possível da ovulação (MIES,
1987; PIMENTEL e CARNEIRO, 2008), que ocorre 24 a 48 horas antes do fim estro, o qual
tem duração de quatro a sete dias (DAELS e HUGHES, 1993; HAFEZ, 1995).
Para detecção das éguas em estro é necessário a rufiação, e quando não é possível
executar esta prática, faz-se necessário a realização de uma avaliação ginecológica por
palpação retal para identificar a presença ou não de folículos e a consistência do útero, a fim
de determinar em que fase do ciclo estral se encontra a égua (BRISKO e VARNER, 1993). O
ideal é que se faça controle folicular com monitoramento ultra-sonográfico em programas de
IA, a fim de prever a ovulação e decidir o melhor momento para inseminação, limitando
assim o número de inseminações (BRISKO e VARNER, 1993; PIMENTEL e CARNEIRO,
2008).
Na maioria dos programas de IA, as éguas são inseminadas em dias alternados a partir
do segundo ou terceiro dia do estro até que a ovulação seja detectada ou que a égua não mais
evidencie estro (HAFEZ, 1995; PIMENTEL e CARNEIRO, 2008). Utilizando esse manejo,
com um sêmen de garanhão de fertilidade comprovada, bons índices reprodutivos são
alcançados quando a IA for realizada até 72 horas antes da ovulação. Entretanto, em IA
realizada depois da ovulação, a fertilidade é satisfatória quando esse tempo não ultrapassar 6
horas, após esse período, há maior probabilidade de resultar em morte embrionária
(PIMENTEL e CARNEIRO, 2008).
A utilização da IA pode ser resumida em três formas: com sêmen fresco, sêmen
refrigerado e sêmen congelado. A IA com sêmen fresco é realizada em um período menor que
17
12 horas após a colheita, sendo o sêmen mantido a temperatura ambiente (22oC). Como
biologicamente o sêmen deve sair do trato genital do macho diretamente para o da fêmeas, em
geral não há necessidade de diluidores. Mas, como o uso da IA requer a remoção dos gametas
masculino do trato genital do macho por meio de colheita com vagina artificial, o sêmen é
exposto a fatores estressantes, tornando-se vulnerável a fatores ambientais como temperatura,
luz, traumas físicos e a uma variedade de produtos tóxicos ao gameta masculino. Por essas
razões, torna-se necessário o uso de diluidores (PIMENTEL e CARNEIRO, 2008).
Os diluidores de sêmen são soluções destinadas a proteger os espermatozóides de
condições desfavoráveis e prolongar sua sobrevivência durante a refrigeração e o transporte,
além de apresentarem a vantagem de aumentar o volume da dose inseminante e auxiliarem na
análise do sêmen (BALL, 1998; NUNES et al., 2006).
Os diluidores devem ter capacidade tamponante, ser isomolar com plasma seminal,
proporcionar fonte de energia, proteger contra choque térmico e ter capacidade antibacteriana.
Os diluidores mais freqüentemente utilizados são variações da fórmula composta por 2,4g de
leite em pó desnatado, 4,9g de glicose, 150.000 U.I. de penicilina G potássica, 150.000µg de
estreptomicina cristalina e água deionizada q.s.p. 100mL (BRISKO e VARNER, 1993) ou
ainda utilizando gema de ovo como um de seus componentes (HAFEZ, 1995). De acordo com
Pimentel e Carneiro (2008), somente quando a IA for realizada por um período, após a
colheita, menor do que cinco minutos, admite-se o uso de sêmen puro, não diluído.
O uso de sêmen refrigerado é a forma de IA em equinos que mais tem crescido nos
últimos anos, principalmente após o desenvolvimento do Equitainer®, bem como, dos
modelos MSP®- 1 e 2, no Brasil, que são equipamentos idealizados para transporte de sêmen.
Esses equipamentos permitem realizar resfriamento progressivo e fisiológico do sêmen cerca
de 0,3oC/minuto (PIMENTEL e CARNEIRO, 2008) e preservá-lo a temperatura entre 15 e
20°C ou entre 4 e 5oC (NUNES et al., 2006), com mínimos efeitos estressantes e deletérios
aos espermatozóides, proporcionando aumento de sua longevidade fora do trato genital
feminino de até 72 horas com capacidade fecundante (PIMENTEL e CARNEIRO, 2008).
Dessa forma, a IA com sêmen refrigerado vem sendo amplamente utilizada nas últimas
décadas, mesmo antes de algumas associações de raças oficializarem a sua aplicação como
método de acasalamento, pois muitos criadores evitam deslocar as éguas até o local onde se
encontram os garanhões (NUNES et al., 2006).
O sêmen congelado é preservado em nitrogênio líquido a temperatura de -196oC por
tempo indeterminado, porém na utilização dessa forma IA, ainda existem questões técnicas a
serem solucionadas, como a variação individual frente à criopreservação, o baixo rendimento
18
de doses por ejaculado, o intenso manejo das éguas durante as inseminações, maior custo por
prenhez, além da grande oscilação das taxas de prenhez em relação às obtidas com monta
natural ou IA com sêmen a fresco ou refrigerado (BACKMAN et al., 2004).
As técnicas de congelação ainda não foram capazes de apresentar uma repetibilidade
adequada em todos os garanhões (PIMENTEL e CARNEIRO, 2008). De acordo com Pickett
e Amann (1993) cerca de 30% dos garanhões, cujo sêmen se apresenta nos padrões de
normalidade, não suportam a congelação.
O sêmen equino congelado e descongelado tem sua longevidade reduzida após a IA.
Segundo Dobrinski et al. (1996), antes da fecundação, os espermatozóides se aderem às
células epiteliais do oviduto (CEO), para que essa interação prolongue sua viabilidade no trato
genital feminino. A aderência da membrana espermática às CEO previne a capacitação,
prolongando a viabilidade espermática. Durante o processo de congelação e descongelação,
discretas alterações na composição da membrana espermática reduzem a capacidade dos
espermatozóides aderirem às CEO e, subseqüentemente, sua longevidade fica reduzida e a
fertilidade prejudicada caso a IA não aconteça próxima à ovulação.
De acordo com Palmer (1993), a IA com sêmen congelado para ser viabilizada
necessita de um intervalo menor do que 24 horas da inseminação para ovulação, ou mesmo de
um período de 6 a 8 horas após a ovulação (PIMENTEL e CARNEIRO, 2008). Nesse
contexto, a IA deve ser realizada após o monitoramento folicular. Recomenda-se induzir a
ovulação com a aplicação de 2.500 U.I. de gonadotrofina coriônica humana (hCG) por via
intravenosa quando o folículo atinge 35mm de diâmetro (PIMENTEL e CARNEIRO, 2008).
Dessa forma, as éguas ovulam entre 24 e 48 horas após o tratamento. Entretanto, devido à
imunogenicidade, esse tratamento não deve ser realizado mais do que duas vezes no mesmo
ano (PALMER, 1993).
2.3. Considerações sobre transferência de embriões em equinos
A utilização da TE em equinos tem aumentado muito nestas duas décadas em países
como Argentina, Estados Unidos da América (EUA), França e Brasil, sendo o uso desta
biotecnologia permitido pela maioria das associações de criadores de cavalos (SQUIRES et
al., 2003; LOSINO e ALVARENGA, 2006).
A primeira TE na espécie equina que logrou sucesso foi realizada no Japão por Oguri
e Tsutsumi (1972). No Brasil os primeiros relatos foram feitos por Henry et al. (1987) e
Fleury et al. (1987).
19
O método da TE em equinos mais difundido atualmente é o não cirúrgico ou
transcervical (JASKO, 2002). O método cirúrgico de colheita de embriões foi inicialmente
descrito por Allen e Rowson (1972), sendo, geralmente, utilizado na recuperação de embriões
em estádios iniciais de desenvolvimento e, em estádios mais avançados, a colheita
transcervical pode ser realizada a partir do 5o ou 6o dia da ovulação (OGURI e TSUTSUMI,
1972).
As taxas de gestação após a TE pela técnica não-cirúrgica, apresentam resultados ruins
(0%) como os citados por Oguri e Tsutsumi (1972, 1974) e bons (77%) como os reportados
por Wilson et al. (1987). A vantagem da técnica não cirúrgica é que pode ser realizada a
campo e com baixo custo (FLEURY et al., 2001).
Na atualidade, os métodos de colheitas de embrião mais utilizados são os descritos por
Oguri e Tsutsumi (1974), Squires et al. (1982) e Squires (1993a), no quais, as colheitas
embrionárias são realizadas entre o 6o e 8o dia após a ovulação. Todavia, Iuliano et al. (1985),
Squires et al. (1985) e Fleury et al. (2001) demonstraram que a colheita somente deve ser
realizada no 7o ou 8o dia após a ovulação, ressaltando-se que a idade do embrião não interfere
na TE, desde que no máximo, estejam no 8o dia após a ovulação (McKINNON et al., 1988).
Segundo Fleury e Alvarenga (1999), a colheita de embriões no 8o dia após a ovulação tende a
aumentar a taxa de recuperação embrionária e diminuir a quantidade de trabalho envolvido no
processo de TE devido à fácil visualização do embrião.
Na implantação de um programa de TE, vários fatores como o custo da técnica,
histórico reprodutivo da égua, restrições do registro da raça e valor da cria devem ser levados
em consideração (McKINNON et al., 1988). Sendo assim, somente devem ser consideradas
como éguas doadoras as que apresentem patrimônio genético superior, fêmeas
impossibilitadas de conceber por monta natural ou IA, incapazes de manter uma gestação a
termo, éguas em treinamento e/ou competição, potras acima de dois anos de idade, bem como
éguas com histórico de perda embrionária por problemas hormonais, endometriais e com
defeitos adquiridos nos membros locomotores, além de éguas que tenham sido submetidas à
cirurgia na região abdominal (SQUIRES et al., 1999; SQUIRES et al., 2003).
As doadoras também devem apresentar um ciclo estral regular e serem submetidas a
exames de ultra-sonografia, citologia vaginal, biópsia endometrial e dosagem hormonal, antes
de iniciar o programa de TE (SQUIRES et al., 1985; LOSINNO e ALVARENGA, 2006). O
controle folicular e a rufiação devem ser efetuados diariamente e a IA ou monta natural
devem ser implementadas em dias alternados, a partir de um folículo com 30mm de diâmetro
até a constatação da ovulação (McKINNON e SQUIRES, 1988).
20
Um programa de TE deve manter uma relação de duas receptoras para cada doadora,
ressaltando-se que a utilização de éguas paridas do próprio estabelecimento deve ser
priorizada por apresentarem histórico reprodutivo conhecido (McKINNON et al., 1988;
TAVEIROS, 2000).
Com relação às receptoras, além dos aspectos anteriormente comentados para as
doadoras, essas devem apresentar bom escore corporal (HENNEKE et al., 1983), bem como,
estarem livres de anormalidade uterinas e ovarianas como edema, cistos, tumores, fluidos ou
ar uterinos, tumores ovarianos ou outras anormalidades ovarianas características (SQUIRES
et al., 1999; LOSINNO e ALVARENGA, 2006).
As éguas ovariectomizadas também podem ser utilizadas como receptoras de embrião,
desde que seja administrada progesterona por 120 ou 150 dias para manutenção da gestação
(SQUIRES, 1993a).
De acordo com Sertich (1989) é recomendável a utilização de éguas nulíparas como
receptoras em programas de TE, por apresentarem uma cérvix longa e fechada, denominada
de funcionalmente competente, sendo também possível, o uso com sucesso de éguas em
lactação a partir do 30o dia de parição (WILSON et al.,1987). Entretanto, Taveiros (2000) e
Taveiros et al. (2003) ressaltam não haver diferenças entre os índices de fertilidade de éguas
receptoras nulíparas, pluríparas lactantes ou pluríparas não lactantes.
O grau de sincronia entre doadora e receptora deve ser de menos (-) 1 a mais (+) 3
dias, condição esta que permite a ovulação da receptora desde 1 dia antes (-1) até 3 dias
depois da doadora (McKINNON et al., 1988). Entretanto, Jacob et al. (2002) relatam não
existir diferença na porcentagem de prenhez quando se utiliza receptoras ovulando entre 1 dia
antes (-1) até 5 dias depois (+5) das doadoras.
