UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO
CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
DEPARTAMENTO DE ZOOLOGIA
MESTRADO EM BIOLOGIA ANIMAL
Cultivo em Massa do Copépodo Bentônico Tisbe biminiensis
(Harpacticoida) e Sua Utilização na Larvicultura do Camarão
Macrobrachium rosenbergii (Palaemonidae).
Aurelyanna Christine Bezerra Ribeiro
RECIFE
2005
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
MESTRADO EM BIOLOGIA ANIMAL
Aurelyanna Christine Bezerra Ribeiro
Cultivo em Massa do Copépodo Bentônico Tisbe biminiensis
(Harpacticoida) e Sua Utilização na Larvicultura do Camarão
Macrobrachium rosenbergii (Palaemonidae).
Dissertação apresentada ao Curso de
Mestrado em Biologia Animal da Universidade
Federal de Pernambuco, como parte dos requisitos
para a obtenção do grau de Mestre em Ciências
Biológicas na área de Biologia Animal.
Orientador:
Profa. Dra. Lília Pereira de Souza Santos
RECIFE
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Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Ribeiro, Aurelyanna Christine Bezerra
Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe
biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na
larvicultura do camarão Macrobrachium rosenbergii
(Palaemonidae) / Aurelyanna Christine Bezerra
Ribeiro. – Recife : O Autor, 2005.
viii, 51 : il., fig., tab.
Dissertação (mestrado) – Universidade Federal
de Pernambuco. CCB. Biologia Animal, 2005.
Inclui bibliografia.
1. Ciências biológicas – Biologia animal. 2.
Meiofauna – Copépodo bentônico – Cultivo. 3. Tisbe
biminiensis
(Harpacticoida)
–
Utilização
na
larvicultura do camarão Macrobrachium rosenbergii.
I. Título.
595.34
595.34
CDU (2.ed.)
CDD (22.ed.)
UFPE
BC2005-304
iii
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
MESTRADO EM BIOLOGIA ANIMAL
Aurelyanna Christine Bezerra Ribeiro
Cultivo em Massa do Copépodo Bentônico Tisbe biminiensis
(Harpacticoida) e Sua Utilização na Larvicultura do Camarão
Macrobrachium rosenbergii (Palaemonidae).
Dissertação defendida e aprovada pela Banca Examinadora em 21 de Fevereiro de 2005.
RECIFE
2005
iv
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
“Deus deu aos homens a terra firme, as lagoas e os mares mansos. Mas o
mar absoluto, esse ele deu ao perigo e ao abismo. Então o jeito é só navegar
no marzinho sem perigo e sem abismo! Pode ser. Mas aí o olho de gente fica
feito olho de boi, parado nada vê, e quando vê fica assustado. Deus é perigo
é abismo. Mora no grande mar. Por isso é só nele que se espelha o céu. Quem
viu o céu espelhado no abismo e no perigo, esse terá para sempre no olhar, o
brilho da eternidade”.
Rubem Alves
v
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Ao grande amigo Osni A. da
Silva, pela sua torcida, incentivo
e pelo seu amor por mim.
vi
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
AGRADECIMENTOS
À professora Dra. Lília Pereira de Souza Santos, pela a orientação e pelos
valiosos ensinamentos adquiridos neste curto período de convívio.
Ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientifico e Tecnológico (CNPq)
pelo financiamento deste trabalho como parte do projeto Produção de Alimentos Vivos
Alternativos na Larvicultura do Macrobrachium rosenbergii.
Aos
pesquisadores
e
técnicos
da
Empresa
Pernambucana
de
Pesquisa
Agropecuária – IPA/E. E. Ipojuca, pelo apoio durante o período de realização deste
trabalho. Com muito carinho agradeço aos grandes amigos Eidy Simões, Mario Alberto
e Severino Marcelino, cada um com sua maneira bem particular de ser me ajudou, me
incentivou e me conquistou.
À Lília, Paulo e Amanda Santos, pelo carinho amizade e pela companhia nos
muitos finais de semana em Porto de Galinhas.
À Silvia Cecília, Beatriz Oliveira, Rodolfo Castro, Alzira Patrícia, Daniele
Vasconcelos, Waleska Costa, Ana Cecília, Carla Daniele, Lílian Cristine, Rodolfo
Araújo, Arley Andrade, Teodoro Vaske, Marcelo Nóbrega, André Samico, Natasha
Ferreira e Débora Suzuki pela valiosa ajuda e por me fazerem companhia lá em Porto de
Galinhas ajudando a diminuir a saudade.
Aos professores da banca examinadora pelas sugestões para o aprimoramento
desta dissertação.
À Professora Maria Eduarda de Larrazábal, coordenadora do Mestrado em
Biologia Animal, assim como à Ana Elizabeth, secretária do Mestrado, pela atenção,
disponibilidade sempre demonstrada e pelo carinho.
Aos professores e alunos do Mestrado em Biologia Animal pelos bons
momentos compartilhados, em especial a Déborah Suzuki, Eduardo Lima, Ilca Araújo,
Leandro Yokota, Priscila Murolo, Etiene Almeida e Viviane Lúcia.
Aos professores, funcionários e alunos do Departamento de Oceanografia da
UFPE pela amizade e companheirismo, em especial a Professora Mônica Costa,
Professor Petrônio Alves Coelho, Professor Ralf Schwamborn, Petrônio Filho, Adilma
Cocentino, Anita Valença, Nathalia Guimarães, Thiago Reis, Maristela Casé, Maria
Cristina Araújo e Marcelo Rollnic.
i
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
A todos que fizeram e fazem parte da equipe do Laboratório de Cultivo do
Departamento de Oceanografia da UFPE: Cristiane Castro, Júlia Maria, Lílian Cristine,
Natasha Ferreira, Rodolfo Araújo e Weruska Melo, por todos os momentos que vivemos
juntos, compartilhando as alegrias e os ensinamentos.
À Cristiane M.V. de A. Castro, pelo apoio constante e sua valiosa amizade.
Aos professores, alunos e funcionários do Departamento de Pesca da UFRPE,
sempre muito atenciosos e amigos, o que faz me sempre me sentir “em casa”, em
especial aos Professores Rosangela Lessa, Eudes Correia, Alfredo Galvez, José Carlos,
Paulo Guilherme, Paulo Travassos, Fábio Hazin e José Milton.
A Alex Dantas, pela presença constante, sua amizade e seu carinho
especialmente nos momentos que antecederam a apresentação deste trabalho.
Aos muito queridos: Adriana das Graças, Adriano Guaraná, Bernardo Muniz,
Francisco Marcante, Graziele Dariano, Jacqueline Guimarães, Joab Joaquim, José
Lúcio, Karina Suzana, Marcelo Costa, Mércia Lima, Niraldo Melo, Paulo Duarte,
Simone Fernanda e Taysa Adriana, Teodoro Vaske e Werlane Mendes que, cada um
com uma história diferente e com jeito todo especial, continuam sendo o meu
referencial de coragem, profissionalismo, otimismo, companheirismo e amizade.
À minha família: meus pais, irmãos e minha tia Rozélia Bezerra por todo
incentivo e carinho.
À Deus que está sempre presente em todos os momentos da minha vida.
ii
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
LISTA DE TABELAS
Pág.
Tabela 1 – Produção obtida para algumas espécies de copépodos cultivados com
diferentes métodos................................................ ...........................................................24
Tabela 2 – Resumo dos resultados obtidos nos dois experimentos de sustentabilidade
dos cultivos de Tisbe biminiensis (média ± desvio padrão)............................................26
Tabela 3 – Esquema distribuição do alimento vivo nos experimentos testando a
substituição total e parcial de náuplios de Artemia pela prole do copépodo Tisbe
biminiensis na larvicultura de Macrobrachium rosenbergii............................................36
Tabela 4 – Ingredientes utilizados na formulação do alimento inerte (PME) produzido
no Laboratório de Larvicultura da Empresa Pernambucana de Pesquisa Agropecuária –
IPA – Estação Experimental de Ipojuca/PE....................................................................36
Tabela 5 – Resultados do primeiro teste de desempenho do copépodo Tisbe biminiensis
na larvicultura de Macrobrachium rosenbergii...............................................................38
Tabela 6 – Resultados do segundo teste de desempenho do copépodo Tisbe biminiensis
na larvicultura de Macrobrachium rosenbergii...............................................................40
Tabela 7 – Densidades mínimas de náuplios de Artemia fornecidas para larvas de M.
rosenbergii e respectivas médias de sobrevivência obtidas............................................44
iii
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
LISTA DE FIGURAS
Pág.
Figura 1 – Copépodo Harpacticoida bentônico Tisbe biminiensis Volkmann-Rocco,
1973................................................................................................................................. 06
Figura 2 – Caixas utilizadas no cultivo do copépodo Tisbe biminiensis........................09
Figura 3 – Procedimento de troca da água dos cultivos de Tisbe biminiensis...............09
Figura 4 – Médias e desvios padrões do número total de Tisbe biminiensis em cultivos
de 5 litros nos tratamentos com coleta de prole e sem coleta de prole e produção de
prole ao longo de 28 dias de cultivo................................................................................ 13
Figura 5 – Médias e desvios padrões do número de náuplios de Tisbe biminiensis em
cultivos de 5 litros nos tratamentos com coleta de prole e sem coleta de prole e náuplios
coletados na prole ao longo de 28 dias de cultivo...........................................................14
Figura 6 – Médias e desvios padrões do número de Tisbe biminiensis em cultivos de 5
litros e prole coletada nos tratamentos com sedimento e sem sedimento após uma
semana.............................................................................................................................15
Figura 7 – Médias e intervalos de confiança da população total e náuplios de Tisbe
biminiensis em cultivos de 5 litros realizados na Estação de Aqüicultura do IPA durante
a primeira etapa de 130 dias............................................................................................16
Figura 8 – Médias e intervalos de confiança do número de copépodos e fêmeas ovadas
de Tisbe biminiensis em cultivos de 5 litros realizados na Estação de Aqüicultura do
IPA durante a primeira etapa de 130 dias........................................................................16
Figura 9 – Produção de prole de Tisbe biminiensis em cultivos de 5 litros realizados na
Estação de Aqüicultura do IPA durante o cultivo em massa realizado na primeira etapa
de 130 dias.......................................................................................................................17
Figura 10 – Médias e intervalos de confiança da população total e náuplios de Tisbe
biminiensis em cultivos de 5 litros realizados na Estação de Aqüicultura do IPA durante
a segunda etapa de 70 dias...............................................................................................18
Figura 11 – Médias e intervalos de confiança do número de copépodos e fêmeas ovadas
de Tisbe biminiensis em cultivos de 5 litros realizados na Estação de Aqüicultura do
IPA durante a segunda etapa de 70 dias..........................................................................19
Figura 12 – Produção de prole de Tisbe biminiensis em cultivos de 5 litros realizados
na estação de aqüicultura do IPA durante o cultivo em massa realizado na segunda etapa
de 70 dias......................................................................................................................... 20
iv
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Figura 13 – Médias e desvios padrões do número total de copépodos existentes em 5
caixas de cultivo antes e depois da retirada da prole e a evolução da recuperação dos
cultivos durante sete dias. Letras iguais representam médias não estatisticamente
diferentes pelo teste de Tukey........................................... ..............................................21
Figura
14
–
Tanques
de
cultivo
experimentais
utilizados
na
larvicultura
do
Macrobrachium rosenbergii............................................................................................33
Figura 15 – Médias e desvios padrões do número total de M. rosenbergii sobreviventes
após o primeiro teste de avaliação do T. biminiensis como substituto da Artemia. Letras
iguais
representam
médias
não
estatisticamente
diferentes
pelo
Teste
de
Tukey...............................................................................................................................39
Figura 16 – Médias e desvios padrões do número total de M. rosenbergii sobreviventes
após o segundo teste de avaliação do T. biminiensis como substituto da Artemia. Letras
iguais
representam
médias
não
estatisticamente
diferentes
pelo
Teste
de
Tukey...............................................................................................................................41
v
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
RESUMO
Este trabalho teve como objetivos desenvolver técnicas de cultivo em massa do
copépodo Tisbe biminiensis em volumes de 5 litros e avaliar o seu desempenho como
substituto da Artemia na larvicultura do camarão Macrobrachium rosenbergii. O cultivo
do copépodo foi realizado em caixas plásticas (32 x 47 x 14,5 cm) munidas de aeração,
com 5 litros de água do mar filtrada, sob temperatura ambiente e salinidade de 35°/oo. O
alimento fornecido diariamente foi ração para peixes de aquário e a cada dois dias, nas
trocas de água, 500ml das diatomáceas Phaeodactylum tricornutum ou Thalassiosira
fluviatilis. Em todos os experimentos o número de copépodos foi estimado por subamostragem. O teste de desempenho do copépodo na larvicultura do M. rosenbergii foi
realizado com quatro réplicas para cada um dos cinco tratamentos: 0, 25, 50, 75 e 100%
de introdução de copépodo. Os resultados obtidos demonstraram que a coleta semanal
de prole e a presença de sedimento arenoso não afetaram o crescimento dos copépodos.