Quando o plantel de receptoras atende as exigências de um programa de TE, os
tratamentos hormonais para a sincronização são dispensados (McKINNON e SQUIRES,
1988). Entretanto, algumas vezes, faz-se necessário induzir a ovulação da receptora para
garantir tal sincronia (PALMER e JOUSSET, 1975). O diâmetro mínimo de um folículo
capaz de responder à indução da ovulação é de 35mm (PALMER, 1993). Nesses casos, a
aplicação intramuscular de 1500 a 3000 UI de hCG induz a ovulação após 24 a 48 horas na
grande maioria das éguas (SULLIVAN et al., 1973). Entretanto, administrações consecutivas
de hCG podem induzir a formação de anticorpos e reduzir a porcentagem de éguas que
respondem ao tratamento (SULLIVAN et al., 1973). Contudo, Duchamp et al. (1987)
demonstraram que a utilização do extrato de pituitária equina (EPE) apresenta bons resultados
de ovulação sem promover a formação de anticorpos.
21
Embora a prostaglandina F2α (PGF2α) e seus análogos sejam luteolíticos efetivos, o
corpo lúteo é refratário a tais agentes até aproximadamente 5 dias após a ovulação (PALMER
e JOUSSET, 1975). Para sincronizar um grupo de éguas em todos os estádios do ciclo estral,
o regime de dupla aplicação de PGF2α pode ser adaptado ao da espécie bovina, ou seja,
administrações com intervalo de 14 a 15 dias, técnica que induz o estro em 92% das éguas
tratadas (PALMER e JOUSSET, 1975). Considerando-se que esse procedimento sozinho não
é efetivo para sincronizar ovulações, ele deve ser associado à administração de hCG entre o 4o
e o 6o dia após a segunda aplicação do agente luteolítico (PALMER e JOUSSET, 1975).
Segundo McCue (1996), as tentativas de induzir ovulações múltiplas nas éguas têm
incluído a administração de: gonadotrofina coriônica equina (eCG), hormônio liberador de
gonadotrofinas (GnRH), hormônio folículo estimulante de origem suína (FSH-P) e de origem
equina (eFSH), EPE e vacinas contra a inibina. Entretanto, não há produtos hormonais
comercialmente disponíveis capazes de induzir múltiplas ovulações em éguas (SQUIRES et
al., 1999; SQUIRES et al., 2003).
O eCG é usado para induzir superovulação em ruminantes, sempre em doses elevadas
e não tem efeito no desenvolvimento folicular ou na ovulação em éguas. Por outro lado, a
administração de GnRH induz a produção de múltiplos folículos nas éguas em anestro
estacional, porém, é ineficiente em éguas ciclando (McCUE, 1996; SQUIRES et al., 2003).
Nos estudos de administração do FSH, devido à indisponibilidade no comércio dos de
origem equina, tem-se utilizado o FSH suíno, porém as respostas têm sido insatisfatórias
(SQUIRES et al., 2003). Diversas preparações de FSH têm sido usadas para induzir múltiplas
ovulações em éguas, entretanto, a dose necessária para induzir mais do que uma ovulação é
extremamente elevada (SQUIRES et al., 1999).
O EPE é o mais utilizado para induzir ovulações múltiplas em éguas. As taxas de
ovulação variam porque a quantidade de FSH e LH das preparações não são padronizadas.
Assim, como nas éguas com ovulação espontânea, a colheita de embriões por ovulação é de
aproximadamente 50%, ou seja, éguas que respondem ao EPE com quatro ovulações,
geralmente produzem dois embriões. A colheita de embriões de éguas tratadas com EPE é três
a quatro vezes maior do que as não tratadas (SQUIRES et al., 2003). Contudo, existem várias
limitações quando se utiliza EPE para induzir ovulações múltiplas em éguas. Uma dessas
limitações é a possível redução da viabilidade dos embriões das éguas superovuladas e a
redução do número de embriões coletados por ovulação (DIPPERT et al., 1994; HINRICHS,
1998).
22
A imunização ativa ou passiva contra inibina tem sido utilizada para aumentar as taxas
de ovulação das éguas, induzindo o aumento da secreção endógena de FSH (McCUE, 1996;
GINTHER et al., 2002; SQUIRES et al., 2003). A inibina-A pode ser um dos hormônios que
contribuem para o aumento da sensibilidade dos folículos às gonadotrofinas em associação
com o mecanismo da divergência. Porém, estes mecanismos ainda não estão totalmente
esclarecidos nas éguas (GINTHER et al., 2002).
2.4. Uso da ultra-sonografia na reprodução equina
O diagnóstico precoce da prenhez através de ultra-sonografia na espécie equina foi
inicialmente reportado por Palmer e Driancourt (1980). Para realização do exame ultrasonográfico em éguas deve ser levado em consideração a anatomia da espécie, onde os cornos
uterinos são dispostos em “V” (WOLF e GABALDI, 2002). Além disso, vale ressaltar um
fenômeno característico dessa espécie que é a mobilidade intensa da vesícula embrionária
entre o 10o e 16o dia de gestação (GINTHER, 1998; GRUNERT et al., 2005; GAIVÃO e
STOUT, 2007).
A mobilidade da vesícula embrionária parece ser causada pelas contrações da parede
uterina, a qual é controlada pelo próprio concepto, sofrendo redução até cessar no 17o dia,
devido a aumento do tônus uterino e da própria vesícula, culminando com o processo de
fixação do concepto ao endométrio, que ocorre geralmente logo após a bifurcação uterina
(KÄHN, 1994; GINTHER, 1998; GAIVÃO e STOUT, 2007).
Na maioria das éguas, o concepto pode ser visualizado pela primeira vez a partir do 9o
ao 13o dia após a ovulação como uma pequena vesícula esférica com 4 a 5mm de diâmetro e
espaço vesicular anecóico. A partir do 14o dia, o diagnóstico de prenhez torna-se mais seguro
pela visualização da vesícula embrionária com diâmetro médio de 15mm (MOURA e
MERKT, 1996; WOLF e GABALDI, 2002).
Entre o 14o e o 17o dia de prenhez a vesícula embrionária alcança um desenvolvimento
diário de e 3 a 4mm (WOLF e GABALDI, 2002), apresentando já no 16o dia um diâmetro
entre 20 e 25mm (MOURA e MERKT, 1996), porém, sofrendo redução na velocidade de
crescimento a partir do 17o dia de prenhez devido a implantação da vesícula embrionária na
base do corno uterino (GINTHER, 1986; KÄHN, 1994; MOURA e MERKT, 1996),
retornando a aumentar rapidamente depois do 25o dia (KÄHN, 1994).
O concepto até o 15o dia de gestação tem formato estritamente esférico, toma forma
ovóide até o 17o dia e forma de pêra entre os dias 18 e 21, após este período é visualizado sob
forma irregular (KÄHN, 1994), começa a se estreitar na parte ventral, local onde o embrião
23
poderá ser observado (GINTHER, 1986; MOURA e MERKT, 1996; WOLF e GABALDI,
2002).
A subida do embrião na vesícula embrionária ocorre entre o 22o e 25o dia devido à
redução do saco vitelino e simultânea formação da vesícula alantoideana (MOURA e
MERKT, 1996).
A partir do 24o ao 26o dia de gestação pode-se detectar os batimento cardíacos do
concepto (150 a 190 batimentos por minuto, que diminuem com o avançar da gestação),
sendo o primeiro parâmetro relacionado à viabilidade embrionária, servindo para excluir uma
gestação patológica. A freqüência cardíaca chega a 196 batimentos por minutos durante o 3o
mês de gestação, porém diminui gradualmente (130 por minuto) até o 6o mês de gestação
(CURRAN e GINTHER, 1995).
No 30o dia, o embrião posiciona-se no meio da vesícula embrionária e no 33o dia no
seu terço superio,r com penetração de células coriônicas no endométrio para iniciar a
formação dos cálices endometriais (MOURA e MERKT, 1996).
No 40o dia ocorre o início da formação do cordão umbilical (GINTHER, 1998). Entre
41o e o 60o dias de gestação devido à formação do cordão umbilical ligado ao pólo dorsal do
alantocórion, ocorre o descenso fetal para porção ventral da vesícula, onde o feto ficará na
posição de decúbito dorsal. A partir deste momento o feto poderá ser observado e são vistos
os primeiros movimentos fetais, parâmetro também relacionado à viabilidade fetal
(GINTHER, 1986; KÄHN, 1994; GINTHER, 1998).
Depois dos 60 dias de gestação, a ultra-sonografia fetal ganha uma nova dimensão,
podendo-se descrever inúmeras partes e órgãos do feto, bem como suas mensurações,
obtendo-se importantes conclusões de gestações anormais e determinação da idade fetal
(KÄHN, 1994).
A determinação do sexo fetal pode ser realizada entre o 50o e 70o dia de gestação,
onde a técnica para determinação do sexo é baseada no posicionamento relativo do tubérculo
genital. O tubérculo genital é a estrutura que dará origem ao pênis e prepúcio nos machos e a
vulva e ao clitóris nas fêmeas, apresentando-se à ultra-sonografia como uma estrutura
bilobulada, com cada lobo alongado e ovóide, de pouco milímetros de tamanho e
ecogenicidade intensa (CURRAN, 1992; KÄHN, 1994).
Na espécie equina, há um consenso quanto ao período ótimo para realização do
diagnóstico de gestação utilizando-se a ultra-sonografia, ficando entre os dias 15 a 18 póscobertura ou IA, pois é o momento em que a vesícula é facilmente detectada. Entretanto, é
indicado que se faça um reexame em torno do 30o dia, para se verificar uma possível morte
24
embrionária precoce, que é mais comum neste período; outra avaliação é recomendada entre o
50o e o 60o dia de gestação para que todas as perdas sejam detectadas (KÄHN, 1994;
FERREIRA et al., 1999; WOLF e GABALDI, 2002).
2.5. Aspectos relacionados à perda do concepto
Considera-se perda precoce do concepto uma prenhez interrompida involuntariamente
nos primeiros 60 dias (WOLF e GABALDI, 2002), definindo-se como morte embrionária
quando esta acontece antes da completa organogênese, que geralmente ocorre antes do 40o dia
de gestação (GINTHER, 1998; GRUNERT et al., 2005).
A perda precoce do concepto tem-se mostrado como maior fator de subfertilidade e de
redução da eficiência reprodutiva em éguas, ocasionando grandes prejuízos econômicos para
o criador (DUARTE et al., 2002; GRUNERT et al., 2005; ROCHA et al., 2007).
A incidência de perdas do concepto relaciona-se diretamente com a saúde do trato
reprodutivo em especial com endometrites (GINTHER et al., 1985; WOODS et al., 1987;
CARNEVALE e GINTHER, 1992; PAPA et al., 1998; LOSINNO e ALVARENGA, 2006),
variando ainda, entre os diversos fatores, em função da idade das éguas (CHEVALIERCLÉMENT, 1989; CARNEVALE e GINTHER, 1992; CARNEVALE et al., 2000), do
período de gestação (DUARTE et al., 2002), da condição nutricional (HENNEKE et al., 1983;
WOODS et al., 1987; SQUIRES et al., 1999; LOSINNO e ALVARENGA, 2006), do clima
(BALL, 1993), do intervalo de diagnóstico e método de determinação da prenhez
(McKINNON et al., 1988).
Com a introdução da ultra-sonografia no estudo dos problemas reprodutivos dos
equinos, na década de 80, as perdas de prenhez passaram a ser melhor compreendidas pois,
essa técnica possibilitou já aos 10 ou 11 dias pós-ovulação, observar sinais precisos sobre a
evolução e subseqüente perda da prenhez (PALMER e DRIANCOURT, 1980; TAVEIROS,
2000), o que não é possível unicamente através da palpação transretal.
Os índices de morte dos conceptos em equinos no início da gestação são mais elevados
do que em estágios avançados, esse fato pode ter relação com a modificação do ambiente
uterino na ocasião da chegada do embrião ao útero entre o 5o e 6o dia (GINTHER et al., 1985)
e com a falta de mobilidade do mesmo entre o 10o e 16o dia que tem como conseqüência o não
reconhecimento materno de prenhez (GINTHER, 1998; GRUNERT et al., 2005; GAIVÃO e
STOUT, 2007).
Possíveis ocorrências de anomalias cromossômicas e defeitos morfológicos do
embrião (BOUÉ e BOUÉ, 1976; BLUE, 1981) ou ainda efeito negativo de anomalias
25
cromossômicas originarias da senilidade dos gametas (BLUE, 1981), também são relatados
como causas de perda de prenhez no período inicial da gestação.
Ball (1993) relata que a ocorrência de morte embrionária entre a fertilização e o 14o
dia é de 9% para éguas jovens e férteis e de 62 a 73% para éguas idosas e subférteis.
Chevalier-Clément (1989) considera que a perda de prenhez aumenta com a idade da égua.
Segundo Woods et al. (1987), há uma elevação direta e contínua da perda de prenhez em
éguas acima de 13 anos. Porém, Duarte et al. (2002) relataram não existir diferenças entre os
índices de prenhez em função das distintas faixas etárias, contudo, ressaltaram uma tendência
das fêmeas com mais de 12 anos a terem fertilidade mais baixa do que as de faixas etárias
inferiores.
Alguns estudos têm se referido a elevadas taxas de perdas embrionárias quando as
éguas são acasaladas no cio do potro, sendo anormalidades do ambiente uterino, atraso na
involução do útero ou endometrites persistentes os fatores que mais contribuem para essas
perdas (BALL, 1993). Porém, outros estudos reportam que os índices de perdas de prenhez
não diferem quando as éguas são inseminadas no cio do potro ou cio subseqüente (WOODS et
al., 1987; DUARTE et al., 2002).
Por outro lado, no que se refere à fatores hormonais, embora não existam informações
definitivas sobre as concentrações ideais de progesterona necessárias para o desenvolvimento
e manutenção da prenhez, concentrações inadequadas têm sido associadas à morte
embrionária (DOUGLAS et al., 1985; GINTHER et al., 1985). Nesse sentido, Douglas et al.
(1985) propuseram que níveis de progesterona abaixo de 2,5ng/mL em torno do 12o dia
indicam insuficiência lútea e inviabilidade da gestação.
A progesterona (P4) parece ser a única substância ovariana requerida para manutenção
da prenhez. Com base nesse princípio, sua administração permite o estabelecimento da
gestação em éguas ovariectomizadas receptoras de embriões em taxas comparáveis às de
éguas intactas (BALL, 1993; SQUIRES, 1993a).
No que se refere a estrógenos (E2), a concentração plasmática entre o 13o e o 21o dia
pós-ovulação é menor em éguas com perdas embrionárias do que em éguas gestantes (LOPES
et al., 1993), isto, pode ser um indicativo de viabilidade embrionária, porém, são necessários
estudos mais detalhados para confirmar esse fato (PAPA et al., 1998).
Quando se trata de programas de TE, além dos fatores mencionados anteriormente, as
perdas embrionárias, entre uma variabilidade de fatores estão relacionadas ao método de
transferência (SQUIRES et al., 1982; SQUIRES et al., 1999; JASKO, 2002), ao tamanho e a
idade do embrião (McKINNON et al., 1988; FLEURY e ALVARENGA, 1999), a morfologia
26
embrionária (McKINNON e SQUIRES, 1988; CARNEVALE et al., 2000; SQUIRES et al.,
2003), a sincronia entre doadoras e receptoras (McKINNON et al., 1988; SQUIRES, 1993a;
JACOB et al., 2002; LOSINNO e ALVARENGA, 2006), aos procedimentos de cultivo e
armazenagem de embriões (SQUIRES et al., 2003), ao grupo de animais em estudo
(WILSON et al., 1987; SERTICH, 1989; CARNEVALE e GINTHER, 1992; CARNEVALE
et al., 2000; TAVEIROS et al., 2003; ALONSO et al., 2005) e a história reprodutiva de
doadoras e receptoras de embriões (McKINNON et al., 1988; TAVEIROS, 2000;
CARNEVALE et al., 2000; SQUIRES et al., 2003; LOSINNO e ALVARENGA, 2006).
3. REFERÊNCIAS
ALLEN, W. R.; ROWSON, L. E. A. Transfer of ova between horses and donkeys. In:
ANIMAL REPRODUCTION AND ARTIFICIAL INSEMINATION, 7th. 1972. München.
Proceendings… München, 1972. p. 484-487.
ALONSO, M. A. et al. Effect of donor mare’s age in embryonic loss rate. Acta Scentiae
Veterinariae, v.33, Supl. 1, p.203, 2005
AX, R.L. et al. Artificial insemination. In: HAFEZ, E.S.E. & HAFEZ, B. Reproduction in
Farm Animals. 7th ed. Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins, 2000. Cap. 26, 376389.
BACKMAN, T. et al. Pregnancy rates of mares inseminated with semen cooled for 18
hours and then frozen. Journal of Animal Science, v.82, p.690-694, 2004.
BALL, B. A. Embryonic death in mares. In: McKINNON, A.O.; VOSS, J.L. Equine
Reproduction. Philadelphia: Lea & Febiger, 1993. Cap. 61, p.517-531.
BALL, B. A. Evaluation and use of transported equine semen. In: EQUINE ASSISTED
REPRODUCTIVE TECHNOLOGY WORKSHOP, 1998, Davis. Proceedings…Davis,
[s.n.], 1998. p.18-24.
BERGFELT, D. R.; GINTHER, O. J. Relationships between FSH surges and follicular
waves during the estrous cycles in mares. Theriogenology, v.39, p.781-796, 1993.
BLUE, M. G. A cytogenetical study of prenatal loss in the mare. Theriogenology, v.15,
n.3, p.295-309, 1981.
27
BOUÉ, J.G.; BOUÉ, A. Chromosomal anomalies in early spontaneous abortion: their
consequences on early embryogenesis and in vitro growth of embryonic cells. Current
Topics in Pathology, v.62, p. 193-208, 1976.
BRINSKO, S. P., VARNER, D. D. Artificial insemination. In: McKINNON, A.O.; VOSS,
J. L. Equine Reproduction. Philadelphia: Lea & Febiger, 1993. Cap. 84, p.790-797.
CARNEVALE, E. M. et al. Factors affecting pregnancy rates and early embryonic death
after equine embryo transfer. Theriogenology, v. 54, p. 965-979, 2000.
CARNEVALE, E. M.; GINHTER, O.J. Relationships of age to uterine function and
reproductive efficiency in mares. Theriogenology, v. 37, p. 1101-1115, 1992.
CHEVALIER-CLÉMENT, F. Pregnancy loss in the mare. Animal Reproduction Science,
v. 20, p. 231-244, 1989.
CURRAN, S. Fetal sex determination in cattle and horses by ultrasonography.
Theriogenology, v. 37, n. 1, p. 17-21, 1992.
CURRAN, S.; GINTHER, O. J. M-mode ultrasonic assessment of equine fetal heart rate.
Theriogenology, v. 44, p. 609-617, 1995.
DAELS, P. F.; HUGHES, J.P. The normal estrous cycle. In: McKINNON, A.O.; VOSS,
J.L. Equine Reproduction. Philadelphia: Lea & Febiger, 1993. Cap.14, p.121-132.
DIPPERT, K. D. et al. Fertilization rates in superovulated and spontaneously ovulating
mares. Theriogenology, v. 41, n. 7, p. 1411-1423, 1994.
DOBRINSKI, I. et al. Role of carbohydrates in the attachment of equine spermatozoa to
uterine tubal (oviductal) epithelial cells in vitro. American Journal of Veterinary
Research, v. 57, n.11, p. 1635-1639, 1996.
DOUGLAS, R. H.; BURNS, P. J.; HERSHMAN, L.
Physiological and commercial
parameters for producing progeny from subfertile mares by embryo transfer. Equine
Veterinary Journal, Suppl. 3, p.111-114, 1985.
DOWSETT, K. F. et al. Seasonal variation in the estrous cycle of mares in the subtropics.
Theriogenology, v.39, p.631-653, 1993.
28
DUCHAMP, G. et al. Alternative solutions to hCG induction of ovulation in the mare.
Journal of Reproduction and Fertility, v. 35, p. 221-228, 1987.
DUARTE, M. B.; VIEIRA, R. C.; SILVA, F. O. C. Incidência de perda de prenhez até o
50º dia em éguas Quarto de Milha. Ciência Rural, v. 32, n. 4, p. 643-647, 2002.
FERREIRA, J.B.P. et al. Incidência e caracterização ultra-sonográfica da morte
embrionária em éguas da raça Campolina. Revista Brasileira de Reprodução Animal,
v.23, n.3, p.202-203, 1999.
FLEURY, J. J.; ALVARENGA, M. A. Effects of collection on embryo recovery and
pregnancy rates in nonsurgical equine embryo transfer program. Theriogenology, v. 51, p.
261, 1999.
FLEURY, J. J. et al. Fatores que afetam a recuperação embrionária e os índices de prenhez
após transferência transcervical em equinos da raça Mangalarga. Brazilian Journal of
Veterinary Research and Animal Science, v.38, n.1, p. 29-33, 2001.
FLEURY, J. J. et al. Transferência de embriões em equinos. In: CONGRESSO
BRASILEIRO DE REPRODUÇÃO ANIMAL, 7., 1987, Belo Horizonte. Anais… Belo
Horizonte: Colégio Brasileiro de Reprodução Animal, 1987, p. 40.
GAIVÃO, M. M. F.; STOUT, T. A. E. Maternal recognition of pregnancy in the mare: a
mini review. Revista Lusófona Ciência e Medicina Veterinária, v.1, p. 5-9, 2007.
GASTAL, E. L. et al. Role of diameter differences among follicles in selection of a future
dominant follicle in mares. Biology of Reproduction, v. 57, n. 6, p. 1320-1327, 1997.
GINTHER, O.J. et al. Embryonic loss in mares: Pregnancy rate, length of interovulatory
intervals, and progesterone concentrations associated with loss during days 11 to 15.
Theriogenology, v.24, n.4, p.203-216, 1985.
GINTHER, O. J. Equine pregnancy: physical interactions between the uterus and
conceptus. Milne Lecture: Equine Pregnancy, v.44, p. 73-104, 1998.
GINTHER, O. J. et al. Follicle and endocrine dynamics during experimental follicle
deviation in mares. Biology of Reproduction, v. 67, p. 862-867, 2002.
GINTHER, O. J. Selection of the dominant follicle in cattle and horses. Animal
Reproduction Science, v. 60, p. 61-79, 2000.
29
GINTHER, O. P. Ultrasound imaging and reproductive events in the mare. Madison:
Equiservice, 1986, 377p.
GRUNERT, E. et al. Distúrbios da reprodução: alterações conseqüentes às interações entre
o útero e o concepto. In:_. Patologia e clínica da reprodução dos animais mamíferos
domésticos: ginecologia. São Paulo: Varela, 2005. Cap.10, p. 465-488.
HAFEZ, E.S.E. Reprodução animal. 6a ed. São Paulo: Manole, 1995. 582p.
HENRY, M.; MEIRA, C.; OLIVEIRA, M. M. F. Transferência não cirúrgica de embiões
em eqüideos. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE REPRODUÇÃO ANIMAL, 7., 1987,
Belo Horizonte. Anais… Belo Horizonte: Colégio Brasileiro de Reprodução Animal, 1987,
p. 74.
HENNEKE, D. R. et al. Relationship between condition score, physical measurements and
body fat percentage in mares. Equine Veterinary Journal, v. 15, n.4, p. 371-372, 1983.
HINRICHS, K. Production of embryos by assisted reproduction in the horse.
Theriogenology, v. 49, n. 1, p. 13-21, 1998.
IULIANO, M.F.; SQUIRES, E. L.; COOK, V. M. Effect of age of equine embryos and
method of transfer on pregnancy rate. Journal of Animal Science, v. 60, p. 258-263, 1985.