Os testes de sustentabilidade dos cultivos demonstraram que T. biminiensis cresceu bem
em laboratório mantendo altas densidades por períodos de até 130 dias. O sistema de
cultivo produziu uma média de 28.000indivíduos/l/dia A população de copépodos se
recuperou 4 dias após a retirada da prole. A substituição da Artemia pelo T. biminiensis
não foi favorável a M. rosenbergii, porém as altas mortalidades observadas no controle
indicam algum tipo de problema no sistema de cultivo que pode ter influenciado os
resultados.
vi
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
ABSTRACT
The aim of this study was to develop the mass culture of the copepod Tisbe biminiensis
in volumes of 5 liters and to evaluate its performance as total or partial substitute of
Artemia in culture of the prawn Macrobrachium rosenbergii larvae. The copepods
culture was accomplished in plastic boxes (32 x 47 x 14,5 cm) with 5 liters of filtered
and aerated seawater, at natural temperature and salinity of 35°/oo. Daily the copepods
were fed with ration for aquarium fish and every other day, during total water change,
with 500ml of the diatom Phaeodactylum tricornutum or Thalassiosira fluviatilis. In all
experiments the number of copepods was estimated by sub-sampling. The performance
test of copepod as food for M. rosenbergii larvae was designed with five diet treatments
(0, 25, 50, 75 and 100% of copepod introduction), each one with four replicates. The
results demonstrated that the offspring harvest once a week and the presence of
sediment in the boxes did not affect copepods' population growth. The copepod Tisbe
biminiensis grew well reaching high abundance during a 130 days period with relatively
simple culture techniques. The culture system produced an average of 28.000 ind/l/day.
The population reestablished 4 days after the offspring harvest. The Artemia substitution
by Tisbe biminiensis was not favorable for M. rosenbergii larvae, but high mortality in
controls indicate some problems in the culture system which could have influenced the
results.
vii
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
SUMÁRIO
pág.
AGRADECIMENTOS........................................................................................................
i
LISTA DE TABELAS........................................................................................................
iii
LISTA DE FIGURAS.........................................................................................................
iv
RESUMO............................................................................................................................
vi
ABASTRACT.....................................................................................................................
vii
INTRODUÇÃO GERAL....................................................................................................
1
CAPÍTULO 1 – Cultivo em Massa do Copépodo Bentônico Tisbe biminiensis
(Harpacticoida) em volumes de 5 litros..............................................................................
4
1. INTRODUÇÃO..............................................................................................................
5
2. OBJETIVO......................................................................................................................
7
3. MATERIAL E MÉTODOS............................................................................................
8
4. RESULTADOS...............................................................................................................
13
5. DISCUSSÃO................................................................... ...............................................
22
6. CONSIDERAÇÕES FINAIS..........................................................................................
28
CAPÍTULO 2 – Utilização do Copépodo Bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida)
na Larvicultura do Camarão Macrobrachium rosenbergii (Palaemonidae).......................
29
1. INTRODUÇÃO. ............................................................................................................
30
2. OBJETIVOS...................................................................................................................
32
3. MATERIAL E MÉTODOS............................................................................................
33
4. RESULTADOS...............................................................................................................
38
5. DISCUSSÃO..................................................................................................................
42
6. CONSIDERAÇÕES FINAIS..........................................................................................
47
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS................................................................................
48
viii
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Introdução Geral
Considerado o maior dos camarões de água doce, podendo atingir 32 cm de
comprimento total e 500 gramas de peso (VALENTI, 1990), o Macrobrachium
rosenbergii (De Man, 1879) ocorre no fundo dos rios, lagos e reservatórios, que se
comunicam com a água salobra, e em áreas estuarinas das regiões tropicais e subtropicais do Indo-Pacífico (PINHEIRO & HEBLING, 1998).
Na natureza, durante a época reprodutiva, as fêmeas ovígeras de M. rosenbergii
migram para regiões estuarinas, onde ocorre a incubação dos ovos e a liberação de
larvas no estágio denominado zoea. Estas larvas são carnívoras e dependem de água
salobra para seu desenvolvimento, passando por 11 estágios de zoea antes de
alcançarem o estágio de pós-larva. Como pós-larva, elas mudam seus hábitos
planctônicos para bentônicos (PINHEIRO & HEBLING, 1998).
A introdução deste camarão no Brasil ocorreu no ano de 1977 por intermédio do
Departamento de Oceanografia da Universidade Federal de Pernambuco. A espécie
demonstrou ótima capacidade de adaptação às condições climáticas locais e devido ao
grande interesse que começou a despertar, o governo do Estado de Pernambuco, por
intermédio da Empresa Pernambucana de Pesquisa Agropecuária – IPA, instalou em
1982, na praia de Porto de Galinhas, um laboratório com capacidade para produzir 20
milhões de pós-larvas por ano (CAVALCANTI, 1998).
O trabalho pioneiro desenvolvido pelo IPA, referente à produção de pós-larvas,
realização de pesquisa, formação de pessoal e prestação de assistência técnica, tornou
possível a propagação da carcinocultura de água doce por quase todo o território
nacional (CAVALCANTI, 1998). Atualmente existem cerca de 350 fazendas de
engorda instaladas em 16 estados do Brasil, estas fazendas dependem de pós-larvas
fornecidas por apenas cinco larviculturas que se encontram em funcionamento regular
em todo Brasil (MORAES-RIODADES, 2004). Desta forma a disponibilidade de póslarvas é um dos elos mais fracos da cadeia produtiva e tem sido responsável pelo
abandono da atividade por centenas de produtores (VALENTI, 2004).
De uma maneira geral, as altas mortalidades ocorrentes em larviculturas de
peixes e crustáceos estão relacionadas, entre outros fatores, às deficiências nutricionais
(BARRETO & CAVALCANTI, 1997). Uma alimentação adequada é um dos fatores de
fundamental importância para o sucesso da larvicultura de M. rosenbergii. Atualmente,
1
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
a maioria das larviculturas comerciais de M. rosenbergii utiliza náuplios de Artemia
recém eclodidos durante o ciclo larval inteiro além de uma dieta úmida (BARROS &
VALENTI, 2003a). As larvas dependem durante os 10 primeiros dias de cultivo (até
estágio zoea VI) exclusivamente de Artemia passando a partir daí a usar ração como
complemento durante o período diurno (VALENTI et al., 1998).
A Artemia é um microcrustáceo branquiópodo próprio de ambientes aquáticos
de elevada salinidade que se encontra distribuído em todo o mundo. Este animal vem
desempenhando um papel fundamental no desenvolvimento da aqüicultura, como
alimento vivo para estágios iniciais do desenvolvimento de peixes e crustáceos.
Este
fato se deve à grande facilidade de estocagem dos seus cistos de resistência (LAVENS
& SORGELOOS, 1998).
No Brasil, a Artemia é encontrada nas salinas do Rio Grande do Norte em
conseqüência de inoculações feitas em 1977 com cistos provenientes da baía de São
Francisco (Califórnia, EUA). Ao longo dos anos ela se dispersou por toda a região
salineira do Rio Grande do Norte e exerceu papel importante no desenvolvimento e
consolidação da carcinocultura do nordeste do Brasil, especialmente em relação à
provisão de cistos e biomassa utilizados nas larviculturas e nos laboratórios de
maturação (CÂMARA, 2004).
Mais de 90% da produção de cistos de Artemia, que se encontram disponíveis no
mercado internacional, provém de Great Salt Lake (Utah, EUA) como resultado das
atividades de extração a partir das populações naturais (LAVENS & SORGELOOS,
1998). A produção brasileira de cistos é da ordem de duas toneladas anuais, ficando
muito aquém da demanda nacional que é de 16,4 toneladas anuais. Esta produção não
apresenta perspectivas de aumento em curto prazo, uma vez que depende unicamente da
produtividade natural das salinas do Rio Grande do Norte (CÂMARA, 2004).
O equilíbrio das populações de Artemia está sujeito a variações ambientais,
sobretudo de origem climática, podendo assim, em certas épocas do ano, a oferta de
cistos diminuir bastante. Este tipo de eventualidade, somado ao aumento da demanda,
pode se tornar bastante prejudicial para o bom desenvolvimento da aqüicultura
(LAVENS & SORGELOOS, 1998).
Por outro lado, a proliferação de vários tipos de vírus que atacam principalmente
camarões peneídeos, tem levado o governo brasileiro a restringir as importações de
cistos de Artemia provindos de países nos quais já se tenha detectado infecções virais
(MINISTÉRIO DA AGRICULTURA E DO ABASTECIMENTO, 1999). Este tipo de
2
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
medida, se por um lado protege o país da entrada de patógenos que poriam em risco a
carcinocultura nacional, pode no futuro inviabilizar a produção de pós-larvas que
dependem destes cistos.
Desta forma, torna-se importante procurar um alimento vivo alternativo que
possa substituir total ou parcialmen te os náuplios de Artemia. Outros alimentos vivos
vêm sendo testados como substitutos dos náuplios de Artemia em larviculturas como:
rotíferos,
nematódeos,
copépodos
e
cladóceros,
entre
outros
(LAVENS
&
SORGELOOS, 1998). Nas últimas décadas, houve um grande interesse pela produção
de copépodos harpacticóides como alimento vivo para larvas de peixes e crustáceos
(KAHAN, 1981; KAHAN et al., 1981/1982; TSENG & HSU, 1984).
Alvarez-Lajonchere & Molejon (1998) citam várias vantagens no uso de
copépodos no cultivo de peixes marinhos: grande variedade de tamanhos corporais entre
o náuplio (50µm) e o adulto (1mm); seus movimentos em zig-zag constituem um
estímulo visual para as larvas; alto conteúdo energético; predomínio de fosfolipídeos
sobre os triglicerídeos; alto conteúdo de ácidos graxos poliinsaturados (PUFA) e outros
compostos essenciais como carotenos; possuem antioxidantes naturais para a proteção e
disponibilidade dos PUFA; e níveis enzimáticos altos que ajudariam a digestão larval.
O copépodo harpacticóide Tisbe biminiensis Volkmann-Rocco, 1973 vem sendo
cultivado em laboratório desde 1998, pela equipe da Dra. L. P. Souza-Santos, no
Departamento de Oceanografia da Universidade Federal de Pernambuco. Esta espécie
foi estudada em experimentos que avaliavam a influência da dieta alimentar no
crescimento e fecundidade (PINTO et al., 2001; ARAÚJO-CASTRO, 2002). O efeito
da redução da salinidade na sobrevivência e fecundidade foi avaliado por Ferreira
(2003). Pastor (2003) desenvolveu técnicas de cultivo desta espécie em volumes de 500
ml.