JACOB, J.C.F. et al. The impact of degree of synchrony between donors and recipients in a
commercial equine embryo transfer program. Theriogenology, v.57, p. 545, 2002.
JASKO, D.J. Comparison of pregnancy rates following nonsurgical transfer of day 8 equine
embryos using various transfer devices. Theriogenology, v.58, p.713-715, 2002.
KÄHN, W. Veterinary Reproductive Ultrasonography. London: Mosby-Wolfe, 1994,
p.256.
LOPES, M.D. et al. Morte embrionária precoce em éguas: Aspectos clínicos e hormonais.
In: CONGRESSO BRASILEIRO DE REPRODUÇÃO ANIMAL, 10., 1993, Belo
Horizonte. Anais… Belo Horizonte: Colégio Brasileiro de Reprodução Animal, 1993. v. 2,
p. 231-380.
LOSINNO, L.; ALVARENGA, M.A. Critical factors on equine embryos transfer
programas in Brasil and Argentina. Acta Scientiae Veterinariae, v.34, p. 39-49, 2006.
30
McCUE, P. M. Superovulation. Veterinary Clinics of North America: Equine pratice,
Philadelphia, v. 12, n. 1, p. 1-11, 1996.
McKINNON, A.O. et al. Equine embryo transfer: A review. Compendium Continuing
Education Practice Veterinary, v.10, n.3, p. 343-355, 1988.
McKINNON, A.O.; SQUIRES, E.L.
Morphologic assessment of the equine embryo.
Journal America Veterinary Medical Association, v. 192, n. 3, p. 401-406, 1988.
MIES FILHO, A. Inseminação artificial. 6a ed. Porto Alegre: Sulina, 1987. 750p.
MOURA, J.C.A.; MERKT, H. A ultrasonografia na reprodução equina. Salvador: 2a ed.
Salvador: Editora Universitária Americana, 1996, 162p.
NUNES, D. B.; ZÚCCARI, C. E. S.N.; COSTA E SILVA, E. V. Fatores relacionados ao
sucesso da inseminação artificial de éguas com sêmen refrigerado. Revista Brasileira de
Reprodução Animal, v.30, n.1/2, p.42-56, 2006.
OGURI, N.; TSUTUMI, Y. Non-surgical recovery of equine eggs, and a attempt at nonsurgical egg transfer in horses. Journal of Reproduction and Fertility, v.31, n.2, p. 187195, 1972.
OGURI, N.; TSUTUMI, Y. Non-surgical egg transfer in mares. Journal of Reproduction
and Fertility, v.41, p. 313-320, 1974.
PALMER, E.; DRIANCOURT, M.A. Use of ultrasonic echography in equine gynecology.
Theriogenology, v.13, n.3, p.203-216, 1980.
PALMER, E. Induction of ovulation. In: McKINNON, A.O.; VOSS, J. L. Equine
Reproduction. Philadelphia: Lea & Febiger, 1993. Cap.38, p.344-347.
PALMER, E.; JOUSSET, B. Synchronization of oestrus in mare with a prostaglandin
analogue and hCG. Journal of Reproduction and Fertility, v. 23, p. 269-274, 1975.
PICKETT, B.W.; AMANN, R.P. Cryopreservation of semen. In: McKINNON, A.O.;
VOSS, J. L. Equine Reproduction. Philadelphia: Lea & Febiger, 1993. Cap.83, p.769789.
PIERSON, R.A. Folliculogenesis and ovulation. In: McKINNON, A.O.; VOSS, J. L.
Equine Reproduction. Philadelphia: Lea & Febiger, 1993. Cap.17, p.161-171.
PIMENTEL, C.A.; CARNEIRO, G.F. Biotécnicas aplicadas à reprodução de equinos. In:
31
GONÇALVES, P. B. D.; FIGUEIREDO, J. R.; FREITAS, V. J. F. Biotécnicas Aplicadas
à Reprodução Animal. 2a Ed. São Paulo: Roca, 2008. Cap. 8, p.145-159.
ROCHA, A.N. et al. Taxas de Prenhez e perda embrionária precoce em programa comercial
de transferência de embriões (TE) em éguas da raça Mangalarga Marchador. In:
CONGRESSO BRASILEIRO DE REPRODUÇÃO ANIMAL, 17., 2007, Belo Horizonte.
Anais… Belo Horizonte: Colégio Brasileiro de Reprodução Animal, 2007. p. 160.
PAPA, F.O. et al. Early embryonic death in mares: clinical and hormonal aspects.
Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science, v. 35, n.4, p. 170-173,
1998.
SHARP, D.C.; CLEAVER, B.D. Melatonin. In: McKINNON, A.O.; VOSS, J.L. Equine
Reproduction. Philadelphia: Lea & Febiger, 1993. Cap.11, p.100-108.
SERTICH, P.L. Transcervical embryo transfer in performance mares. Journal of the
American Veterinary Medical Association, v.195, n.7, p.940-944, 1989.
SQUIRES, E. L.; COOK, V. M.; VOSS, J. L. Collection and transfer of equine embryos.
Animal Reproduction and Laboratory Bulletin, n.1, p. 1-37, 1985.
SQUIRES, E. L. Embryo transfer. In: McKINNON, A.O.; VOSS, J.L. Equine
Reproduction. Philadelphia: Lea & Febiger, 1993a. Cap.41, p.357-367.
SQUIRES, E.L. et al. Embryo technologies in the horse. Theriogenology, v. 59, p. 151174, 2003.
SQUIRES, E.L. Puberty. In: McKINNON, A.O.; VOSS, J.L. Equine Reproduction.
Philadelphia: Lea & Febiger, 1993b. Cap.13, p.114-120.
SQUIRES, E.L.; IULIANO, M. F.; SHIDELER, R. K. Factors affecting the success of
surgical and nonsurgical equine embryo transfer. Theriogenology, v.17, p.35-41, 1982.
SQUIRES, E. L.; McCUE, P.M.; VANDERWALL, D. The current status of equine embryo
transfer. Theriogenology, v. 51, p. 91-104, 1999.
SOUZA, F.A.A.; TOLEDO, L.R.A.; LIMA, C.G. Ocorrência de perda embrionária precoce
em éguas da raça Mangalarga acasalada por monta natural ou submetida à inseminação
artificial. ARS Veterinária, v. 17, p. 183-189, 2001.
32
SULLIVAN, J. J.; PARKER, W. G. LARSON, L. L. Duration of estrus and ovulation time
in nonlactanting mares given human chorionic gonadotropin during three successive
estrous period. Journal of American Veterinary and Medical Association, v. 162, p.
895-898, 1973.
TAVEIROS, A.W. Transferência de embriões equinos da raça Mangalarga Machador.
2000. 40 f. Dissertação (Mestrado em Ciência Veterinária) - Programa de Pós-graduação
em Ciência Veterinária, Universidade Federal Rural de Pernambuco.
TAVEIROS, A.W. et al. Perda de concepto em programa de inseminação artificial e de
transferência de embriões em equinos da raça Mangalarga Marchador. Medicina
Veterinária, v. 2, n.2, p.28-33, 2008.
TAVEIROS, A.W. et al. Ultrasonographic monitoring of 103 recipient mares of different
reproductive status during the first 30 days after embryo transfers. Veterinary Record, v.
153, p.558-560, 2003.
VILELA, D.; ARAÚJO, P. M. M. Contribuições das câmaras setoriais e temáticas à
formulações de políticas públicas e privadas para o agronegócio. Brasília:
MAPA/SE/CGAC, 2006. 496p.
WEISS, R. R.; VIANNA, B. C.; MURADÁS, P. R. Inseminação artificial em éguas com
sêmen in natura e diluído. Archives of Veterinary Science, v. 8, n.1, p. 19-22, 2003.
WILSON, J.M. et al. Successful non-surgical transfer of equine embryos to post-partum
lactating mares. Theriogenology, v. 27, n. 1, p. 295, 1987.
WOLF, A.; GABALDI, S. H. Acompanhamento ultra-sonográfico da gestação em grandes
animais. Ciências Agrárias e da Saúde, v. 2, n.2, p. 77-83, 2002.
WOODS, G.L. et al. Early pregnancy loss in brood mares. Journal of Reproduction and
Fertility, suppl. 35, p. 455-459, 1987.
33
CAPÍTULO I
AVALIAÇÃO DE ALGUNS FATORES QUE INFLUENCIAM A PERDA DO
CONCEPTO EM ÉGUAS DA RAÇA MANGALARGA MARCHADOR
M.C. Rabelo, A.W. Taveiros, P.R.M. Melo, R.M. Chaves, E.R. Santos Junior, C.R. Aguiar
Filho, F.Q.G. Bezerra, J.M. Almeida Irmão, L.M. Freitas Neto, P.F. Lima, M.A.L. Oliveira
34
Avaliação de alguns fatores que influenciam a perda do concepto em éguas da raça
Mangalarga Marchador
(Evaluation of some factors that influence the conceptus loss in Mangalarga Marchador mares)
MC Rabelo1; AW Taveiros2, PRM Melo3; RM Chaves1; ER Santos Junior1; CR
Aguiar Filho1; FQG Bezerra1; JM Almeida Irmão1; LM Freitas Neto; PF Lima1; MAL
Oliveira1
1
Laboratório de Biotécnicas Reprodutivas do Departamento de Medicina Veterinária da Universidade Federal
Rural de Pernambuco. Av. Dom Manoel de Medeiros, s/n, Dois Irmãos. CEP 52171-900 Recife-PE/Brasil.
2
Regimento de Polícia Montada Dias Cardoso. Av. General San Martin, s/n, Bongi. CEP 50.761 000 Recife–
PE/Brasil.
3
Médica Veterinária Autônoma.
Resumo
Objetivou-se com este estudo, avaliar alguns fatores que influenciam a perda do concepto em
éguas da raça Mangalarga Marchador inseminadas artificialmente, considerando a faixa
etária, o status reprodutivo e o período gestacional. Foram monitoradas 320 gestações entre os
anos de 2003 e 2006 compreendendo fêmeas nulíparas (n = 52), pluríparas não lactantes (n =
112) e pluríparas lactantes (n = 156). Os animais possuíam idade entre 4 e 16 anos. O
monitoramento da gestação por ultra-sonografia foi realizado no 15o dia pós-ovulação,
repetindo-se os exames nos 20o, 30o e 45o dias de prenhez. O índice total de perda do
concepto foi de 9,06% (29/320). Com relação à faixa etária, as perdas de 8,06% (5/62), 6,58%
(10/152) e 13,21% (14/106) para fêmeas com menos de 5 anos, de 5 a 10 anos e de 11 a 16
anos, respectivamente, não evidenciaram diferenças significativas (P > 0,05). Quanto ao
status reprodutivo, perdas de 5,77% (3/52), 9,82% (11/112) e 9,61% (15/156) para fêmeas
nulíparas, pluríparas não lactantes e pluríparas lactantes, respectivamente, também não
mostraram diferenças significativas (P > 0,05). No que se refere ao período gestacional, o
índice de perda do concepto foi mais significativo (P < 0,05) no período de 15 a 20 dias de
gestação. Não foi evidenciada diferença significativa (P > 0,05) entre os índices de perdas do
concepto das éguas inseminadas no cio do potro 8,97% (7/78) e daqueles inseminadas no cio
subseqüente 10,26% (8/78). Com base nos dados deste estudo foi possível concluir que o
status reprodutivo e a faixa etária não influenciam as taxas de perdas do concepto, porém, no
período entre a 2ª e 3ª semana de gestação, as éguas estão mais susceptíveis a essas perdas.
Palavras-chave: equinos, período gestacional, status reprodutivo, faixa etária.
35
Abstract
The aim of this study was to evaluate some factors that influence the conceptus loss in
Mangalarga Marchador mares artificially inseminated, considering the group age, the
reproductive status and the gestational period. Between the years 2003 and 2006 were
monitored the pregnancies of 320 mares, including nulliparous female (n = 52), not lactating
pluriparous (n = 112) and pluriparous in lactation (n = 156) aged between 4 and 16 years. The
monitoring of pregnancy by ultrasound was conducted by the 15th day after ovulation,
repeating the tests on the 20th, 30th and 45th day of pregnancy. The total of conceptus loss was
9.06% (29/320). Concerning the age group, losses of 8.06% (5/62), 6.58% (10/152) and
13.21% (14/106) for females under the age of 5, 5 to 10 years and 11 to 16 years respectively
showed no significant differences (P > 0.05). As for reproductive status, loss of 5.77% (3/52),
9.82% (11/112) and 9.61% (15/156) for females nulliparous, pluriparous non lactants and
pluriparous in lactation, respectively, also showed no significant differences (P > 0.05).
Considering the gestational period, the concept loss was more significant (P < 0.05) in the
period from 15 to 20 days of gestation. Were not highlighted significant differences (P > 0.05)
between the pregnancy rates loss of the mares inseminated in the foal heat 8.97% (7/78) and
those inseminated in subsequent estrus 10.25% (8/78). Based on data from this study were
unable to conclude that the reproductive status and age group did not influence the rates of the
concept loss, but, in the period between 2nd and 3rd weeks of gestation, the mares are more
susceptible to these losses.
Key words: equines, gestational period, reproductive status, age group.
Introdução
A perda do concepto é um problema de relevante importância na criação de equinos,
prejudicando a produção de potros, reduzindo a receita com significativos prejuízos
econômicos para o criador (SOUZA et al., 2001). A introdução da ultra-sonografia no estudo
dos problemas reprodutivos possibilitou uma melhor compreensão sobre a perda do concepto
equino por permitir aos 10 ou 11 dias pós-ovulação, observar a evolução e subseqüente perda
da gestação (PALMER e DRIANCOURT, 1980; TAVEIROS, 2000), o que não é possível
através da palpação transretal.
36
Trabalhando com éguas da raça Campolina, Ferreira et al. (1999) verificaram um
índice de perda de concepto de 6,8% no período de 15 a 45 dias pós-cobertura. Taxa de 10,8%
de perda do concepto no período de 14 a 60 dias em éguas Puro Sangue Inglês pósinseminação artificial foram relatadas por Ferraz e Vicente (2006). Já em éguas Quarto de
Milha, no período de 11 a 50 dias pós-inseminação artificial, foi verificado um índice total de
perda de 8,53%, dos quais o maior índice 5,39% ocorreu no período de 11 a 20 dias, sendo o
período entre a 2ª e 3ª semana considerado o mais susceptível à perda precoce do concepto
(DUARTE et al., 2002).
Duarte et al. (2002) relataram não existir diferenças entre os índices de prenhez em
função das distintas faixas etárias. Porém, Chevalier-Clément (1989) considera que a perda do
concepto aumenta com a idade da égua. Segundo Woods et al. (1987), há uma elevação direta
e contínua da perda do concepto em éguas acima de 13 anos.
Registros encontrados na literatura indicam uma significativa variação dos índices de
perda do concepto em função do status reprodutivo. Em éguas paridas, solteiras e potras de
diferentes raças foram observadas perdas de 14,0%, 14,0% e 12,0%, respectivamente
(WOODS et al., 1987). Perdas de 4,5%, 5,4% e 6,5% respectivamente para éguas nulíparas,
pluríparas não lactantes e pluríparas lactantes de diversas raças foram encontradas por
Chevalier-Clément (1989).
Estudos reportam que os índices de perdas do concepto não diferem quando as éguas
são inseminadas no cio do potro ou no cio subseqüente (WOODS et al., 1987; DUARTE et
al., 2002).
Considerando que a perda do concepto em equinos é um problema que causa
significativos prejuízos econômicos para o criador e que os dados relativos a esse tema
reportadas na literatura são conflitantes, objetivou-se com este estudo avaliar alguns fatores
37
que influenciam a perda do concepto em éguas da raça Mangalarga Marchador, inseminadas
artificialmente, considerando, a faixa etária, o status reprodutivo e o período de gestação.
Material e Métodos
O experimento foi realizado entre os anos de 2003 e 2006, na Fazenda Pedra Verde,
localizada no Município de Limoeiro, a 07º52’29” S de latitude e a 35º27’01” W de
longitude, microrregião do Médio Capibaribe, Agreste do Estado de Pernambuco,
caracterizada por um clima quente e úmido com temperatura média em torno de 24°C e
precipitação pluviométrica média anual de 1.248 mm3.
Foram monitoradas as gestações de 320 éguas da raça Mangalarga Marchador,
compreendendo fêmeas nulíparas (n = 52), pluríparas não lactantes (n = 112) e pluríparas
lactantes (n = 156), com idade variando entre 4 e 16 anos, sendo, fêmeas com menos de 5
anos (n = 62), de 5 até 10 anos (n = 152) e 11 a 16 anos (n = 106), mantidas em piquetes de
capim Pangola (Digitaria decumbens) e suplementadas com 4 kg/dia de ração comercial
(Corcelina-Purina®/São Lourenço da Mata-PE), além de água e sal mineral (CoequisalplusTortuga®/São Paulo-SP) ad libitum.
Todas as éguas, com condição corporal entre 5 e 7 na escala de 1-9, conforme
sugerido por Henneke et al. (1983), foram submetidas a exame clínico-ginecológico e
monitoradas por palpação transretal e ultra-sonografia, sendo utilizadas neste estudo, apenas
aquelas que, não evidenciavam presença de líquidos no útero e/ou alterações endometriais que
comprometesse a fertilidade. A partir da detecção do estro com auxílio de rufião, as éguas
foram inseminadas em dias alternados até a ovulação com sêmen fresco de reprodutor de
comprovada fertilidade na dose de 500 x 106 espermatozóides viáveis.
Classificou-se o cio de acordo com sua ocorrência, considerando-o cio do potro,
quando este se iniciou até 14 dias pós-parto e cio subseqüente aquele manifestado após o cio
do potro.
38
O diagnóstico de gestação foi realizado no 15o dia após a ovulação, utilizando-se um
aparelho de ultra-som (ALOKA SSD-500 Tóquio/Japão), com transdutor linear de 5MHz. As
fêmeas foram reexaminadas para comprovação do diagnóstico no 20o, 30o e 45o dia de
prenhez.
As proporções de perdas relativas ao período de gestação, status reprodutivo e faixa
etária foram analisadas pelo teste do Qui-quadrado (χ2) em nível de 5% de probabilidade.
Resultados
O índice total de perdas do concepto encontrado no período de 15 a 45 dias após
inseminação artificial foi de 9,06% (29/320). No que se refere à faixa etária, as perdas foram
8,06% (5/62), 6,58% (10/152) e 13,21% (14/106) para fêmeas com menos de 5 anos, de 5 a
10 anos e de 11 a 16 anos, respectivamente (Tabela 1). Não houve diferença significativa (P >
0,05) em relação às diferentes faixas etárias estudadas.
Tabela 1 – Perda do concepto em éguas da raça Mangalarga Machador em função da faixa etária no
período de 15 a 45 dias de gestação.
Faixa etária
(Anos)
Prenhez
(N)
<5
Perda do concepto
(N)
(%)
62
5
8,06
5 a 10
152
10
6,58
11 a 16
106
14
13,21
320
29
9,06
Total
2
Diferenças não significativas pelo teste do χ (P > 0,05).
Os índices de perda do concepto concernentes aos status reprodutivos foram 5,77%
(3/52), 9,82% (11/112) e 9,61% (15/156) para fêmeas nulíparas; pluríparas não lactantes e
pluríparas lactantes, respectivamente (Tabela 2). Esses resultados não evidenciaram
diferenças significativas (P > 0,05) entre os status reprodutivos.
39
Tabela 2 – Perda do concepto em éguas da raça Mangalarga Machador conforme o status reprodutivo
no período de 15 a 45 dias de gestação.
Prenhez
(N)
Status reprodutivo
Perda do concepto
(N)
(%)
Nulíparas
52
3
5,77
Pluríparas não lactantes
112
11
9,82
Pluríparas lactantes
156
15
9,61
320
29
9,06
Total
2
Diferenças não significativas pelo teste do χ (P > 0,05).
Os índices de perda do concepto relativos aos diferentes períodos de gestação de
6,25% (20/320), 1,67% (5/300) e 1,35% (4/295) foram verificados nos períodos gestacionais
de 15 a 20, de 21 a 30 e de 31 a 45 dias, respectivamente (Tabela 3). As perdas ocorridas no
período de 15 a 20 dias apresentaram diferenças significativas (P < 0,05) comparado aos
demais períodos estudados.
Tabela 3 – Perda do concepto em éguas da raça Mangalarga Machador de acordo com os diferentes
períodos de gestação.
Período da gestação
(Dias)
Prenhez
(N)
15 a 20
Perda do concepto
(N)
(%)
320
20
6,25a
21 a 30
300
5
1,67b
31 a 45
295
4
1,35b
Letras diferentes na mesma coluna representam diferenças significativas pelo teste do χ2 (P < 0,05).
Os índices de perda do concepto relativos às fêmeas inseminadas no cio do potro e no
cio subseqüente foram 8,97% (7/78) e 10,26% (8/78), respectivamente (Tabela 4). Esses
resultados indicam não haver diferenças significativas (P > 0,05) entre os índices de perdas
em relação à classificação do cio no momento da inseminação.
40
Tabela 4 – Índices de perda do concepto em éguas da raça Mangalarga Machador de acordo com a
classificação do cio.
Classificação do cio
Prenhez
(N)
Perda do concepto
(N)
(%)
Cio do Potro
78
7
8,97
Cio subseqüente
78
8
10,26
Total
156
15
9,61
Diferenças não significativas pelo teste do χ2 (P > 0,05).
Discussão
Os índices de perda do concepto não diferiram estatisticamente (P > 0,05) em função
das diferentes faixas etárias. Contudo, em termos de valor absoluto as fêmeas com idade
acima de 11 anos apresentaram taxas de fertilidade menores quando comparadas às de faixa
etária inferiores. Estes achados corroboram com os relatos de Duarte et al. (2002) que apesar
de não terem observado diferenças estatísticas das perdas do concepto em função das distintas
faixas etárias, evidenciaram uma tendência das éguas acima de 12 anos terem fertilidade mais
baixa do que as de menor faixa etária, com as observações de Woods et al. (1987) que
constataram uma elevação direta e contínua de perda do concepto em éguas acima de 13 anos
e com os achados de Chevalier-Clément (1989), ao afirmar que a perda do concepto aumenta
com a idade da égua.
Estudos em humanos indicam que fatores intrínsecos, como anomalias cromossômicas
parecem aumentar com o avanço da idade (BOUÉ e BOUÉ, 1976). Conforme Woods et al.
(1987) e Ball (1993) o mesmo deve ocorrer em eqüinos; quanto mais velha a égua, maior a
possibilidade desses fatores causarem perda do concepto. Possivelmente, esse fato, também
pode ter ocorrido neste estudo.
Os índices de perda do concepto não diferiram estatisticamente (P > 0,05) entre
fêmeas nulíparas, pluríparas não lactantes e pluríparas lactantes. Observações semelhantes às
41
relatadas por Woods et al. (1987) em éguas de diferentes raças, por Chevalier-Clément (1989)
em fêmeas Puro Sangue Inglês, por Souza et al. (2001) em éguas da raça Mangalarga e por
Duarte et al. (2002) éguas Quarto de Milha, que também não constataram as diferenças
significativas entre índices de perdas em função do status reprodutivo.
Em fêmeas nulíparas, o índice de perda do concepto (5,80%) foi inferior aos 14,00% e
12,90% encontrados, respectivamente, por Woods et al. (1987) e Souza et al. (2001) e
superior aos 4,50% e 5,17% relatados por Chevalier-Clément (1989) e Duarte et al.(2002),
respectivamente.
No grupo de éguas pluríparas não lactantes, o índice de perda do concepto de 9,82%,
foi inferior aos 14,00% observados por Woods et al. (1987) e aos 11,10% citados por Souza et
al. (2001) sendo superior aos 5,40% e 5,56% relatados, respectivamente, por ChevalierClément (1989) e por Duarte et al. (2002). O índice de perda de prenhez em éguas pluríparas
lactantes (9,61%) foi inferior aos 14,00% e 14,30% observados por Woods et al. (1987) e por
Souza et al. (2001), respectivamente, e superior aos 6,50% e 9,21% relatados,
respectivamente, por Chevalier-Clément (1989) e Duarte et al. (2002).