Diante do quadro atual da produção e demanda por cistos de Artemia e as
possíveis restrições do seu uso, este trabalho tem como objetivo desenvolver técnicas de
cultivo em massa do copépodo harpacticóide bentônico Tisbe biminiensis em volumes
de 5 litros e testá-lo como substituto total ou parcial da Artemia na larvicultura do
camarão Macrobrachium rosenbergii.
3
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Capítulo 1
Cultivo em Massa do Copépodo Bentônico Tisbe biminiensis
(Harpacticoida) em Volumes de 5 Litros.
4
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
1. Introdução
O cultivo de organismos aquáticos para serem utilizados como alimento para
larvas de peixes e crustáceos é de grande interesse para as la rviculturas (HERNÁNDEZ
MOLEJÓN & ALVAREZ-LAJONCHERE, 1998). Sendo, de fundamental importância
a disponibilidade de um alimento vivo que possua alto valor nutricional, para promover
melhor crescimento e sobrevivência de larvas de peixes e crustáceos (TESHIMA et al.,
1983; SARGENT et al., 1997).
Segundo Lavens & Sorgeloos (1996), entre os copépodos, os harpacticóides
bentônicos, principalmente os gêneros Tisbe e Tigriopus, possuem características que
facilitam o seu cultivo, tais como: alta fecundidade e curto tempo de geração; limites
extremos de tolerância às mudanças ambientais (salinidades 15-70o/oo e temperaturas de
17-30 oC); usam uma grande variedade de alimento, como microalgas, fermento, rações
secas; e chegam a alcançar altas densidades populacionais.
O cultivo em massa de copépodos harpacticóides já foi estudado para diversas
espécies, entre elas: Tigriopus japonicus (FUKUSHO, 1980; TSENG & HSU, 1984),
Tigriopus brevicornis (VILELA, 1984), Amphiascoides atopus (SUN & FLEEGER,
1995), Schizopera elantensis (KAHAN, 1981), Cletocamptus deitersi (FERREIRA,
2003; ARAÚJO, 2004), Tisbe holothuriae (KAHAN et al., 1981/1982; GAUDY &
GUERIN, 1982; STOTTRUP & NORSKER, 1997), Tisbe sp. (KAHAN et al.,
1981/1982)
e
Tisbe
biminiensis
(PASTOR,
2003).
Os
resultados
alcançados
demonstram que os harpacticóides podem atingir densidades populacionais de até 412
ind/ml, com a utilização de uma grande variedade de alimentos e as mais variáveis
técnicas de cultivo, desde as consideradas simples, com trocas de água e coleta de
indivíduos realizadas manualmente, até as mais avançadas, com sistema de recirculação
de água.
O cultivo intensivo de copépodos pode representar uma alternativa aos alimentos
vivos já utilizados nas larviculturas, podendo gerar futuramente uma independência,
mesmo que parcial, do fornecimento de cistos de Artemia. Este trabalho se propõe a
realizar o cultivo em massa do copépodo Tisbe biminiensis (Figura 1) desenvolvendo
técnicas que promovam o crescimento populacional e a produção de prole em volumes
de 5 litros.
5
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Figura 1 – Copépodo Harpacticoida bentônico Tisbe biminiensis Volkmann-Rocco,
1973.
6
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
2. Objetivos
2.1. Geral
ü Desenvolver técnicas de cultivo em massa do copépodo Tisbe biminiensis em
volumes de 5 litros.
2.2. Específicos
ü Testar se a coleta de prole afeta significativamente o crescimento populacional
dos copépodos em volumes de 5 litros;
ü Avaliar se a presença do sedimento arenoso aumenta o número de copépodos
produzidos;
ü Saber em quanto tempo a população de copépodos se recupera após a retirada da
prole;
ü Acompanhar se a população de copépodos em volume de 5 litros pode ser
mantida em altas densidades e com alta produção de prole por períodos superiores
a um mês.
7
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
3. Material e Métodos
Este trabalho foi realizado no Departamento de Oceanografia (DOCEAN) da
UFPE, onde foi iniciado o cultivo do copépodo Tisbe biminiensis em volumes de 5
litros e foram desenvolvidos os experimentos que avaliaram o efeito de coleta semanal
de prole e o efeito da presença de sedimento arenoso nas caixas de cultivo.
Posteriormente, na Estação de Aqüicultura da Empresa Pernambucana de Pesquisa
Agropecuária – IPA/ Ipojuca – PE, foram realizados os experimentos que determinaram
o tempo de recuperação dos cultivos após a coleta de prole e de sustentabilidade dos
cultivos (Etapas 1 e 2).
Cultivo em massa do copépodo Tisbe biminiensis em volumes de 5 litros.
Para a produção dos copépodos, em volumes de 5 litros, parte da população
mantida no Laboratório de Cultivo de Invertebrados Marinhos - DOCEAN/UFPE, em
volumes de 500ml, foi concentrada e submetida a uma amostragem.
Após a amostragem os animais foram transferidos para um balde graduado e o
volume elevado a 6 litros. O conteúdo do balde foi homogeneizado e cada litro foi
utilizado para iniciar um novo cultivo. Este cultivo foi realizado em caixas plásticas
transparentes de 32 cm de largura, 47 cm de comprimento e 14,5 cm de altura,
perfazendo uma superfície 0,15 m2 e capacidade para 20 litros, preenchidas com 4,5
litros com água do mar filtrada por filtro cuno de 3 µm, na salinidade de 30 a 35°/oo
(figura 2). Em cada caixa foram adicionados 200g de sedimento arenoso, esterilizado
por aquecimento a 200ºC após a retirada do sal. A partir do segundo experimento não
houve mais a introdução de sedimento arenoso nas caixas de cultivo. As caixas foram
mantidas tampadas, sob condições naturais em ambiente sombreado e cada uma recebeu
duas mangueiras de ar com pedras porosas. A alimentação consistiu de ração para peixe
de aquário em quantidade de 0,3 a 1g que foi acrescentada diariamente, conforme o
crescimento
da
população,
e
da
diatomácea
Phaeodactylum
tricornutum
ou
Thalassiosira fluviatilis, adicionada a cada troca de água em quantidade de 500ml na
concentração aproximada de 1,10x106 células/ml.
8
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Figura 2 – Caixas utilizadas no cultivo do copépodo Tisbe biminiensis.
As microalgas foram cultivadas no mesmo laboratório através das técnicas
padrões de preparação de meios de cultura consistindo de água do mar filtrada
enriquecida com nutrientes do meio f/2 de Guillard (GOMES, 1986); autoclavagem de
todo material e repicagem periódica dos inóculos. A densidade algal foi estimada por
contagem em câmara de Malassez.
Trocas de água foram realizadas a cada dois dias vertendo-se o conteúdo da caixa
de cultivo em uma peneira de 63µm, que não permite a passagem de copépodos em
nenhum estágio de desenvolvimento. Em seguida o material retido na peneira foi
devolvido para a caixa de cultivo onde ocorreu a adição de água limpa e alimento
(figura 3).
Figura 3 – Procedimento de troca da água dos cultivos de Tisbe biminiensis.
9
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Na realização do processo de amostragem, técnica utilizada para estimativa do
número de copépodos existentes no cultivo, o conteúdo da caixa foi vertido em uma
peneira de 63µm. O conteúdo retido na peneira foi depositado em um balde graduado,
com uma quantidade de água do mar determinada de acordo com a evolução dos
cultivos. Uma forte aeração foi empregada no fundo do balde com a realização de
movimentos
irregulares.
Quando
os
organismos
encontravam-se
distribuídos
homogeneamente as sub-amostras foram retiradas utilizando-se um amostrador com
capacidade de 10ml, composto por uma haste presa a um pequeno copo. Nos
experimentos que utilizaram sedimento arenoso no fundo das caixas a retirada dos
copépodos deste era feita por dez lavagens ou elutriagens do sedimento usando a água
do próprio cultivo após passar pela peneira de 63µm.
A taxa intrínseca de crescimento (r em dias
-1
) foi calculada segundo Odum
(1988), utilizando os dados de número total médio de indivíduos existentes no início
dos cultivos (Ni) e o número total médio de indivíduos existentes no primeiro pico
populacional (Nmax): r = (ln Nmax – ln Ni) / Tempo em dias.
A Análise de Variância foi utilizada para determinar as possíveis diferenças entre
os tratamentos, após ser testada a normalidade dos resíduos e a homogeneidade das
variâncias. O teste de Tukey foi usado posteriormente para comparar as médias duas a
duas (ZAR, 1999).
O trabalho constou de cinco experimentos.
Experimento 1 - Efeito da coleta semanal de prole
Este experimento teve como objetivo testar se a coleta semanal de prole,
constituída
de
náuplios
e
copepoditos,
afeta
significativamente
o
crescimento
populacional dos copépodos.
A coleta de prole foi realizada com auxílio de peneiras granulométricas de 250 e
63µm de abertura de malha, acopladas a um balde vazado. O conteúdo da caixa de
cultivo de copépodos foi vertido na peneira de 250µm, que proporciona a passagem dos
náuplios e copepoditos para a peneira de 63µm. Assim tivemos a maioria dos
copépodos adultos retidos na peneira de 250µm e a maioria da prole retida na peneira de
63µm.
10
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Das seis caixas de cultivo apenas três foram submetidas à coleta semanal de prole.
O número de copépodos foi estimado semanalmente, ao longo de quatro semanas,
através de três sub-amostras por caixa. A proporção das sub-amostras foi inicialmente
de 10/600ml e com o crescimento da população passou a ser de 10/3000ml.
Experimento 2 - Efeito da presença de sedimento are noso nas caixas de cultivo
O objetivo deste experimento foi testar se a presença de sedimento arenoso afeta
significativamente o crescimento populacional dos copépodos.
Ao final do experimento anterior, o sedimento foi retirado de três das seis caixas de
cultivo, escolhidas aleatoriamente. A prole das seis caixas foi coletada e os copépodos
retidos em 250 µm usados para mais uma semana em cultivo, seguindo a mesma
metodologia anteriormente descrita.
Experimento 3 - Sustentabilidade dos cultivos - Primeira etapa realizada entre 29
de junho a 05 de novembro de 2003
Este experimento teve como objetivo acompanhar se a produção de copépodos
poderia se manter em altas densidades e com alta produção de prole por períodos
superiores a um mês.
Os copépodos produzidos nos experimentos anteriores foram concentrados e
levados para a Estação de Aqüicultura do IPA. Após serem colocados em 20 litros de
água do mar foi realizada uma amostragem inicial, com a retirada de três sub-amostras
na proporção de 10/20000ml. Em seguida, cada litro foi usado para iniciar um novo
cultivo de 5 litros, que foi mantido por um período de 130 dias.
A evolução dos cultivos foi acompanhada através de amostragens realizadas
semanalmente e nos dias de coleta de prole. Devido ao grande número de réplicas (20)
só foi realizada uma sub-amostra de 10ml por caixa na proporção de 10/4000ml.
A produção de prole foi plotada diariamente e na maioria dos casos apenas uma
caixa era usada para esta coleta, o que impede a plotagem de desvio padrão para esta
variável para cada dia de coleta. O número total de copépodos no cultivo foi plotado
semanalmente ou em intervalos menores agrupando estimativas feitas com no máximo
três dias de intervalo. Algumas vezes o número total de uma caixa era usado antes e
depois da coleta de prole para estimativa do número médio em determinado dia o que
tende a aumentar os intervalos de confiança estimados.
11
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Experimento 4 - Sustentabilidade dos cultivos - Segunda etapa realizada de 14 de
janeiro a 20 de março de 2004
O objetivo foi avaliar o crescimento da população de copépodos e a produção de
prole, comparando-os aos do experimento anterior.
Dez caixas de cultivo de copépodos foram mantidas por um período aproximado
de dois meses. A evolução dos cultivos foi acompanhada através de amostragens
realizadas a cada seis dias e nos dias de coleta de prole. Devido ao grande número de
réplicas (10) só foi realizada uma sub-amostra de 10ml por caixa na proporção de
10/4000ml.