A grande variabilidade dos percentuais de perda de prenhez verificados na literatura
consultada pode ser atribuída à heterogeneidade dos animais investigados, à possíveis
problemas na saúde do trato reprodutivo (PAPA et al., 1998), ou ainda, a distintos manejos e
assistência técnica veterinária.
Analisando as perdas do concepto em função dos distintos períodos gestacionais
verificou-se que as perdas ocorridas no período entre 15 e 20 dias, apresentaram índices
significativamente superiores (P < 0,05) as ocorridas entre os períodos de 21 a 30 dias e entre
31 e 45 dias.
As perdas no início do período gestacional, provavelmente estão relacionadas a uma
inadequação do ambiente uterino de algumas fêmeas, no momento da chegada do embrião ao
42
útero entre o 5o e o 6o dia (GINTHER et al., 1985), ou ainda por falta de mobilidade do
mesmo entre o 10o e 16o dia, com conseqüente não reconhecimento materno da prenhez
(GINTHER et al., 1985; GAIVÃO e STOUT, 2007). Esses resultados, também podem ser
explicados, ainda que de modo especulativo por uma possível ocorrência de anomalias
cromossômicas e defeitos morfológicos do embrião (BOUÉ e BOUÉ, 1976; BLUE, 1981).
O índice total de perdas observado para o período de 15 a 45 dias de gestação de
9,06% (29/320) foi inferior aos 12,52% observados por Woods et al. (1987) em éguas de
distintas raças no período entre 14 e 56 dias, aos 13,28% verificados por Lopes et al. (1993)
em éguas Quarto de Milha, Puro Sangue Inglês e Mangalarga Paulista no período de 10 a 45
dias e aos 10,80% observados por Ferraz e Vicente (2006) em éguas Puro Sangue Inglês no
período de 14 a 60 dias. Porém, foi superior aos 6,80% obtidos por Ferreira et al. (1999) em
éguas da raça Campolina no período de 15 a 45 dias e aos 8,53% observados por Duarte et al.
(2002) em fêmeas Quarto de Milha no período de 11 a 50 dias de gestação. Os achados desta
pesquisa corroboram com as observações dos autores acima referidos, os quais relatam que os
maiores índices de perda do concepto ocorrem nas primeiras semanas de gestação.
Analisando-se os índices de perdas do concepto em função da classificação do cio no
momento da inseminação artificial, os resultados não evidenciaram diferenças estatísticas (P >
0,05) entre as éguas inseminadas no cio do potro e no cio subseqüente, concordando com as
observações de Woods et al. (1987) e Duarte et al. (2002). Nas éguas inseminadas no cio do
potro, foi observado um índice de perda de (8,97%) que é inferior aos 11,00% citados por
Woods et al. (1987) e semelhante aos 8,91% referidos por Duarte et al. (2002).
No que se refere ao cio subseqüente, o índice de perda observado de 10,26% foi
inferior aos 12,00% relatados por Woods et al. (1987) e próximo aos 9,90% referido por
Duarte et al. (2002).
43
De acordo com Ball, (1993) e Grunert et al. (2005), anormalidades no ambiente
uterino como, falhas na involução do útero e endometrites persistentes, parecem ser os fatores
que mais contribuem para morte do concepto em éguas inseminadas no cio do potro. Os dados
obtidos indicam que esses fatores tiveram pouca ou nenhuma influência nos resultados deste
estudo, ratificando ainda, as boas condições de fertilidade em que se encontravam as éguas
paridas utilizadas neste trabalho.
Conclusões
Com base nos dados deste estudo foi possível concluir que o status reprodutivo e a
faixa etária não influenciam as taxas de perdas do concepto, porém, no período entre a 2ª e 3ª
semana de gestação, as éguas estão mais susceptíveis a essas perdas.
Referências
BALL, B.A. Embryonic death in mares. In: McKINNON, A.O.; VOSS, J.L. Equine
Reproduction. Philadelphia: Lea & Febiger, 1993. Cap. 61, p.517-531.
BLUE, M.G. A cytogenetical study of prenatal loss in the mare. Theriogenology, v.15, n.3,
p.295-309, 1981.
BOUÉ, J.G.; BOUÉ, A. Chromosomal anomalies in early spontaneous abortion: their
consequences on early embryogenesis and in vitro growth of embryonic cells. Current
Topics in Pathology, v.62, p. 193-208, 1976.
CHEVALIER-CLÉMENT, F. Pregnancy loss in the mare. Animal Reproduction Science,
v. 20, p. 231-244, 1989.
44
DUARTE, M. B. et al. Incidência de perda de prenhez até o 50º dia em éguas Quarto de
Milha. Ciência Rural, v. 32, n. 4, p. 643-647, 2002.
FERRAZ, L.E.S.; VICENTE, W.R.R. Influencia do momento da cobrição, em relação à
ovulação, na fertilidade e na ocorrência de morte embrionária precoce em equinos.
Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v.58, n.4, p.1-6, 2006.
FERREIRA, J.B.P. et al. Incidência e caracterização ultra-sonográfica da morte
embrionária em éguas da raça Campolina. Revista Brasileira de Reprodução Animal,
v.23, n.3, p.202-203, 1999.
GAIVÃO, M.M.F.; STOUT, T.A.E. Maternal recognition of pregnancy in the mare – a
mini review. Revista Lusófona Ciência e Medicina Veterinária, v.1, p. 5-9, 2007.
GINTHER, O.J. et al. Embryonic loss in mares: Pregnancy rate, length of interovulatory
intervals, and progesterone concentrations associated with loss during days 11 to 15.
Theriogenology, v.24, n.4, p.203-216, 1985.
GRUNERT, E. et al. Distúrbios da reprodução: alterações conseqüentes às interações entre
o útero e o concepto. In:___. Patologia e clínica da reprodução dos animais mamíferos
domésticos: ginecologia. São Paulo: Varela, 2005. Cap.10, p. 465-488.
HENNEKE, D.R. et al. Relationship between condition score, physical measurements and
body fat percentage in mares. Equine Veterinary Journal, v. 15, n.4, p. 371-372, 1983.
45
LOPES, M.D. et al. Morte embrionária precoce em éguas: Aspectos clínicos e hormonais.
In: CONGRESSO BRASILEIRO DE REPRODUÇÃO ANIMAL, 10., 1993, Belo
Horizonte. Anais… Belo Horizonte: Colégio Brasileiro de Reprodução Animal, 1993. v.2,
p. 231-380.
PALMER, E.; DRIANCOURT, M.A. Use of ultrasonic echography in equine gynecology.
Theriogenology, v.13, n.3, p.203-216, 1980.
PAPA, F.O. et al. Early embryonic death in mares: clinical and hormonal aspects.
Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science, v. 35, n.4, p. 170-173,
1998.
SOUZA, F. A.A. et al. Ocorrência de perda embrionária precoce em éguas da raça
Mangalarga acasalada por monta natural ou submetida à inseminação artificial. ARS
Veterinária, v. 17, p. 183-189, 2001.
TAVEIROS, A.W. Transferência de embriões equinos da raça Mangalarga
Marchador. 2000. 40 f. Dissertação (Mestrado em Ciência Veterinária) - Programa de
Pós-graduação em Ciência Veterinária, Universidade Federal Rural de Pernambuco.
WOODS, G.L. et al. Early pregnancy loss in brood mares. Journal of Reproduction and
Fertility, suppl. 35, p. 455-459, 1987.
46
CAPÍTULO II
TAXAS DE PRENHEZ E DE PERDA EMBRIONÁRIA EM ÉGUAS DA RAÇA
MANGALARGA MACHADOR EM DIFERENTES STATUS REPRODUTIVOS
UTILIZADAS COMO RECEPTORAS EM PROGRAMAS DE TRANSFERÊNCIA DE
EMBRIÕES
M.C. Rabelo, A.W. Taveiros, P.R.M. Melo, R.M .Chaves, E.R. Santos Junior, C.R. Aguiar
Filho, F.Q.G. Bezerra, J.M. Almeida Irmão, L.M. Freitas Neto, P.F. Lima, M.A.L. Oliveira
47
Taxas de prenhez e de perda embrionária em éguas da raça Mangalarga Machador em
diferentes status reprodutivos utilizadas como receptoras em programas de
transferência de embriões
(Pregnancy rates and embryonic loss in Mangalarga Machador mares of different
reproductive status used as recipients in programs of embryo transfer)
MC Rabelo1; AW Taveiros2, PRM Melo3; RM Chaves1; ER Santos Junior1; CR Aguiar
Filho1; FQG Bezerra1; JM Almeida Irmão1; LM Freitas Neto1; PF Lima1; MAL Oliveira1
1
Laboratório de Biotécnicas Reprodutivas do Departamento de Medicina Veterinária da Universidade Federal
Rural de Pernambuco. Av. Dom Manoel de Medeiros, s/n, Dois Irmãos. CEP 52171-900 Recife-PE/Brasil.
2
Regimento de Polícia Montada Dias Cardoso. Av. General San Martin, s/n, Bongi. CEP 50.761 000 Recife–
PE/Brasil.
3
Médica Veterinária Autônoma.
Resumo
Objetivou-se com este estudo avaliar as taxas de prenhez e perda embrionária em éguas da
raça Mangalarga Marchador em diferentes status reprodutivos utilizadas como receptoras em
programas de transferência de embriões (TE). Entre os anos de 2004 e 2005, foram utilizadas
um total de 71 fêmeas, sendo, 10 éguas pluríparas como doadoras de embriões e como
receptoras, 21 fêmeas nulíparas, 20 pluríparas lactantes e 20 pluríparas não lactantes. As
colheitas embrionárias foram realizadas no 8o dia após a ovulação das doadoras e os embriões
imediatamente transferidos para as receptoras. Os diagnósticos de gestação por ultrasonografia foram realizados no 7o dia após as TE, repetindo os exames nos dias 20, 25 e 30 da
gestação. O total de prenhez diagnosticada no 7o dia após a TE e de perda embrionária no 30o
dia de gestação foram 67,21% (41/61) e 39,02% (16/41), respectivamente. Com relação ao
status reprodutivo, as taxas de prenhez e de perda embrionária, não evidenciaram diferenças
significativas (P > 0,05). Quanto à faixa etária, as fêmeas com mais de 11 anos exibiram taxa
de prenhez menor (P < 0,05) do que às de faixas entre 6 e 8 anos e entre 9 e 11 anos e
apresentaram perda embrionária significativamente maior (P < 0,05) do que as de faixa
inferior. Com relação aos períodos gestacionais em que ocorreram as perdas embrionárias,
não foram constatadas diferenças significativas (P > 0,05). Os dados obtidos neste estudo
permitem concluir que éguas da raça Mangalarga Marchador independente do status
reprodutivo podem ser utilizadas com êxito como receptoras em programas de TE, porém, não
é recomendável, que fêmeas com idade acima de 11 anos sejam utilizadas para essa função.
Palavras-chave: Equinos, transferência de embriões, faixa etária, gestação.
48
Abstract
The aim of this study was evaluate the pregnancy rates and embryonic losses in Mangalarga
Marchador mares of different reproductive status used as recipients in programs of embryo
transfer (ET). Between the years 2004 and 2005 have been used pluriparous 10 mares as
donors of embryos and recipients, 21 nulliparous females, 20 pluriparous in lactation and 20
not lactating pluriparous. On The 8th day after ovulation were performed the embryos
recovered of the donors and immediate transfer to the recipients. The diagnosis of pregnancy
by ultrasound was conducted by the 7th day after the ET, repeating the tests on days 20, 25
and 30 of pregnancy. The total pregnancy diagnosed in the 7th day after ET and embryo loss
in the 30th day of gestation was 67.21% (41/61) and 39.02% (16/41), respectively. With
regard to the reproductive status, the rates of pregnancy and embryonic loss, did not show
significant differences (P > 0.05). As for the age group, females with more than 11 years
showed lower pregnancy rate (P < 0.05) than on the track between 6 and 8 years and between
9 and 11 years old and embryo loss had significantly higher (P < 0.05) than those in the lower
range. With regard to gestational periods in which the embryonic losses occurred were not
found significant differences (P > 0.05). Data obtained in this study suggests that Mangalarga
Marchador mares regardless of reproductive status can be used successfully as recipients in
programs for ET, but, is not recommended that females aged over 11 years are used for this
function.
Key words: equines, embryo transfer, age group, gestation.
Introdução
A utilização de TE em equinos tem aumentado constantemente nas duas últimas
décadas principalmente no Brasil, onde o benefício dessa técnica tem sido reconhecido e
aceito pela maioria das associações de criadores de equinos, permitindo assim o seu uso
(LOSINNO e ALVARENGA, 2006). Entretanto, a perda embrionária precoce tem-se
mostrado como o maior fator de sub-fertilidade e de redução da eficiência reprodutiva em
éguas, ocasionando grandes perdas econômicas em programas de TE (BALL, 1993; ROCHA
et al., 2007).
Registros encontrados na literatura indicam que perdas embrionárias precoce ocorrem
em 5 a 45% das gestações (BALL, 1993). Em um programa de TE as taxas de prenhez e de
49
perda embrionária são influenciadas por uma variabilidade de fatores como o método de
transferência (SQUIRES et al., 1999; JASKO, 2002), o técnico (CARNEVALE et al., 2000;
LOSINNO e ALVARENGA, 2006) , o tamanho, a idade e a morfologia do embrião
(CARNEVALE et al., 2000; SQUIRES et al., 2003), a nutrição (SQUIRES et al., 1999;
LOSINNO e ALVARENGA, 2006), o clima (BALL, 1993), a sincronização entre doadoras e
receptoras (JACOB et al., 2002; LOSINNO e ALVARENGA, 2006), os procedimentos de
cultivo e armazenagem de embriões (SQUIRES et al., 2003), a idade e história reprodutiva de
doadoras e receptoras de embriões (SQUIRES et al., 2003; LOSINNO e ALVARENGA,
2006), o método e intervalo de detecção da prenhez (McKINNON et al., 1988) e o grupo de
animais em estudo (CARNEVALE et al., 2000; TAVEIROS et al., 2003; ALONSO et al.,
2005).
A utilização da ultra-sonografia nos diferentes eventos reprodutivos tem contribuído
para aumentar a eficiência da TE em equinos, tornando possível a visualização de folículos
ovarianos, da vesícula embrionária, do feto (PALMER e DRIANCOURT, 1980; SQUIRES et
al., 1988; TAVEIROS et al., 2003) e identificação do sexo fetal (WOLF e GABALDI, 2002),
permitindo ainda, acompanhar a evolução da gestação, perda do concepto e eventuais
problemas reprodutivos (FERREIRA et al., 1999; WOLF e GABALDI, 2002; TAVEIROS et
al., 2003).
Considerando que a perda embrionária é um problema que causa a diminuição da
eficiência reprodutiva em equinos e o limitado número de relatos sobre o uso de éguas
nulíparas, pluríparas lactantes e pluríparas não lactantes como receptoras em programas de
TE, objetivou-se com este estudo avaliar as taxas de prenhez e perda embrionária em éguas da
raça Mangalarga Marchador em diferentes status reprodutivos utilizadas como receptoras em
programas de TE.
50
Material e Métodos
O experimento foi realizado entre janeiro de 2004 e janeiro de 2005, na Fazenda Pedra
Verde, localizada no Município de Limoeiro-PE, a 07º52’29” S de latitude e 35º27’01” W de
longitude, região Agreste Setentrional do Estado de Pernambuco, com temperatura média em
torno de 24°C e precipitação pluviométrica média anual de 1.248 mm3.
Foram utilizadas como doadoras 10 éguas pluríparas da raça Mangalarga Marchador
com idade variando de 05 a 15 anos e como receptoras 61 éguas da mesma raça pertencentes a
diferentes propriedades, sendo, 21 nulíparas, 20 pluríparas lactantes e 20 pluríparas não
lactantes com idade variando entre 3 e 12 anos.
As éguas doadoras de embrião foram submetidas a um manejo intensivo e racionadas
a base de Tifton (Cynodon spp.), capim Pangola (Digitaria decumbes), Alfafa (Medicago
sativa) e suplementadas com 4 kg/dia de ração comercial (Corcelina - Purina®/São Lourenço
da Mata-PE), além de água e sal mineral (Coequisalplus – Tortuga®/São Paulo-SP) ad
libitum.
As éguas receptoras de embrião foram mantidas em piquetes formados por capim
Pangola (Digitaria decumbens), sendo suplementadas com 4 kg/dia de ração comercial
(Corcelina - Purina®/São Lourenço da Mata-PE), além de água e sal mineral (Coequisalplus –
Tortuga®/São Paulo-SP) ad libitum.
Todas as fêmeas, com condição corporal entre 5 e 7 na escala de 1-9, conforme
sugerido por Henneke et al. (1983), foram submetidas ao exame clínico-ginecológico e a
palpação retal em dias alternados com auxílio de ultra-som (ALOKA SSD-500 Tóquio/Japão)
com transdutor linear de 5 MHz para identificação de alterações endometriais, estro e controle
da ovulação. Sendo utilizadas neste estudo, apenas aquelas que, não evidenciavam presença
de líquidos no útero e/ou alterações endometriais que comprometesse a fertilidade.
51
As doadoras e receptoras tiveram o ciclo estral sincronizado com aplicação por via
intramuscular de 5 mg de PGF2α (Lutalyse - Pfizer®/Paulínia-SP), buscando um intervalo de 1 até +3 dias da ovulação da receptora e em relação a ovulação da doadora como sugerido por
Squires, (1993).
A partir da detecção do estro com auxílio de rufião, as doadoras foram inseminadas
em dias alternados até a ovulação, com sêmen fresco de garanhão de fertilidade comprovada,
na dose inseminante de 500 x 106 espermatozóides viáveis.
Os embriões foram colhidos no 8o dia após ovulação, pelo método transcervical
aberto, introduzindo-se a sonda (BIVONA – St. Paul/Minnesota) pela cérvix até o corpo do
útero, o balão foi inflado e fixado nas paredes desse órgão. As lavagens uterinas foram
implementadas, utilizando-se 3 litros de solução Ringer-Lactato dividida em 3 frações de
acordo com Fleury et al. (2001).
Após o término da última lavagem, o balão foi esvaziado e a sonda retirada. O
conteúdo do filtro foi depositado em placas de Petri para o rastreamento das estruturas em
lupa estereoscópica, conforme Squires (1993). Imediatamente após a colheita, as doadoras
receberam uma dose de PGF2α (Lutalyse - Pfizer®/Paulínia-SP), via intramuscular, para
indução da luteólise.
Os embriões encontrados foram transferidos para uma placa de Petri contendo meio de
cultura (TQC – Nutricell, Nutrientes LTDA®/Campinas-SP). Sob lupa estereoscópica foram
avaliados quanto ao estádio de desenvolvimento e qualidade morfológica segundo Mckinnon
e Squires (1988). Somente aqueles classificados de grau I a III foram transferidos para as
receptoras, num período de até duas horas conforme sugerido por Mckinnon et al. (1988).
Os embriões (n = 61) foram transferidos para receptoras nulíparas (n = 21), pluríparas
lactantes (n = 20) e pluríparas não lactantes (n = 20).
52
O diagnóstico de gestação foi realizado no 7o dia após a transferência do embrião por
palpação retal e ultra-sonografia, sendo todas as fêmeas monitoradas para confirmação do
diagnóstico nos dias 20, 25 e 30 da gestação.
As taxas de prenhez e de perda embrionária relativas ao status reprodutivo, a faixa
etária e ao período gestacional foram analisadas pelo teste do Qui-quadrado (χ2) em nível de
5% de probabilidade.
Resultados e Discussão
Das 61 transferências realizadas 41(67,21%) resultaram em prenhez diagnosticadas no
7o dia após a TE (Tabela 1), resultado inferior aos 70,3% obtidos por Jacob et al. (2002) no
14o dia de gestação, aos 82,5% observados por Jasko, (2002) no 8o após a TE e aos 73,4%
observados por Rocha et al. (2007) no 15o dia de gestação, porém, superior aos 50,0% obtidos
por Taveiros, (2000) no 45o dia de gestação, aos 65,7% observados por Carnevale et al.
(2000) no 12o dia de gestação e aos 51% registrados por Taveiros et al. (2003) no 30o dia de
gestação.
Em 41 prenhezes monitoradas até o 30o dia gestação 16 (39,02%) resultaram em perda
embrionária (Tabela 1), resultado inferior aos 62% observados por Carnevale e Ginther
(1992) no 39o dia de gestação e aos 49% obtidos por Taveiros et al. (2003) no 30o dia de
gestação, porém, superior aos 17,5 % observados por Villahoz et al., (1985) no 50o dia pósovulação, aos 15,5% referidos por Carnevale et al. (2000) no 50o dia de gestação, aos 4,8%
observados por Rocha et al. (2007) aos 30 dias de gestação e aos 11,9% referidos por
Taveiros et al. (2008) aos 45 dias de gestação.
As diferenças encontradas na literatura podem estar relacionadas às condições de
trabalho de cada autor, bem como, heterogeneidade dos animais, manejo, nutrição, condições
edafo-climática, saúde do trato reprodutivo, método de transferência, manipulação e
53
morfologia do embrião, sincronização entre doadoras e receptoras, método e intervalo de
detecção da prenhez, sem descartar a possível influência da variabilidade da assistência
clínica-veterinária recebidas pelos distintos haras.
Neste estudo, o fato das receptoras não pertenserem todas do mesmo estabelecimento
pode ter influenciado nos resultados, uma vez, que receptoras oriundas do próprio
estabelecimento podem proporcionar obtenção de boas respostas (Taveiros, 2000).
A colheita embrionária foi realizada no 8o dia após a ovulação, esse fato,
provavelmente, não interferiu nos resultados, uma vez que não há diferenças nas taxas de
perdas de prenhez quando as colheitas são realizadas no 7o, 8o ou 9o dia após a ovulação
(FLEURY, 1998; FLEURY et al., 2001), ressaltando, que a colheita realizada no 8o dia tende
a aumentar a taxa de recuperação embrionária (FLEURY e ALVARENGA, 1999).
A influência da idade das doadoras (05 a 15 anos) nos resultados deste estudo foi
descartada, pois, embriões originados de éguas velhas (> 18 anos) têm chances de
permanecerem viáveis idênticas aos originados de éguas jovens, apresentando similares taxas
de perdas embrionárias até o 40o dia de gestação (ALONSO et al., 2005).
As doadoras e receptoras tiveram o ciclo estral sincronizado buscando um intervalo de
-1 até +3 dias da ovulação da receptora em relação à ovulação da doadora (McKINNON et al.,
1988; SQUIRES, 1993), esse fato, provavelmente não interferiu nos resultados deste estudo,
mesmo porque, em programas de TE pode ser usado o grau de sincronia da ovulação entre
receptoras e doadoras (-1 a +5) sem afetar a taxa de prenhez (JACOB et al., 2002).
A qualidade do embrião equino é considerada um dos fatores que mais afeta as taxas
de prenhez nos programas de TE (SQUIRES et al., 2003). De acordo com Taveiros et al.
(2008) a baixa porcentagem de perda embrionária registrada em seus estudos deveu-se a
utilização exclusiva de estruturas classificadas entre grau I e III, neste contexto, qualidade dos
embriões influenciou positivamente os resultados aqui obtidos.
54
Com relação ao status reprodutivo, as taxas de prenhez e perda embrionária foram,
respectivamente, 71,43% (15/21) e 26,66% (4/15) para fêmeas nulíparas, 55,00% (11/20) e
63,33% (7/11) para pluríparas lactantes e de 75,00% (15/20) e 33,33% (5/15) para as
pluríparas não lactantes (Tabela 1).