Experimento 5 - Tempo de recuperação do cultivo após a coleta de prole
Cinco caixas de cultivo de copépodos foram submetidas à coleta de prole. Os
copépodos retidos na peneira de 250µm foram devolvidos para as caixas e submetidos a
uma amostragem diária, na proporção de 10/4000ml, por um período de uma semana
com o objetivo de avaliar o tempo de recuperação da população de copépodos após a
retirada da prole.
12
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
4. Resultados
Experimento 1 - Efeito da coleta semanal de prole
Nas Figuras 4 e 5 podem ser observados os resultados do número total de
indivíduos e do número de náuplios do experimento que testou o efeito da coleta
semanal de prole em cultivos de 5 litros.
O resultado da Análise de Variância demonstra não haver diferença significativa
entre as médias finais do número total de copépodos e do número total de náuplios (p =
0,6389 e 0,6749, respectivamente) com ou sem coleta de prole. Indicando que a coleta
semanal de prole nas caixas de cultivo não afeta o crescimento da população de T.
biminiensis.
O maior número total obtido por caixa foi de 250.000 indivíduos e a maior
densidade alcançada neste experimento foi 50 ind/ml com 21 dias de cultivo.
A produção de prole total (náuplios e copepoditos) chegou a 70% da população
total no 21o dia de cultivo e a retirada de náuplios alcançou 82% do número total de
náuplios no mesmo dia.
300000
Número total
250000
200000
150000
100000
50000
0
0
5
10
15
20
25
30
Dias de cultivo
SEM COLETA PROLE
COM COLETA DE PROLE
PROLE PRODUZIDA
Figura 4- Médias e desvios padrões do número total de Tisbe biminiensis em cultivos
de 5 litros nos tratamentos com coleta de prole e sem coleta de prole e produção de
prole ao longo de 28 dias de cultivo.
13
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Número de náuplios
180000
160000
140000
120000
100000
80000
60000
40000
20000
0
0
5
10
15
20
25
30
Dias de cultivo
SEM COLETA PROLE
COM COLETA DE PROLE
NÁUPLIOS COLETADOS
Figura 5 - Médias e desvios padrões do número de náuplios de Tisbe biminiensis em
cultivos de 5 litros nos tratamentos com coleta de prole e sem coleta de prole e náuplios
coletados na prole ao longo de 28 dias de cultivo.
Experimento 2 - Efeito da presença de sedimento arenoso nas caixas de cultivo
Na Figura 6 podem ser observados os resultados do experimento que testou o
efeito da presença de sedimento nos cultivos de 5 litros.
O resultado da Análise de Variância mostrou não haver diferenças significativas
entre as médias iniciais de náuplios, copépodos, fêmeas portando saco de ovos e número
total de copépodos (p = 0,4690, p = 0,0634, p = 0,8376 e p = 0,1950), o que indica que
os cultivos realizados com e sem sedimento arenoso foram iniciados com um número
estatisticamente igual de indivíduos. O resultado da Análise de Variância comparando
as médias finais não constatou diferenças significativas no número de náuplios,
copépodos, fêmeas ovígeras e total de copépodos (p = 0,6011, p = 0,2185, p = 0,9086 e
p = 0,7049) nas caixas com e sem o sedimento arenoso, sugerindo que a presença de
sedimento nos recipientes não afeta o crescimento da população. O número de náuplios,
copépodos, fêmeas ovígeras e total de copépodos existentes na prole produzida nos
cultivos com e sem sedimento arenoso também foi considerado estatisticamente igual
pela Análise de Variância (p = 0,6486, p = 0,0503, p = 0,4852, p = 0,8908), indicando
que a presença do sedimento arenoso não altera a produção de prole.
14
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Número de indivíduos
300000
250000
Cultivo sem sedimento
Cultivo com sedimento
no fundo dos recipientes
no fundo dos recipientes
200000
150000
100000
50000
COPÉPODOS
L
O
FI
F. OVADAS
PR
N
A
E
L
L
IC
PR
NÁUPLIOS
IN
O
L
IA
E
L
A
N
FI
IN
IC
IA
L
0
TOTAL
Figura 6 - Médias e desvios padrões do número de Tisbe biminiensis em cultivos de 5
litros e prole coletada nos tratamentos com sedimento e sem sedimento após uma
semana.
Experimento 3 - Sustentabilidade dos cultivos - Primeira etapa realizada entre 29
de junho a 05 de novembro de 2003
Nas Figuras 7 e 8 estão expressos os resultados obtidos durante a primeira etapa
do experimento de sustentabilidade dos cultivos. A população alcançou o número de
432.550 indivíduos no 22o dia de cultivo, mas este valor caiu para aproximadamente
150.000 ± 28.888,19 (média ± desvio padrão) indivíduos no 48o dia e se manteve neste
patamar até o final do experimento. Os náuplios representaram a maior parte da
população (média de 55%), enquanto a proporção de fêmeas portando ovos teve média
de 5% da população.
No período entre os dias 54 e 90 de cultivo observou-se que os intervalos de
confiança foram menores. Neste período não houve coleta de prole para ser usada na
larvicultura de M. rosenbergii, experimento descrito no capítulo 2 deste trabalho.
15
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
600000
POPULAÇÃO TOTAL
NÁUPLIOS
Número total
500000
400000
300000
200000
100000
0
0
20
40
60
80
100
120
140
Tempo de cultivo (dias)
Figura 7 - Médias e intervalos de confiança da população total e náuplios de Tisbe
biminiensis em cultivos de 5 litros realizados na Estação de Aqüicultura do IPA durante
a primeira etapa de 130 dias.
180000
COPÉPODOS
FÊMEAS OVADAS
160000
Número total
140000
120000
100000
80000
60000
40000
20000
0
0
20
40
60
80
100
120
140
Tempo de cultivo (dias)
Figura 8 - Médias e intervalos de confiança do número de copépodos e fêmeas ovadas
de Tisbe biminiensis em cultivos de 5 litros realizados na Estação de Aqüicultura do
IPA durante a primeira etapa de 130 dias.
16
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
A produção diária de prole está representada na Figura 9. Observa-se que a
produção foi relativamente constante e teve média geral de 123.914,7 ± 37.214,14, o
que representa uma coleta média de 59% da população. Esta proporção foi estabelecida
com base nos dados médios do número total de copépodos produzidos no mesmo
período, que foi de 208.093,85 ± 93.308,92.
Neste experimento, a partir de uma população inicial de 36.600 indivíduos
obteve-se 432.550 em 22 dias, o que resulta numa taxa intrínseca de crescimento (r) de
0,11.
Produção diária de prole
250000
Primeiro experimento
de larvicltura
Segundo experimento de
larvicultura
COPÉPODOS
NÁUPLIOS
200000
150000
100000
50000
0
14
39
44
49
90
95
100
106
114
124
Tempo de cultivo (dias)
Figura 9 - Produção de prole de Tisbe biminiensis em cultivos de 5 litros realizados na
Estação de Aqüicultura do IPA durante o cultivo em massa realizado na primeira etapa
de 130 dias.
A partir do 96º dia de cultivo, do primeiro experimento de sustentabilidade dos
cultivos, foi detectada a contaminação por parte de turbelários nas caixas de cultivo de
copépodos. O aspecto geral dos cultivos se modificou quando esta contaminação
aumentou. Para solucionar o problema novo cultivo de copépodos deveria ter sido
iniciado, mas como a contaminação foi detectada quando o experimento de larvicultura
(capítulo 2) já se encontrava em andamento, outras medidas tiveram que ser tomadas. A
partir da detecção desta contaminação a água dos cultivos, que anteriormente só era
filtrada em filtro cuno de 3 µm, passou a ser clorada e posteriormente declorada com
tiosulfato de sódio. Para minimizar o problema, as proles de algumas caixas mais
contaminadas foram desprezadas uma vez que a maior parte dos turbelários passava
pela peneira de 250 µm.
17
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Experimento 4 - Sustentabilidade dos cultivos - Segunda etapa realizada de 14 de
janeiro a 20 de março de 2004
As Figuras 10 e 11 representam os resultados obtidos na segunda etapa do
experimento de sustentabilidade dos cultivos. Após um rápido aumento no número de
indivíduos entre o 32º e 34º dia de cultivo a população se manteve estável com média de
256.440,14 ±42.684,5. Os náuplios e as fêmeas portando saco de ovos tiveram uma
representatividade média de 56 e 6%, respectivamente, da população total. Os intervalos
de confiança foram menores até o 30º dia de cultivo, pois nesse período ainda não tinha
sido iniciada a coleta de prole para a alimentação de larvas de M. rosenbergii (capítulo
2).
500000
POPULAÇÃO TOTAL
NÁUPLIOS
450000
400000
Número total
350000
300000
250000
200000
150000
100000
50000
0
0
10
20
30
40
50
60
70
Tempo de cultivo (dias)
Figura 10 - Médias e intervalos de confiança da população total e náuplios de Tisbe
biminiensis em cultivos de 5 litros realizados na Estação de Aqüicultura do IPA durante
a segunda etapa de 70 dias.
18
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
250000
COPÉPODOS
FÊMEAS OVADAS
200000
Número total
150000
100000
50000
0
0
10
20
30
40
50
60
70
Tempo de cultivo (dias)
Figura 11 - Médias e intervalos de confiança do número de copépodos e fêmeas ovadas
de Tisbe biminiensis em cultivos de 5 litros realizados na Estação de Aqüicultura do
IPA durante a segunda etapa de 70 dias.
A Figura 12 representa a produção diária de prole. Observa-se que a produção
foi relativamente constante e teve média geral de 143.338,75 ± 55.844,4 indivíduos, o
que representa uma coleta média de 59% da população.
Nesta segunda etapa obteve-se, a partir de uma média inicial de 14.433,33
indivíduos, no 34º dia de cultivo um total de 286.400. A taxa intrínseca de crescimento
estimada (r) com estes valores foi de 0,08.
19
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
300000
COPÉPODOS
NÁUPLIOS
Produção diária de prole
250000
200000
150000
100000
50000
0
30
34
42
45
50
54
58
64
Tempo de cultivo (dias)
Figura 12 - Produção de prole de Tisbe biminiensis em cultivos de 5 litros realizados na
estação de aqüicultura do IPA durante o cultivo em massa realizado na segunda etapa de
70 dias.
Experimento 5 - Tempo de recuperação do cultivo após a coleta de prole
Na Figura 13 encontram-se representados os resultados do experimento que
avaliou o tempo que os cultivos levam para se restabelecer após a retirada da prole.
A Análise de Variância demonstrou haver diferença significativa no número
total de copépodos produzidos ao longo do período de sete dias (p < 0,001). O teste de
Tukey demonstrou que a média do número total de copépodos existentes antes da
retirada da prole é estatisticamente diferente das médias até o terceiro dia de cultivo. A
partir do quarto dia a população já se encontra restabelecida apresentando média total de
indivíduos estatisticamente igual ao valor antes da retirada da prole. A proporção média
de náuplios existentes nos cultivos a partir do quarto dia após a retirada da prole, foi de
60% em relação ao número total de indivíduos. Antes da retirada da prole esta
proporção era de 55%.
20
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
500000
Número total
a
400000
a
a
300000
a
b
200000
b
a
b
b
100000
7
6
5
4
3
2
1
de
po
is
an
te
s
0
Tempo (dias)
Figura 13 – Médias e desvios padrões do número total de copépodos existentes em 5
caixas de cultivo antes e depois da retirada da prole e a evolução da recuperação dos
cultivos durante sete dias. Letras iguais representam médias não estatisticamente
diferentes pelo teste de Tukey.
21
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
5. Discussão
O experimento que testou o efeito da coleta semanal da prole sobre o
crescimento populacional dos copépodos mostrou que a população de Tisbe biminiensis
não foi afetada pela retirada semanal da prole. Isto confirma o alto potencial reprodutivo
para esta espécie já relatado anteriormente por Pinto et al. (2001), que registraram taxa
exponencial máxima de crescimento de 0,49.
A semelhança entre as densidades observada nos cultivos em que não houve a
coleta semanal da prole pode ser explicada por algum tipo de controle populacional.
Fava & Crotti (1979) verificaram, para duas espécies do gênero Tisbe, que com o
aumento da densidade a produção de náuplios por fêmeas decresce. Os autores
sugeriram que a liberação de compostos químicos complexos específicos ou resíduos
tóxicos não-específicos (como amônia ou dióxido de carbono) pelos animais na água do
cultivo modifica a fisiologia dos animais, resultando na diminuição da fertilidade. Esta
sugestão também é reportada por Gaudy & Guerin (1982), quando, num estudo sobre a
dinâmica populacional do Tisbe holothuriae, observaram que a taxa de mortalidade
diminuiu após a renovação total da água aliada à coleta de animais, e que esta voltou a
aumentar, após 18 dias sem renovação de água e coleta de animais. Sugere-se então, que
a retirada da prole contribui para manter a taxa de crescimento populacional dos
copépodos mais próxima de seus valores máximos.
Segundo Hicks & Coull (1983), Harpacticoida é uma ordem primariamente
bêntica de vida livre, podendo apresentar três tipos de hábitos relacionados ao
sedimento: intersticial, escavador ou epibêntonico (vivendo na superfície). De acordo
com os resultados obtidos neste trabalho, a presença de sedimento arenoso nos
recipientes de cultivo não foi importante para promover um maior crescimento
populacional dos copépodos. Outras espécies de harpacticóides bentônicos, como
Cletocamptus deitersi, são mais dependentes do sedimento (FERREIRA, 2003). Esta
diferença pode estar relacionada ao hábito epibêntico da espécie Tisbe biminiensis.
Comparando os valores da taxa intrínseca de crescimento (r) obtidos neste
estudo (0,08 e 0,11) com os de outras espécies de copépodos harpacticóides já
cultivadas, observa-se uma grande semelhança de valores.
Fukusho (1980) cultivando
Tigriopus japonicus em combinação com o rotífero Brachionus plicatilis, a partir de 15
ind./l em tanques com 210.000 litros ao final de 35 dias obteve
22.048 ind./l,
22
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
apresentando r de 0,21. Kahan (1981) cultivou Schizopera elantensis, em vários
volumes de água em aquário de vidro retangular (30x16x20cm), inicialmente com 37
ind./ml atingiu 412 ind./ml em 500ml e 66 ind./ml em 6 litros em 55 dias, com r de 0,04
a 0,01, respectivamente. Kahan et al (1981/1982) cultivou Tisbe sp. em aquários com
1,5 litros e área de 200cm2 de um total de 55.069 indivíduos atingiu em 21 dias um total
de 173.700 ou 115,8 ind./ml, apresentando r de 0,05. Gaudy & Guerin (1982)
observaram para a espécie Tisbe holothuriae, cultivada em 10 litros, um valor máximo
de r igual a 0,2 embora este valor caia para muito próximo a zero, levando estes autores
a atribuírem este baixo valor ao longo período que a população passou sem renovação
da água e coleta de indivíduos. Vilela (1984) a partir de 20 fêmeas de Tigriopus
brevicornis em recipientes com um volume de 100ml obteve, ao final de 21 dias, 5.000
indivíduos e r de 0,26. Tseng & Hsu (1984) cultivaram Tigriopus japonicus em
béqueres com 300ml de água do mar, 10 fêmeas ovígeras produziram em 21 dias 27600
indivíduos ou 92 ind/ml com um r de 0,38. Ferreira (2003), a partir 10 fêmeas ovígeras
de Cletocamptus deitersi cultivadas em recipientes plásticos contendo 500ml de água do
mar e sedimento, atingiu ao final de 57 dias 10.000 indivíduos em 500ml, resultando em
r de 0,121. Araújo (2004) testou a influência da salinidade no crescimento populacional
de Cletocamptus deitersi e obteve valor de r igual a 0,378. Conclui-se que embora
algumas espécies de harpacticóides tenham superado T. biminiensis em termos de
densidade, principalmente espécies de menor porte, os valores de taxa intrínseca de
crescimento obtidos neste trabalho encontram-se dentro da média para as espécies
pertencentes à mesma ordem.
Em outros estudos realizados com Tisbe biminiensis, Pinto et al. (2001) estimou
a partir da tabela de vida a taxa máxima de crescimento em 0,49 quando a espécie se
alimentou da diatomácea Nitzschia closterium. Pastor (2003), a partir de 10 fêmeas
portando sacos de ovos, obteve ao final de 24 dias um total de 43.544 indivíduos o que
representa um r de 0,35 e densidade de 87 ind./ml. Esta última autora determinou o
valor de r partindo de um número inicial de copépodos muito inferior aos utilizados no
presente trabalho, os quais devem se aproximar mais da capacidade de suporte da
população, e por isto resultando num valor de r menor. Já a densidade aqui obtida, no
pico populacional, foi de 86,5 ind./ml, ou seja, a mesma obtida em 500 ml por Pastor
(2003). Kahan (1981) cultivando Schizopera elantensis em 500 ml atingiu 412 ind./ml e
r de 0,04 enquanto que em 6 litros obteve 66 ind./ml e r de 0,01, ou seja, encontrou o
mesmo decréscimo de r com o aumento de volume que foi obtido neste estudo.
23
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
A produção contínua de copépodos para fornecimento como alimento de larvas
foi bem menos estudada que o crescimento populacional em laboratório. Na Tabela 1
podem ser observados os resultados de produção de copépodos obtidos por alguns
autores que utilizaram diferentes métodos para cultivo em massa.
Tabela 1 - Produção obtida para algumas espécies de copépodos cultivados com
diferentes métodos.
Espécie cultivada
Tamanho do
cultivo
10 litros
Tisbe holothuriae
Produção
Fonte
7.140 ind/l/dia
Gaudy & Guerin
(1982)
Sun & Fleeger
(1995)
Amphiascoides
atopus
4m2 e 1440 litros
Tisbe holothuriae
0,24m2 e 3 litros
Gladioferens
imparipes
500 l
878 náuplios/l/dia
0,15m2 e 5 litros
28.000 náuplios e
copepoditos/l/dia
932.400 náuplios e
copepoditos/m2/dia
Tisbe biminiensis
2.000 ind/l/dia
720.000 ind/m2/dia
100.000 náuplios/l/dia
1.250.000 náuplios/m2/dia
Stottrup &
Norsker (1997)
Payne &
Rippingale
(2001)
Presente estudo
Gaudy & Guerin (1982) cultivaram Tisbe holothuriae em volumes de 10 litros,
com alimentação à base de uma dieta composta (Tetramin), taxa de coleta igual a 50% e
renovação de água uma vez por semana ou intervalos de 10 a 12 dias. Os autores
conseguiram uma boa produção diária, mas que não se manteve por muitos dias,
sugerindo que a maior taxa de renovação de água e coleta de copépodos proporciona o
aumento da população e produção.
Sun & Fleeger (1995) desenvolveram o cultivo em massa de Amphiascoides
atopus em tanques de 120x60x70 cm ou 120x60x30 cm, totalizando 4 m2 de área e 1440
litros, utilizando o sistema de recirculação com fluxo contínuo. Os copépodos eram
alimentados diariamente com a alga Chaetocerous muelleri e com ração para peixe,
fornecida de dois em dois dias. Através da circulação da água, os copépodos eram
depositados em sacos coletores de abertura de malha de 120ìm que eram removidos a
cada dois dias. A produção diária aumentou durante o experimento e se manteve alta
até o fim do experimento.
24
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Stottrup & Norsker (1997) obtiveram como técnica mais eficiente o cultivo de
Tisbe holothuriae em bandejas rasas de área 0,24m2 contendo 3 litros de água do mar,
onde os copépodos eram alimentados com 400ml da alga Rhodomonas baltica.
Diariamente o conteúdos das bandejas era filtrado por um filtro de 220ìm, que retinha
quase que somente as fêmeas ovadas que posteriormente eram repostas nos cultivos.
Um
filtro de 40ìm retinha os náuplios que eram coletados diariamente. A produção
obtida, 100.000náuplios/l/dia ou 1.250.000 náuplios/m2/dia, foi a maior já descrita para
copépodos.
Payne & Rippingale (2001) compararam a produção de náuplios em cultivo
automatizado em batelada com o semi-contínuo para o copépodo calanóide planctônico
Gladioferens imparipes. A técnica mais eficiente foi o cultivo em batelada de 500 litros.
Nesta técnica os copépodos eram alimentados com Isochrysis galbana, os náuplios eram
atraídos pela luz e posteriormente retidos em uma tela de 150ìm onde diariamente eram
coletados. A produção alcançada foi de 878 náuplios/l/dia.
No presente trabalho os copépodos foram produzidos em caixas plásticas de
2
0,15m de superfície contendo 5 litros de água do mar, com renovação da total da água a
cada dois dias. A alimentação foi com diatomáceas a cada dois dias e ração para peixe
todos os dias. Tanto o procedimento de troca de água como de coleta de prole foi
realizado manualmente. A prole produzida (náuplios e copepoditos) foi removida após o
conteúdo da caixa de cultivo ser vertido em uma peneira granulométrica de 250ìm que
permite apenas a passagem de copépodos no estágio de náuplio e fases iniciais de
copepodito. A produção de prole de T. biminiensis obtida no segundo experimento de
longa duração, teve média de 28.000 náuplios e copepoditos/l/dia ou 932.400 náuplios e
copepoditos/m2/dia. Esta produção é inferior apenas aos resultados obtidos para T.
holothuriae por Stottrup & Norsker (1997), que utilizou uma técnica de cultivo
semelhante.
Comparando os resultados obtidos no presente trabalho com os obtidos por
Stottrup & Norsker (1997) no cultivo do T. holothuriae, observa-se que superfície de
cultivo utilizada por estes autores é um pouco superior à utilizada no presente trabalho.
Considerando que as espécies em questão apresentam hábitos bentônicos, a superfície
de cultivo é um fator de grande importância, assim um aumento na superfície de cultivo
tenderia a promover um acréscimo no número de indivíduos devido à maior oferta de
espaço, embora o estudo de Sun & Fleeger (1995) realizado em área bem maior não
corrobore esta hipótese. Outra diferença metodológica utilizada por estes autores foi a
25
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
renovação diária da água de cultivo. Pastor (2003) observou que uma maior freqüência
de trocas de água nos cultivos de T. biminiensis foram responsáveis por um maior
crescimento da população. A partir destes registros, sugere-se um aumento na área de
cultivo e renovações diárias da água propiciarão um aumento na produção de
indivíduos.
Na Tabela 2 pode-se observar um resumo dos resultados obtidos durante os dois
momentos em que a sustentabilidade dos cultivos por longos períodos foi avaliada.
Tabela 2 – Resumo dos resultados obtidos nos dois experimentos de sustentabilidade
dos cultivos de Tisbe biminiensis (média ± desvio padrão).
1º etapa
_
X do total de indivíduos
a partir da estabilização
da população
150.000 ±28.888
123.914 ±37.214
2º etapa
256.440 ±42.686
143.338 ±55.844
Período
_
X prole produzida
ao longo do período
r (início até o
primeiro pico
populacional)
0,11
0,08
_
X
densidade
(ml)
30 ind/ml
51 ind/ml
A produção de prole ao longo dos dois períodos pode ser considerada igual, uma
vez que os desvios das médias se tocam, porém a média de indivíduos produzidos, a
partir do momento que se observou uma estabilização da população, é inferior para o
primeiro período em que o experimento foi realizado. A contaminação por turbelários,
detectada durante a realização do primeiro experimento, pode ter tido influência sobre
os resultados obtidos neste período, uma vez que estes animais podiam competir com os
copépodos por espaço, oxigênio e alimento, podendo mesmo agir como predadores de
copépodos. Os maiores cuidados com relação ao tratamento da água de cultivo,
adotados desde o início da realização do segundo experimento, provavelmente vieram a
contribuir com os melhores resultados obtidos.