De acordo com Sertich, (1989), é recomendável a utilização de éguas nulíparas como
receptoras em programas de TE, por apresentarem uma cérvix longa e fechada, denominada
de funcionalmente competente, sendo também possível, o uso com sucesso de éguas em
lactação a partir do 30o dia de parição (WILSON et al., 1987). Entretanto, Taveiros (2000) e
Taveiros et al. (2003) ressaltam não haver diferenças entre os índices de fertilidade de éguas
receptoras nulíparas, pluríparas lactantes ou pluríparas não lactantes.
Corroborando com as observações de Taveiros (2000) e Taveiros et al. (2003), neste
estudo, também não foram identificadas diferenças significativas (P > 0,05) entre esses
parâmetros. Contudo, em termos de valores absolutos, as éguas pluríparas lactantes foram as
que apresentaram o menor desempenho reprodutivo. De acordo com Grunert et al. (2005) a
influência negativa da lactação devido a produção excessiva de leite pode interferir na
implantação do concepto, é possível que esse fato tenha contribuído para os resultados obtidos
com esse grupo de fêmeas.
Tabela 1 – Taxas de prenhez diagnosticadas no sétimo dia após a TE e de perda embrionária até o 30o
dia de gestação em receptoras Mangalarga Marchador, de acordo com o Status
Reprodutivo.
TE
(N)
Status Reprodutivo
Prenhez
Perda embrionária
(N)
(%)
(N)
(%)
Nulíparas
21
15
71,43
4
26,66
Pluríparas lactantes
20
11
55,00
7
63,63
Pluríparas não lactantes
20
15
75,00
5
33,33
61
41
67,21
16
39,02
Total
2
Diferenças não significativas pelo teste do χ (P>0,05).
55
No que concerne a faixa etária, as taxas de prenhez e perda embrionária foram,
respectivamente, 68,75% e 36,36% para fêmeas entre 3 e 5 anos, 80,00% e 25,00% para
fêmeas entre 6 e 8 anos, 76,47% e 30,76% para fêmeas entre 9 e 11 anos e 38,46% e 100,00%
para fêmeas com mais de 11 anos (Tabela 2).
As fêmeas com mais de 11 anos que tiveram taxa de prenhez menor (P < 0,05) do que
às de faixas etárias entre 6 e 8 anos e entre 9 e 11 anos. Estes achados, estão de acordo com as
observações de Carnevale e Ginther (1992) os quais, relataram que as taxas de prenhez são
maiores em éguas jovens (5 a 7 anos) do que em éguas velhas (≥ 15 anos), diferindo do relato
de Carnevale et al. (2000) que não encontraram diferenças entre as taxas de prenhez de
receptoras na faixa etária entre 2 e 9 anos em relação as de idade compreendida entre 10 e 18
anos.
Entretanto, no que se refere à perda embrionária, as éguas com mais de 11 anos
apresentaram perdas significativamente maiores (P < 0,05) do que as de faixa etária inferior,
achado que corrobora com os relatos de Carnevale e Ginther (1992) e de Carnevale et al.
(2000) os quais, observaram que éguas com idade ≥
15 anos ou com mais de 10 anos de
idade, respectivamente, apresentam perdas embrionária significativamente maior dos que as
de menor faixa etária.
De acordo com esses autores, a baixa qualidade do ambiente uterino pode estar
associada à senilidade das receptoras (fêmeas com mais de 10 anos) influenciando a redução
da taxa de prenhez (CARNEVALE e GINTHER, 1992) e o acréscimo da perda embrionária
(CARNEVALE e GINTHER, 1992; CARNEVALE et al., 2000).
56
Tabela 2 – Taxas de prenhez diagnosticadas no sétimo dia após a TE e de perdas embrionárias até o
30o dia de gestação em receptoras Mangalarga Marchador função da faixa etária.
Faixa etária
(Anos)
TE
(N)
3a5
Prenhez
Perdas embrionárias
(N)
(%)
(N)
(%)
16
11
68,75ab
4
36,36a
6a8
15
12
80,00a
3
25,00a
9 a 11
17
13
76,47a
4
30,76a
> 11
13
5
38,46b
5
100,00b
Total
61
41
67,21
16
39,02
Letras diferentes na mesma coluna representam diferenças significativas pelo teste do χ2 (P < 0,05).
No que se concerne ao período de gestação, as taxas de perda embrionária de 17,07%,
14,70% e 13,79%, observadas para os períodos gestacionais entre 15 a 20 dias, entre 21 a 25
dias e entre 26 e 30 dias, respectivamente, não evidenciaram diferenças significativas (P >
0,05) (Tabela 3). Contudo, em termos de valor absoluto, a maior perda foi verificada no
período entre 15 a 20 dias de gestação, esses achados estão compatíveis com as observações
de Villahoz et al. (1985), Carnevale et al. (2000) e Taveiros et al. (2008) os quais, observaram
maior ocorrência de perda embrionária nos períodos gestacionais de 15 a 20 dias, de 17 a 25
dias e de 21 a 30 dias respectivamente.
O resultado obtido neste estudo pode ser explicado por uma possível falha na interação
entre o embrião e o organismo materno ocasionando o não reconhecimento materno da
prenhez nesse período gestacional (GINTHER et al., 1985; BALL, 1993; GAIVÃO e
STOUT, 2007), ou ainda devido a um possível retardo no desenvolvimento embrionário como
reportado por Carnevale et al. (2000) e Taveiros et al. (2003).
57
Tabela 3 – Perdas embrionárias em receptoras da raça Mangalarga Marchador em diferentes períodos
de gestação.
Período da gestação
(Dias)
Prenhez
(N)
15 a 20
Perdas embrionárias
(N)
(%)
41
7
17,07
21 a 25
34
5
14,70
26 a 30
29
4
13,79
Diferenças não significativas pelo teste do χ2 (P > 0,05).
Conclusões
Os dados obtidos neste estudo permitem concluir que éguas da raça Mangalarga
Marchador independente do status reprodutivo podem ser utilizadas com êxito como
receptoras em programas de TE, porém, não é recomendável, que fêmeas com idade acima de
11 anos sejam utilizadas para essa função.
Referências
ALONSO, M.A. et al. Effect of donor mare’s age in embryonic loss rate. Acta Scentiae
Veterinariae, v.33, Supl. 1, p.203, 2005
BALL, B.A. Embryonic death in mares. In: McKINNON, A.O.; VOSS, J.L. Equine
Reproduction. Philadelphia: Lea & Febiger, 1993. Cap. 61, p.517-531.
CARNEVALE, E.M. et al. Factors affecting pregnancy rates and early embryonic death
after equine embryo transfer. Theriogenology, v. 54, p. 965-979, 2000.
CARNEVALE, E.M.; GINTHER, O.J. Relationships of age to uterine function and
reproductive efficiency in mares. Theriogenology, v. 37, p. 1101-1115, 1992.
58
FERREIRA, J.B.P. et al. Incidência e caracterização ultra-sonográfica da morte embrionária
em éguas da raça Campolina. Revista Brasileira de Reprodução Animal, v.23, n.3, p.202203, 1999.
FLEURY, J.J. Transferência não cirúrgica de embriões equinos colhidos no oitavo dia pósovulação. Arquivos da Faculdade de Veterinária da UFRGS, v.26, n.1, p.266, 1998.
FLEURY, J.J.; ALVARENGA, M.A. Effects of collection on embryo recovery and
pregnancy rates in nonsurgical equine embryo transfer program. Theriogenology, v. 51, p.
261, 1999.
FLEURY, J.J. et al. Fatores que afetam a recuperação embrionária e os índices de prenhez
após transferência transcervical em equinos da raça Mangalarga. Brazilian Journal of
Veterinary Research and Animal Science, v.38, n.1, p. 29-33, 2001.
GAIVÃO, M.M.F.; STOUT, T.A.E. Maternal recognition of pregnancy in the mare – a mini
review. Revista Lusófona Ciência e Medicina Veterinária, v.1, p. 5-9, 2007.
GINTHER, O.J. et al. Embryonic loss in mares: Pregnancy rate, length of interovulatory
intervals, and progesterone concentrations associated with loss during days 11 to 15.
Theriogenology, v.24, n.4, p.203-216, 1985.
GRUNERT, E. et al. Distúrbios da reprodução: alterações conseqüentes às interações entre
o útero e o concepto. In:___. Patologia e clínica da reprodução dos animais mamíferos
domésticos: ginecologia. São Paulo: Varela, 2005. Cap.10, p. 465-488.
HENNEKE, D.R. et al. Relationship between condition score, physical measurements and
body fat percentage in mares. Equine Veterinary Journal, v. 15, n.4, p. 371-372, 1983.
59
JACOB, J.C.F. et al. The impact of degree of synchrony between donors and recipients in a
commercial equine embryo transfer program. Theriogenology, v.57, p. 545, 2002.
JASKO, D.J. Comparison of pregnancy rates following nonsurgical transfer of day 8 equine
embryos using various transfer devices. Theriogenology, v.58, p.713-715, 2002.
LOSINNO, L.; ALVARENGA, M.A. Critical factors on equine embryos transfer programs
in Brazil and Argentina. Acta Scientiae Veterinariae, v.34, p. 39-49, 2006.
McKINNON, A.O. et al. Equine embryo transfer: A review. Compendium Continuing
Education Practice Veterinary, v.10, n.3, p. 343-355, 1988.
McKINNON, A.O.; SQUIRES, E.L. Morphologic assessment of the equine embryo.
Journal America Veterinary Medical Association, v. 192, n. 3, p. 401-406, 1988.
PALMER, E.; DRIANCOURT, M.A. Use of ultrasonic echography in equine gynecology.
Theriogenology, v.13, n.3, p.203-216, 1980.
ROCHA, A.N. et al. Taxas de Prenhez e perda embrionária precoce em programa comercial
de transferência de embriões (TE) em éguas da raça Mangalarga Marchador. In:
CONGRESSO BRASILEIRO DE REPRODUÇÃO ANIMAL, 17., 2007, Belo Horizonte.
Anais… Belo Horizonte: Colégio Brasileiro de Reprodução Animal, 2007. p. 160.
SERTICH, P. L. Transcervical embryo transfer in performance mares. Journal of the
American Veterinary Medical Association, v.195, n.7, p.940-944, 1989.
SQUIRES, E.L. Embryo transfer. In: McKINNON, A.O.; VOSS, J.L. Equine
Reproduction. Philadelphia: Lea & Febiger, 1993. Cap.41, p.357-367.
60
SQUIRES, E.L. et al. Embryo technologies in the horse. Theriogenology, v. 59, p. 151174, 2003.
SQUIRES, E.L. et al. The current status of equine embryo transfer. Theriogenology, v. 51,
p. 91-104, 1999.
SQUIRES, E.L. et al. Use of ultrasongraphy in reproductive management of mares.
Theriogenology, v. 29, p. 55-70, 1988.
TAVEIROS, A. W. Transferência de embriões equinos da raça Mangalarga Machador.
2000. 40 f. Dissertação (Mestrado em Ciência Veterinária) - Programa de Pós-graduação em
Ciência Veterinária, Universidade Federal Rural de Pernambuco.
TAVEIROS, A.W. et al. Perda de concepto em programa de inseminação artificial e de
transferência de embriões em equinos da raça Mangalarga Marchador. Medicina
Veterinária, v. 2, n.2, p.28-33, 2008.
TAVEIROS, A.W. et al. Ultrasonographic monitoring of 103 recipient mares of different
reproductive status during the first 30 days after embryo transfers. Veterinary Record, v.
153, p.558-560, 2003.
VILLAHOZ, M.D. et al. Some observations on early embryonic death in mares.
Theriogenology, v.23, p. 915-924, 1985.
WILSON, J.M. et al. Successful non-surgical transfer of equine embryos to post-partum
lactating mares. Theriogenology, v. 27, n. 1, p. 295, 1987.
WOLF, A.; GABALDI, S. H. Acompanhamento ultra-sonográfico da gestação em grandes
animais. Ciências Agrárias e da Saúde, v. 2, n.2, p. 77-83, 2002.
61
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