Com a realização do teste de recuperação dos cultivos após a retirada da prole,
pode-se concluir que o restabelecimento destes foi satisfatório, uma vez que em menos
de uma semana a população volta a atingir a mesma densidade registrada anteriormente.
Outro ponto importante observado com a realização deste experimento foi que o
restabelecimento dos cultivos não se deu apenas em relação aos números totais de
indivíduos, mas também em relação ao número de náuplios. Este fato é de grande
importância já que foi observado, tanto nos resultados de coleta semanal como nos de
coleta diária, como sendo este o estágio de desenvolvimento de presença dominante no
26
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
conteúdo da prole. Estes resultados indicam que se pode coletar a prole de cada caixa a
cada quatro dias.
Stottrup (2000), fazendo uma revisão sobre os sistemas de produção de
copépodos, seu valor nutricional e seu potencial para uso como alimento vivo na
aqüicultura, já discutia sobre o reduzido número de estudos enfocando técnicas de
cultivo em massa em grandes volumes, afirmando que um conhecimento básico sobre a
fisiologia e dinâmica populacional de uma espécie é uma condição prévia para o
desenvolvimento de técnicas de cultivo. A espécie Tisbe biminiensis já dispõe de um
grande nú mero de informações sobre sua dinâmica populacional e técnicas de cultivo
em volumes de 500ml (PINTO et al., 2001; ARAÚJO-CASTRO, 2002; FERREIRA,
2003 e PASTOR, 2003).
Com o desenvolvimento do cultivo em massa em volumes de cinco litros pôdese observar que esta espécie cresce bem com técnicas de cultivo relativamente simples.
Como conseqüência do aprimoramento destas técnicas a tendência é a obtenção de
resultados ainda mais satisfatórios, que virão reforçar ainda mais a possibilidade do uso
do copépodo Tisbe biminiensis como uma alternativa de alimento vivo em larviculturas
de peixes e crustáceos.
27
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
6. Considerações finais
A partir dos resultados obtidos, foi possível estabelecer uma técnica de cultivo
que permitiu um aumento importante na população do copépodo Tisbe biminiensis em
volumes de 5 litros.
A estabilidade da população e da produção de prole nos cultivos de longa
duração comprovam a sustentabilidade da técnica desenvolvida embora tanto a
densidade quanto a produção de prole ainda possam ser ampliadas.
O tempo de recuperação dos cultivos após a retirada da prole, quatro dias, foi
satisfatório se considerarmos a grande demanda de alimento exigida pelas larviculturas
que futuramente possam vir a utilizar essa espécie de copépodo como fonte de alimento.
28
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Capítulo 2
Utilização do Copépodo Bentônico Tisbe biminiensis
(Harpacticoida) na Larvicultura do Camarão Macrobrachium
rosenbergii (Palaemonidae).
29
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
1. Introdução
A produção mundial de camarões de água doce do gênero Macrobrachium é um
dos setores da aqüicultura que mais cresce no mundo, tendo aumentado mais de 1300%
na última década (VALENTI, 2004).
O sucesso na produção comercial de pós-larvas de Macrobrachium rosenbergii e
de outros crustáceos decápodes depende do uso de uma alimentação eficaz e disponível
(BARROS & VALENTI, 2003a). Atualmente náuplios recém eclodidos de Artemia
constituem a principal alimentação viva usada no larvicultura de crustáceos de valor
comercial. Apesar das inúmeras vantagens apresentadas por este microcrustáceo, o
número limitado de locais de produção e a relação direta entre a produtividade e o clima
causou problemas com a disponibilidade de cistos. A vulnerabilidade dos estoques,
grandes diferenças na qualidade, em termos de taxa de eclosão e composição
nutricional, além da intensa produção industrial de camarões e peixes, acrescentaram
uma alta considerável aos preços dos cistos (LAVENS & SORGELOOS, 1998), o que
transformou a alimentação em um dos itens mais caros para a produção de pós-larvas.
Sendo um recurso natural limitado e de disponibilidade variável, é de grande
interesse para a expansão futura da aqüicultura que sejam encontradas maneiras de
minimizar o uso dos cistos de Artemia nos sistemas de produção intensiva de larvas e
pós-larvas.
Vários autores realizaram estudos para avaliar os feitos da redução da oferta de
Artemia nos cultivos de peixes e crustáceos. Heath e Moore (1997) compararam as taxas
de crescimento e desenvolvimento larval e de juvenis de linguado (Solea solea)
alimentados com o copépodo Tisbe holothuriae e com náuplios de Artemia, constatando
não haver diferença significativa entre os tratamentos. Payne e Rippingale (2000),
alimentaram juvenis do cavalo marinho Hippocampus subelongatus, com náuplios de
copépodo Gladioferens imparipes e com náuplios de Artemia enriquecida e observaram
que o crescimento e a sobrevivência foram significativamente maiores entre peixes
alimentados com os náuplios de copépodo. Domingues et al. (2000) observaram que
uma substituição de 66% dos náuplios de Artemia pelo rotífero Brachionus plicatilis
não ocasiona diferença significativa na sobrevivência e no crescimento de Leptomysis
sp., um microcrustáceo utilizado em testes ambientais. Callan et al. (2003) obtiveram
30
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
sobrevivência estatisticamente igual para as larvas do peixe Gadus morhua quando
testaram diferentes níveis de substituição de Artemia por uma dieta microparticulada.
A redução da Artemia usada na larvicultura do M. rosenbergii foi mais
recentemente estudada por Silva (1994) que ao avaliar o efeito da substituição da
Artemia sp. pelo nematóide Panagrellus redivivus sobre o crescimento e sobrevivência
larval, constatou haver uma superioridade estatística do tratamento controle sobre os
demais tratamentos. Thomaz (2002) testou a substituição dos náuplios de Artemia pelo
rotífero Brachionus plicatilis, obtendo resultados de sobrevivência final em pós-larvas
estatisticamente iguais, para os tratamentos que substituíram parcialmente a Artemia.
Kovalenko et al. (2002) acompanharam o desenvolvimento, do 5º estágio até a
metamorfose, de larvas alimentadas com Artemia e uma dieta microparticulada úmida,
obtendo sobrevivência estatisticamente igual em todos os tratamentos.
Diante deste contexto, este estudo teve como objetivo testar o copépodo
bentônico Tisbe biminiensis como substituto parcial ou total dos náuplios de Artemia na
alimentação das larvas do camarão Macrobrachium rosenbergii.
31
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
2. Objetivos
2.1. Geral
ü Avaliar o desempenho do copépodo Tisbe biminiensis como substituto total ou
parcial da Artemia na alimentação das larvas de Macrobrachium rosenbergii.
2.2. Específico
ü Comparar a sobrevivência das larvas e pós-larvas de M. rosenbergii alimentadas
com o copépodo Tisbe biminiensis em diferentes níveis de substituição de
náuplios de Artemia: 0, 25, 50, 75 e 100%.
32
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
3. Material e Métodos
Os testes de avaliação do copépodo Tisbe biminiensis como substituto da
Artemia na larvicultura do camarão de água doce Macrobrachium rosenbergii foram
realizados no Laboratório de Larvicultura da Empresa Pernambucana de Pesquisa
Agropecuária – IPA – Estação Experimental de Ipojuca/PE, nos períodos de 25 de
setembro a 13 de novembro de 2003 e de 13 de fevereiro a 23 de março de 2004.
A metodologia de cultivo utilizada, para ambos os períodos, foi a mesma
empregada no laboratório do IPA, que utiliza o sistema aberto de produção descrito por
Correia e Castro (1998).
Foram utilizadas larvas no estágio Zoea I, obtidas a partir de
desovas realizadas no próprio laboratório do IPA. O experimento foi conduzido através
um delineamento inteiramente casualizado com cinco tratamentos e quatro réplicas,
onde cada tratamento representou a introdução do copépodo T. biminiensis na
alimentação das larvas de M. rosenbergii em diferentes níveis de substituição da
Artemia: 0, 25, 50, 75 e 100%.
As larvas foram transferidas do tanque de eclosão por meio de sifonamento para
baldes coletores e a estocagem foi feita em 20 tanques de cultivo cônicos de cor preta
confeccionados em fibra de vidro com capacidade para 50 litros, os quais foram
acondicionados quatro a quatro dentro de cinco tanques de amianto, usando como
suporte baldes plásticos de 80 litros com o fundo preenchido com areia (Figura 14). Em
cada tanque foram estocadas 2.000 larvas, contadas individualmente, em 40 litros de
água salobra, conferindo ao experimento uma densidade de cultivo de 50 larvas/litro.
Figura 14 – Tanques de
Macrobrachium rosenbergii.
cultivo
experimentais
utilizados
na
larvicultura
do
33
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Os tanques de cultivo foram numerados de 1 a 20 e através de sorteio foi
estabelecido o tratamento que cada tanque comportaria ficando definido que os tanques
5, 12, 13 e 16 receberiam o tratamento 1 - 0% de substituição de Artemia (controle); os
tanques 1, 6, 8 e 9 comportariam o tratamento 2 - 25% de substituição de Artemia; os
tanques 4, 7, 18 e 20 armazenariam o tratamento 3 - 50% de substituição de Artemia; os
tanques 10, 14, 15 e 17 comportariam o tratamento 4 - 75% de substituição de Artemia e
por fim que os tanques 2, 3, 11 e 19 receberiam o tratamento 5 - 100% de substituição
de Artemia.
A salinidade, medida com refratômetro, foi de 12°/oo durante todo o cultivo. Para
manter a temperatura dentro dos padrões recome ndados (de 28 a 30º C) foram utilizados
aquecedores elétricos com capacidade de 80 Watts cada. Estes aquecedores foram
ligados somente após a circulação da água e por um período suficiente para que a
temperatura da água atingisse novamente os valores recomendados. Diariamente, de
manhã e à tarde, a temperatura dos cultivos era aferida por meio de termômetro de
álcool. A aeração foi mantida forte e constante de modo que permitisse boas condições
de vida às larvas, e suspensão adequada das partículas alimenta res.
Diariamente, por volta das 14:30 h, após a interrupção da aeração, os tanques
foram sifonados, utilizando-se uma mangueira que aspirava o fundo e as paredes destes,
visando a retirada de dejetos e restos alimentares. Em seguida tiveram sua água
totalmente renovada por meio de circulação, evitando dessa forma a concentração de
nitrito e amônia mantendo assim, a qualidade da água de cultivo. O processo de
circulação se deu através da entrada de água, por meio de mangueiras conectadas a
terminais de água salobra, simultânea à saída. A passagem das larvas era interrompida
pelo uso de dois drenos cilíndricos de PVC telados, um para os cultivos alimentados
com copépodos e o outro para os alimentados exclusivamente com Artemia, visando
evitar possíveis contaminações, no cultivo controle, por microorganismos que poderiam
estar presentes nos cultivos de copépodos.
Os horários das alimentações variaram de acordo com a observação de sobras
sendo, na maioria das vezes, o alimento vivo fornecido às 8:00 e 16:00 h. A quantidade
de náuplios de Artemia e copépodos fornecidos no primeiro experimento foi sempre 5
náuplios/larva/dia. No segundo experimento a quantidade foi inicialmente de 5
náuplios/larva/dia passando para 10 náuplios/larva/dia a partir do 10º dia de cultivo.
34
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Os náuplios de Artemia utilizados nos experimentos foram obtidos de cistos
provenientes da região de Grossos – RN, com uma eficiência de eclosão de 270.000
náuplios/g. Os cistos passaram por um processo de hidratação em água doce e de
desinfecção com hipoclorito de sódio comercial adicionado à água de hidratação e
posteriormente postos para eclodir em carboys com água a uma salinidade de 12 º/oo,
munidos de fonte de luz artificial e aeração constante.
No processo de coleta dos náuplios de Artemia, a aeração do carboy foi
interrompida por um período aproximado de 10 minutos, para que as cascas dos cistos
eclodidos flutuassem. Na parte inferior do carboy foi colocada uma fonte de luz que
atraía os náuplios causando a sua migração para o fundo do carboy. Através de uma
torneira os náuplios foram coletados com o auxílio de um puçá de malha fina.
Para a contagem dos náuplios de Artemia utilizou-se um balde graduado com 10
litros de água salobra, onde os náuplios foram homogeneizados e retirada uma amostra
de 10ml, a qual foi fixada em formol a 4% e observada em microscópio estereoscópico.
Estimada a quantidade total de náuplios de Artemia contidos no balde, o volume
necessário para a alimentação das larvas era retirado e novamente elevado a 10 litros
para posteriormente ser distribuído de acordo com a Tabela 3.
O cultivo em massa dos copépodos Tisbe biminiensis está descrito no capítulo 1
deste trabalho.
A coleta dos copépodos se deu com auxílio de peneiras granulométricas de 250 e
63µm de abertura de malha acopladas a um balde vazado. O conteúdo da caixa de
cultivo de copépodos era vertido na peneira de 250µm, que proporciona a passagem dos
náuplios e copepoditos para a peneira de 63µm, que não permite passagem de
copépodos em nenhum estágio de desenvolvimento. Os copépodos retidos na peneira de
250µm foram devolvidos para a caixa de cultivo e os que ficaram na de 63µm foram
colocados em um balde graduado preenchido com 4 litros de água a 35º/00. Após a
homogeneização do conteúdo, uma amostra de 10ml era retirada, fixada com formol a
4%, corada com Rosa de Bengala e contada em microscópio estereoscópico. O número
de copépodos contidos no balde era estimado, o volume necessário para alimentar as
larvas retirado e elevado para 10 litros com água salobra. Neste momento a água
salgada dos copépodos era substituída por água salobra, para que não ocorresse aumento
na salinidade da larvicultura após a introdução do alimento.
35
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
A distribuição do alimento vivo foi feita adicionando-se em cada tanque de
cultivo um determinado volume em mililitros de suspensão de Artemia ou T.
biminiensis de acordo com o tratamento que cada balde comportava (Tabela 3).
Tabela 3 - Esquema distribuição do alimento vivo nos experimentos testando a
substituição total e parcial de náuplios de Artemia pela prole do copépodo Tisbe
biminiensis na larvicultura de Macrobrachium rosenbergii.
Tratamento (% de
Número do
Volume de suspensão de
Volume de suspensão
substituição de Artemia)
tanque de
Artemia/tanque
de T.
cultivo
(ml)
biminiensis/tanque (ml)
5, 12, 13 e 16
1000
0
2 (25%)
1, 6, 8 e 9
750
250
3 (50%)
4, 7, 18 e 20
500
500
4 (75%)
10, 14, 15 e 17
250
750
5 (100%)
2, 3, 11 e 19
0
1000
TOTAL
-
10000
10000
1 (0%)
O alimento inerte, ministrado a partir do 12º dia de cultivo, foi o mesmo
utilizado na estação conhecido como Partículas Micro Encapsuladas (PME), cuja
formulação está apresentada na Tabela 4.
Tabela 4 - Ingredientes utilizados na formulação do alimento inerte (PME) produzido no
Laboratório de Larvicultura da Empresa Pernambucana de Pesquisa Agropecuária – IPA
– Estação Experimental de Ipojuca/PE.
Ingredientes
Quantidades
Vitamina A, B, C, D e E
Lula
1 drágea
800 g
Ovos de galinha
02
Sais minerais (Vionat C)
1 colher de chá
Alginato de sódio
1 colher de chá
Cloreto de sódio
0,5 g
Óleo de fígado de bacalhau
10 ml
Água salobra (12 º/oo)
1 litro
No preparo do PME os ingredientes, com exceção do cloreto de sódio, foram
misturados no liquidificador até se obter uma massa homogênea que foi cozida por 20
minutos em “banho-maria”. Após o resfriamento o cloreto de sódio foi adicionado à
massa, ficando essa repouso por 10 minutos. O excesso de água foi retirado
36
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
comprimindo a mistura em um pano de malha fina e esta foi então passada por peneiras
granulométricas, com abertura de malha variando entre 0,2 e 1,0 mm, a fim de se obter
partículas
de
tamanhos
diferentes
para
serem
fornecidas
de
acordo
com
o
desenvolvimento larval. O PME foi armazenado em freezer e fornecido as larvas
sempre as 08:00 e 12:00h, misturado-o a um pouco de água salobra e sendo distribuído
em quantidade de 5ml para cada balde de cultivo. O fornecimento do alimento vivo se
manteve às 16:00 h.
No momento em que se observou que a maioria das larvas haviam sofrido
metamorfose, ou seja passaram para o estágio de pós-larva, água doce começou a ser
introduzida de forma gradativa nos tanques de cultivo de modo que num período de dois
dias a salinidade dos cultivos chegasse a 0º/oo. Neste momento os cultivos foram
encerrados. Com o auxílio de um puçá as pós-larvas foram recolhidas dos tanques e
acondicionadas em potes plásticos com formol a 4% devidamente etiquetados com o
número do tanque para posterior contagem.
A eficiência das dietas foi avaliada com base na comparação da sobrevivência de
M. rosenbergii alimentados com o copépodo T. biminiensis em relação às alimentadas
com a Artemia. A Análise de Variância foi usada para a comparação das médias finais
de sobrevivência em cada tratamento após ser testada a normalidade dos resíduos e
homogeneidade das variâncias. O teste de Tukey foi usado posteriormente para
comparar as médias duas a duas (ZAR, 1999).
37
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
4. Resultados
4.1. Primeiro experimento (25/09 a 13/11/2003)
Os cultivos foram encerrados em um período de 50 dias, tempo necessário para
que a maioria das larvas sofressem metamorfose. O cultivo do tanque número 13 (T1)
foi eliminado no 10º dia, após ser observada a presença de uma pós-larva em estágio de
desenvolvimento avançado. Esta provavelmente foi introduzida no cultivo por meio do
termômetro que, até o momento, era compartilhado com os tanques de cultivo
comerciais do laboratório do IPA. A quantidade de larvas existentes no tanque estava
bastante reduzida, sugerindo que estas foram predadas pela pós-larva.
No 22º dia de cultivo foi constatada uma alta mortalidade em todas as réplicas
do tratamento alimentado com 100% de copépodo. As larvas que ainda estavam vivas,
se encontravam no 5º estágio larval e apresentando uma pigmentação azul. Neste
momento, estes cultivos foram encerrados.
A ocorrência das primeiras pós-larvas foi registrada no 33º dia de cultivo no
tratamento controle. Nos tratamentos que testavam a substituição da Artemia pelo
copépodo as primeiras pós-larvas surgiram no 41º dia nos tratamentos T2, T3 e T4.
Na Tabela 5 podem ser observados os resultados de sobrevivência de larvas e
pós-larvas de M. rosenbergii após a realização do primeiro teste de desempenho do
copépodo, assim como a média de comprimento total das pós-larvas para cada
tratamento testado.
Tabela 5 – Resultados do primeiro teste de desempenho do copépodo Tisbe biminiensis
na larvicultura de Macrobrachium rosenbergii.
Tratamento
Larvas
sobreviventes
Pós-larvas
sobreviventes
Total de
sobreviventes
T1 (controle)
média
20,3
desvio
21,3
média
22
desvio
15,6
média
42,3
T2 (25%copépodo)
1
0,81
2,5
2,38
4,75
T3 (50%copépodo)
1,25
0,95
1,5
0,57
T4 (75%copépodo)
1
0,81
1,75
T5 (100%copépodo)
0
0
0
desvio
36,6
Comprimento de
pós-larvas (mm)
média
7,7
desvio
0,32
2,62
7,8
0,40
2,75
1,25
7,7
0,62
1,50
2,75
1,70
7,75
0,31
0
0
0
0
0
38
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Na Figura 15 podem ser observadas as médias e os desvios padrão de
sobrevivência larval para cada tratamento. A Análise de Variância destes dados
logaritmizados (para a distribuição normal ser alcançada) mostrou que existe diferença
significativa entre as médias dos tratamentos 1 a 4 (p = 0,0018). O teste de Tukey
demonstrou que a média do controle (T1) foi significativamente maior que as dos
tratamentos T2, T3 e T4. A média de T5 (100% de substituição de Artemia) foi
obviamente diferente das demais.
90
Número de sobreviventes
80
a
70
60
50
40
30
20
b
10
b
b
c
50
75
100
0
0
25
Percentagem de substituição de A r t e m i a
Figura 15 – Médias e desvios padrão do número total de M. rosenbergii sobreviventes
após o primeiro teste de avaliação do T. biminiensis como substituto da Artemia. Letras
iguais representam médias não estatisticamente diferentes pelo Teste de Tukey.
4.2. Segundo experimento (13/02 a 23/03/2004)
No segundo teste de desempenho do T. biminiensis como substituto da Artemia
na larvicultura do M. rosenbergii, o tempo observado para que o número de pós-larvas
nos cultivos fosse superior ao de larvas, foi de 40 dias.
Devido à constatação de uma alta mortalidade larval, todas as réplicas do
tratamento 100% de substituição de Artemia foram encerradas no 16º dia de cultivo.
A ocorrência das primeiras metamorfoses para pós-larvas ocorreu no 27º dia de
cultivo para o tratamento controle e no 32º dia para os tratamentos T2, T3 e T4.
39
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Na Tabela 6 encontra-se representados os resultados do segundo teste de
desempenho em número de sobreviventes e comprimento das pós-larvas obtidas em
cada unidade experimental.
Tabela 6 – Resultados do segundo teste de desempenho do copépodo Tisbe biminiensis
na larvicultura de Macrobrachium rosenbergii.
Tratamento
Larvas
sobreviventes
Pós-larvas
sobreviventes
Total de
sobreviventes
Comprimento
de pós-larvas
(mm)
média
desvio
7,95
0,68
T1 (controle)
média
0
desvio
0
média
148,25
desvio
86,01
média
148,25
desvio
86,01
T2 (25%copépodo)
5,25
3,3
16
12,7
21,25
10,37
7,7
0,89
T3 (50%copépodo)
4,
2,9
8
2,70
12
4,39
7,7
1,05
T4 (75%copépodo)
1,5
2,38
3,75
2,21
5,25
3,59
7,8
0,43
T5 (100%copépodo)
0
0
0
0
0
0
0
0
As médias e os desvios padrão da sobrevivência larval do M. rosenbergii em
cada tratamento estão representadas na Figura 16 apresenta. A Análise de Variância
mostrou que há diferença significativa entre os tratamentos 1 a 4 (p = 0,0015). O teste
de Tukey mostrou que a média do cultivo controle (T1) foi significativamente maior
que a média dos tratamentos T2, T3 e T4, porém, estas últimas não são estatisticamente
diferentes.
40
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Número de sobreviventes
300
250
a
200
150
100
b
50
b
b
c
0
0
25
50
75
Percentagem de substituição de Artemia
100
Figura 16 – Médias e desvios padrões do número total de M. rosenbergii sobreviventes
após o segundo teste de avaliação do T. biminiensis como substituto da Artemia. Letras
iguais representam médias não estatisticamente diferentes pelo Teste de Tukey.
41
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
5. Discussão
De acordo com Cavalcanti et al. (1986), a carência de uma alimentação
adequada para as larvas de Macrobrachium rosenbergii estimula o canibalismo, o que
justificaria a grande redução no número de larvas do tanque de cultivo número 13 (T1),
no qual foi detectada a presença de uma pós-larva no 10º dia de cultivo do primeiro
experimento. A pós-larva se encontrava em estágio de desenvolvimento bem avançado
e, provavelmente devido à escassez de alimento que suprisse o seu requerimento
nutricional, predou as larvas estocadas neste tanque.
Os comprimentos médios das pós-larvas sobreviventes, em todos os tratamentos,
ao final dos dois períodos em que o teste de desempenho do copépodo foi realizado
encontram-se conforme a média estabelecida por Cavalcanti et al. (1986) que é 7,69.
Não foram encontrados na literatura trabalhos com a utilização de copépodos na
larvicultura de M. rosenbergii. Por isso, os resultados foram comparados com outros
tipos de alimentos utilizados na larvicultura deste camarão e com trabalhos que tivessem
por objetivo a substituição da Artemia no cultivo de peixes e de outras espécies de
camarão.
Os resultados obtidos demonstram que o copépodo Tisbe biminiensis não pode
substituir totalmente os náuplios de Artemia sp. na larvicultura de M. rosenbergii. Silva
(1994) e Thomaz (2002) também verificaram mortalidade total das larvas quanto
testaram a substituição total dos náuplios de Artemia pelo nematóide Panagrellus
redivivus e pelo rotífero Brachionus plicatilis, respectivamente, na larvicultura de M.
rosenbergii.
No experimento realizado por Kovalenko et al. (2002) a sobrevivência alcançada
no tratamento controle não diferiu estatisticamente da sobrevivência alcançada no
tratamento que substituiu totalmente os náuplios de Artemia por uma ração micro
particulada. Porém, neste trabalho as larvas de M. rosenbergii só foram submetidas ao
novo regime alimentar quando se encontravam no 5º estágio de desenvolvimento larval.
Nesta fase as larvas deste camarão já se encontram menos dependentes de Artemia. De
acordo com Barros e Valenti (2003a), entre o II e VI estágio de desenvolvimento, até
50% das larvas de M. rosenbergii já são capazes de capturar e satisfazer suas
necessidades nutricionais com a ração.
42
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Heath e Moore (1997) e Callan et al. (2002) ao testarem a substituição dos
náuplios de Artemia na larvicultura das espécies de peixe Solea solea e Gadus morhua
pelo copépodo Tisbe holothuriae e por uma dieta micro particulada, respectivamente,
não encontraram diferença significativa entre os tratamentos que testavam a substituição
parcial e total da Artemia em relação ao tratamento controle. Porém, nesse trabalho os
alevinos foram alimentados durante um determinado tempo com náuplios de Artemia e
só posteriormente foram submetidos ao teste. Estas larvas poderiam estar menos
dependentes da Artemia, em termos nutricionais, e o alimento oferecido nos testes ter
suprido as necessidades alimentares exigidas pelo estágio de desenvolvimento que elas
se encontravam.
A diferença estatística, em termos de sobrevivência larval, obtidas entre o
tratamento controle e os tratamentos que testaram a substituição parcial da Artemia
também foram verificada por Silva (1994), porém este autor obteve uma taxa de
sobrevivência relativamente alta no tratamento que substituiu em 34% a Artemia pelo
nematóide Penagrellus redivivus (31,2% contra 46,7% do tratamento controle). Thomaz
(2002) não constatou diferença significativa entre o tratamento controle (68,3%) e os
tratamentos que substituíam a Artemia pelo rotífero B. plicatillis nos níveis de 40
(68,86%) e 60% (64,60%) alcançando taxas de sobrevivência altas em todos os
tratamentos.
Quando a prole de copépodo é fornecida para larvas vai acompanhada de restos
de ração e várias pelotas fecais de copépodos, pois estes possuem dimensões
semelhantes as dos náuplios de copépodo e não conseguem ser separados por peneiras.
Estas pelotas podem representar fonte alimentar para as larvas pois, carregam
microalgas e restos de ração em seu interior. Porém, a presença de bactérias que
encontraram junto aos detritos dos copépodos um ambiente propício para o seu
desenvolvimento não é descartada. Uma vez introduzida na larvicultura, estas bactérias
podem atingir as larvas de forma prejudicial, fato que também pode explicar a alta
mortalidade larval ocorrente nos cultivos com de introdução de copépodos. A grande
diferença no número médio de pós-larvas sobreviventes entre os cultivos controle e o
tratamento com 25% de introdução de copépodos, superior aos 25% esperados, caso não
houvesse ingestão de copépodos
por parte das larvas, também pode ser explicada por
uma possível contaminação bacteriana.
43
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
De uma maneira geral as taxas de sobrevivência larval de M .rosenbergii obtidas
neste trabalho foram muito inferiores aos resultados esperados, inclusive nos cultivos
controle (média de 2% para o primeiro experimento e 7% para o segundo). Segundo
Correia e Castro (1998) as taxas médias de sobrevivência nos laboratórios que operam
com o sistema de cultivo aberto em escala comercial ficam entre 40 e 60%.
Os resultados alcançados no laboratório de larvicultura do IPA para o VI ciclo
do ano de 2003, período em que foi realizado o primeiro experimento, mostram uma
taxa de sobrevivência em torno de 7% (Relatórios Internos do IPA, dados não
publicados). Esta baixa sobrevivência tanto no experimento quanto na larvicultura
comercial poderia ser explicada por uma qualidade larval inferior ou por problemas na
qualidade da água usada para ambos. Contudo, no período em que foi realizado o
segundo teste de desempenho do copépodo na larvicultura do M. rosenbergii, a
sobrevivência obtida no cultivo comercial do IPA chegou a 80% (Relatórios Internos do
IPA, dados não publicados).
As quantidades mínimas de náuplios de Artemia fornecidos para larvas de M.
rosenbergii com as respectivas médias de sobrevivência obtidas por diversos autores e
no laboratório de larvicultura do IPA estão representadas na Tabela 7.
A
quantidade
de
alimento
fornecido
às
larvas
no
presente
trabalho,
5náuplios/larva durante todo o período de realização do primeiro experimento de
larvicultura e de 10 náuplios/larva a partir do 10º dia do segundo experimento, quando
são convertidas para a proporção náuplios/mililitro, estão abaixo do estabelecido por
Barros & Valenti (2003b) que é um mínimo de 2 larvas/ml. Porém, analisando a tabela
7 podemos observar controvérsias em relação à densidade de náuplios de Artemia
fornecidos e as respectivas taxas de sobrevivência alcançadas por diversos autores.
Tabela 7 – Densidades mínimas de náuplios de Artemia fornecidas para larvas de M.
rosenbergii e respectivas médias de sobrevivência obtidas.
Fonte
Densidade de náuplios
Média de sobrevivência
Laboratório do IPA
0,5 náuplios/ml
7-80%
Cavalcanti et al.(1986)
3 náuplios/ml
40-60%
Silva (1994)
3 náuplios/ml
47,7%
Valenti et al. (1998)
5náuplios/ml
50%
Correia & Castro (1998)
>1 náuplios/ml
40-60%
Thomaz (2002)
5 náuplios/ml
68,3%
Barros e Valenti (2003b)
2náuplios/ml
-
44
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Segundo Correia e Castro (1998) o surgimento das primeiras pós-larvas na
larvicultura de M. rosenbergii tem início a partir do 20º dia de cultivo. Neste trabalho o
tempo requerido pelas larvas para realização da metamorfose no cultivo controle (33
dias no primeiro experimento e 27 dias no segundo) foi superior ao registrado por estes
autores. Silva (1994) observou as primeiras pós-larvas no tratamento controle a partir do
21º dia de cultivo e sugere que a substituição da Artemia pelo nematóide Panagrellus
redivivus retardou o aparecimento das pós-larvas nos tratamentos T2 (23º dia) e T3 (29º
dia). Thomaz (2002) a partir do 21º dia ciclo larval, observou a presença de pós-larvas
no tratamento controle e nos demais tratamentos que testavam a substituição da Artemia
pelo rotífero Brachionus plicatilis.
A partir do 10º dia de cultivo do segundo experimento o número de náuplios/ml
de Artemia ou copépodo fornecido diariamente às larvas foi elevado de 0,25 para 0,50.
Quando observou-se que o tempo para surgimento das primeiras pós-larvas foi menor
no segundo experimento (27 dias comparado aos 33 dias do primeiro), pode-se deduzir
que a maior oferta de alimento acelerou a metamorfose larval.
Apesar da quantidade de alimento por mililitro fornecido às larvas ser inferior ao
utilizado e recomendado por alguns autores, observações realizadas diariamente em
todos os tanques de cultivo indicavam a constante presença de sobras de alimento.
Alguns autores sugerem que estas observações sejam realizadas no intuito de se ajustar
a quantidade de alimento a ser fornecido subseqüentemente (CAVALCANTI et
al.,1986; CORREIA & CASTRO, 1998; VALENTI et al., 1998). Barros & Valenti
(1997), analisando o comportamento alimentar das larvas M. rosenbergii, relatam que
geralmente a captura do alimento se dava quando este se encostava aos apêndices
torácicos das larvas. Entretanto, verificaram casos de direcionamento e locomoção
destes animais em busca do alimento. Esta observação quando aliada à grande
quantidade de sobra de alimento, constatada diariamente, vem fortalecer a hipótese de
que a quantidade de alimento fornecido as larvas foi suficiente para que elas o
percebessem e se alimentassem.
Observações em lupa demonstraram que as larvas são capazes de capturar e se
alimentar dos copépodos. A manutenção do fornecimento de alimento para as larvas
estabelecido pela proporção náuplios/larva consiste num fator que pode ter influenciado
os resultados não só de mortalidade total, do tratamento que substituiu em 100% os
náuplios de Artemia, mas também ter afetado a taxas de sobrevivência obtidas nos
demais tratamentos inclusive no tratamento controle.
45
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
Vale ressaltar que presente trabalho testou a substituição numérica dos náuplios
de Artemia pela prole copépodo T. biminiensis, e que a prole de copépodo é, em sua
grande maioria, composta por indivíduos no estágio de náuplio e que este possui
tamanho inferior relação ao náuplio de Artemia. Estudos futuros deverão estabelecer a
quantidade de copépodos que equivalha a um náuplio de Artemia, trazendo assim mais
confiabilidade aos experimentos de substituição.
Os tanques de cultivo utilizados na realização deste trabalho podem ser apontado
como outra possível causa para os resultados de baixa sobrevivência. O fato de estes
terem sido confeccionados na época de realização dos experimentos levanta a
possibilidade de liberação de substâncias tóxicas para a água de cultivo, uma vez que os
elementos utilizados na confecção destes tanques ainda não tinham passado por um
longo período de “maturação”. Cuidados foram tomados para evitar estes possíveis
danos (realização de várias lavagens e secagens ao sol), porém, estes podem ter sido
insuficientes.
Futuramente novos experimentos deverão ser realizados com o intuito de se
sanar possíveis dúvidas em relação à quantidade ideal de alimento a ser fornecido para
larvas de Macrobrachium rosenbergii. Testes realizados em aquários de vidro podem
ser realizados na tentativa de verificar a toxicidade dos tanques de cultivo
confeccionados em fibra de vidro.
46
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
6. Considerações finais
As baixas taxas de sobrevivência larval obtidas neste trabalho, sobretudo nos cultivos
controle, e o maior tempo requerido pelas larvas de M. rosenbergii para realização da
metamorfose sugerem que a quantidade de alimento fornecido pode ter influenciado os
resultados obtidos.
A recente confecção dos tanques de cultivo é outro fator que pode ser apontado
como possível causa dos resultados de baixa sobrevivência obtidos neste trabalho.
Sugere-se então que a substituição total ou parcial dos náuplios de Artemia pelo
copépodo Tisbe biminiensis não seja descartada, mas sim reavaliada num futuro estudo
que adote uma nova metodologia de cultivo estabelecendo o fornecimento de alimento
para as larvas na proporção de náuplios/mililitro e que a realização do cultivo
experimental se de em recipientes de vidro, visando minimizar problemas referentes à
toxicidade, mesmo que para isso seja necessário que o experimento seja realizado em
escala inferior à comercial.
47
Ribeiro, A.C.B. Cultivo em massa do copépodo bentônico Tisbe biminiensis (Harpacticoida) e sua utilização na larv...
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